转Bt基因欧洲黑杨转化TA29-Barnase基因的研究

发布时间：2018-05-27 04:45

  本文选题：转Bt基因欧洲黑杨 + Barnase基因　； 参考：《西北林学院学报》2017年01期

【摘要】：为了获得雄性不育转Bt基因欧洲黑杨,在以叶片为外植体建立转Bt基因欧洲黑杨叶片组培再生体系的基础上,利用农杆菌介导叶盘法将TA29-Barnase基因转化到转Bt基因欧洲黑杨中。结果表明,转Bt基因欧洲黑杨叶片不定芽分化最适培养基为:MS+0.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.05mg·L~(-1) NAA+0.01mg·L~(-1) TDZ+30g·L~(-1)蔗糖+6g·L~(-1)琼脂;不定芽生根最适培养基为:1/2MS+0.05mg·L~(-1) NAA+0.2mg·L~(-1) IBA+20g·L~(-1)蔗糖+6g·L~(-1)琼脂;经过在叶片不定芽诱导及生根诱导培养基添加除草剂PPT连续筛选,共获得9株抗性植株。对抗性植株进行基因特异性PCR检测,其中有5株呈阳性,转化阳性率达55.6%。初步表明获得了转Barnase基因的转Bt基因欧洲黑杨植株。
[Abstract]:In order to obtain transgenic black poplar with BT gene, TA29-Barnase gene was transformed into BT transgenic black poplar by Agrobacterium tumefaciens mediated leaf disc method on the basis of establishing the regeneration system of transgenic BT transgenic poplar leaves using leaves as explants. The results showed that the most suitable medium for adventitious bud differentiation of black poplar leaves with BT gene was MS: 0. 5 mg / L ~ (1) 6-BA 0.05mg / L ~ (1) NAA 0.01mg / L ~ (1) NAA 0.01mg / L ~ (1) TDZ ~ (30) g / L ~ (-1) sucrose 6 g / L ~ (-1) Agar, and the optimum medium for rooting of adventitious bud was: 1 / 1 / 2 MS / 0.05mg / L ~ (1) NAA 0.2mg / L ~ (1) IBA ~ (20 g / L ~ (-1) sucrose 6 g / L ~ (-1) Agar. After continuous selection of herbicide PPT on adventitious bud induction and rooting induction medium, 9 resistant plants were obtained. Five of the resistant plants were positive for gene specific PCR, and the positive rate of transformation was 55.6%. The results showed that the transgenic BT transgenic poplar plants with Barnase gene were obtained.
【作者单位】： 西北农林科技大学林学院;
【基金】：国家林业局948项目“转基因林木生物安全控制及早期评价技术引进”(2013-4-38)
【分类号】：S792.119

【参考文献】

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本文编号：1940506