RNAi沉默GTPBP4基因对结肠癌RKO细胞增殖及凋亡的影响
发布时间:2018-05-27 22:23
本文选题:结肠癌 + 慢病毒 ; 参考:《肿瘤防治研究》2017年01期
【摘要】:目的探讨GTPBP4基因沉默后,RKO细胞增殖和凋亡等生物学行为的改变。方法将慢病毒GTPBP4-siRNA及CON053阴性病毒转染结肠癌RKO细胞株,以Real-time PCR和Western blot检测敲减效率。Cellomics细胞计数检测细胞生长,MTT法检测细胞增殖,FACS法进行细胞周期检测,并进行细胞克隆形成实验,AnnexinⅤ-APC单染法流式细胞仪检测细胞凋亡。结果慢病毒成功感染RKO细胞,m RNA和蛋白检测均显示GTPBP4基因敲减成功。GTPBP4基因敲减后,RKO细胞增殖速率受到显著抑制,MTT值比值(即增殖倍数)减小,G_(0/1)、G_2/M期细胞显著增多,S期明显减少,细胞克隆集落数目减少,凋亡峰值明显高于对照组,且峰值出现时间早于对照组。结论 GTPBP4基因可能通过促进肿瘤细胞增殖、抑制凋亡而影响结肠癌的发生发展。
[Abstract]:Objective to investigate the changes of proliferation and apoptosis of GTPBP4 cells after GTPBP4 gene silencing. Methods Lentivirus GTPBP4-siRNA and CON053 negative viruses were transfected into colon cancer RKO cell lines. Cell proliferation was detected by Real-time PCR and Western blot assay. Cell proliferation was detected by cell growth assay. Cell apoptosis was detected by Annexin 鈪,
本文编号:1944044
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