农杆菌介导的Cas9基因转化金针菇的研究

发布时间：2018-05-13 21:48

  本文选题：金针菇 + 农杆菌介导法　； 参考：《食用菌学报》2017年03期

【摘要】：将酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)Cas9序列(SpCas9序列,Addgene#43802)根据金针菇(Flammulina velutipes)的密码子偏好性进行优化,并构建FvCas9双元表达载体,利用农杆菌介导法转化金针菇单核体Dan3,经抗性培养基筛选以及潮霉素和Cas9基因PCR扩增验证,结果显示Cas9基因已经成功转入金针菇菌丝体中,转化率为6.84%。
[Abstract]:Streptococcus pyogenes)Cas9 sequence (SpCas9) and Addgene#43802) were optimized according to the codon preference of Flammulina velutipes. and the FvCas9 expression vector was constructed. Agrobacterium tumefaciens mediated transformation of Flammulina velutipes mononuclear Dan3 was carried out. The results showed that the Cas9 gene had been successfully transferred into Flammulina velutipes mycelia and the conversion rate was 6.84 by screening of resistant medium and PCR amplification of hygromycin and Cas9 genes.
【作者单位】： 上海市农业科学院食用菌研究所 农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室 国家食用菌工程技术研究中心 上海市农业遗传育种重点实验室;
【基金】：上海市市级农口系统青年人才成长计划项目[沪农青字(2017)第1-13号];上海市市级农口系统青年人才成长计划项目[沪农青字(2017)第1-11号] 上海市科技兴农重点攻关项目[沪农科攻字(2015)第5-1号]资助
【分类号】：S646.15
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本文编号：1884967