防御素基因在乌金猪与约大乌猪组织中的表达及东亚飞蝗抗菌活性物质对防御素基因表达的调节作用

发布时间：2018-06-07 17:47

  本文选题：乌金猪 + 约大乌猪　； 参考：《动物营养学报》2016年07期

【摘要】：本试验旨在检测β防御素-1(p BD-1)、β防御素-2(p BD-2)和β防御素-3(p BD-3)基因在乌金猪和具有乌金猪血缘的约大乌猪不同组织中的表达,并探讨东亚飞蝗抗菌活性物质(LAAS)对猪胎儿皮肤成纤维细胞(PFSF)免疫应激参数和防御素(p BDs)基因表达的调节作用。采用实时荧光定量PCR方法检测2月龄乌金猪与约大乌猪心脏、肝脏、肺脏、肾脏、空肠、回肠、十二指肠、皮肤、肌肉、胰腺、睾丸或卵巢这12种组织中p BD-1、p BD-2和p BD-3基因的表达差异;采用培养至第4~5代的PFSF,通过脂多糖(LPS)诱导建立免疫应激模型,在DMEM/F12培养液中添加不同浓度(0、75、150、300、600和1 200μg/m L)的LAAS,考察LAAS对PFSF免疫应激参数和p BD-1、p BD-2、p BD-3基因表达的影响。结果表明:1)乌金猪血清溶菌酶(LSZ)活性、免疫球蛋白G(Ig G)含量显著高于约大乌猪(P0.05),血清一氧化氮(NO)含量极显著低于约大乌猪(P0.01)。2)约大乌猪大多数组织中p BD-1、p BD-2和p BD-3基因的表达量高于乌金猪;2个品种猪的p BD-1和p BD-3基因均在皮肤和卵巢中表达量较高,p BD-2基因在肝脏和肾脏中表达量较高。3)300μg/m L LAAS极显著降低了培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性(P0.01);LAAS极显著增加了培养液中NO含量(除75μg/m L组正常细胞外)(P0.01),正常细胞和应激细胞均在LAAS浓度为600μg/m L时达到最高;LAAS浓度为0、75和150μg/m L时应激细胞一氧化氮合酶(NOS)活性显著或极显著高于正常细胞(P0.05或P0.01);添加1 200μg/m L LAAS可极显著降低培养液中的LSZ活性(P0.01),LAAS浓度为150、300、600和1 200μg/m L时应激细胞与正常细胞中LSZ活性差异显著或极显著(P0.05或P0.01)。4)应激细胞p BD-1、p BD-2和p BD-3基因的表达量均高于正常细胞;当LAAS浓度为150μg/m L时,p BD-1、p BD-2和p BD-3基因的表达量最高。结果提示,乌金猪和约大乌猪防御素基因的表达存在明显的品种差异性和组织特异性,适宜浓度的LAAS能够降低PFSF中LDH活性,提高NO含量及NOS、LSZ活性,上调应激细胞与正常细胞防御素的表达量。
[Abstract]:The aim of this study was to detect the expression of 尾 -defensin -1p BD-1, 尾 -defensin -2pBD-2) and 尾 -defensin -3pBD-3) in different tissues of Wujin pig and about big black pig with blood relationship of Wujin pig. To investigate the effect of LAASA on the immune stress parameters of porcine fetal skin fibroblasts (PFSFs) and the expression of defensin p BDs1 gene. The heart, liver, lung, kidney, jejunum, ileum, duodenum, skin, muscle and pancreas were detected by real-time fluorescent quantitative PCR. The expression of pBD-1pBD-2 and pBD-3 genes in the testis or ovaries was different, and the immune stress model was established by using PFSFs cultured to the 4th generation and induced by lipopolysaccharide (LPSs). To investigate the effects of LAAS on PFSF immune stress parameters and the expression of pBD-2pBD-3 gene in DMEM / F12 medium supplemented with different concentrations of 0 075 150300 600 and 1 200 渭 g / mL, the effects of LAAS on PFSF immune stress parameters were investigated. The results showed that the serum lysozyme (LSZ) activity of wujin pig, The content of immunoglobulin G (IGG) was significantly higher than that of P0.05G, and the content of serum nitric oxide (no) was significantly lower than that of P0.01g. 2) the expression of pBD-1pBD-2 and pBD-3 genes in most tissues of WW pigs was higher than that of Ujin pigs, and the expression levels of pBD-1pBD-2 and pBD-3 genes in two breeds of pigs were higher than those of Wujin pigs. The expression of pBD-1 and pBD-3 genes were higher in skin and ovary. The expression of pBD-2 gene in liver and kidney was higher. 300 渭 g / m LAAS significantly decreased the activity of lactate dehydrogenase LDH in the culture medium P0.01 / L LAAS significantly increased the content of no in the culture medium. The activity of nitric oxide synthase (NOSs) in stress cells was significantly or significantly higher than that in normal cells at the concentration of 600 渭 g / mL and 150 渭 g / mL, respectively, when the concentration of LAAS was 600 渭 g / mL, and the activity of NOS in stress cells was significantly higher than that in normal cells (P 0.05 or P 0.05). 1 200 渭 g / m LAAS significantly decreased LSZ activity in culture medium. The difference of LSZ activity between stress cells and normal cells was significant or extremely significant when the concentration of P0.01 渭 g / mL was 150300600 and 1 200 渭 g / mL, respectively (P0.05 or P0.01n.4) the expression of pBD-1pBD-2 and pBD-3 genes in stress cells was significantly lower than that in normal cells (P0.05 or P0.01mLLAAS. 4) the expression of pBD-1pBD-2 and pBD-3 genes in stress cells was significantly lower than that in normal cells. The quantity was higher than that of normal cells. When the concentration of LAAS was 150 渭 g / mL, the expression of pBD-1pBD-2 and pBD-3 genes was the highest. The results suggested that the expression of defensin gene in Wujin pig and Yorkshire pig had obvious varietal difference and tissue specificity. The suitable concentration of LAAS could decrease LDH activity in PFSF and increase no content and NOSN LSZ activity. Upregulate the expression of defensin in stress cells and normal cells.
【作者单位】： 云南农业大学云南省动物营养与饲料重点实验室;
【基金】：云南省重大科技专项基金(2012ZA018) 云南现代农业生猪产业技术体系2014[云财教]105#、2015[云财教]90#、2016[云财教]112#
【分类号】：S828

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：1992147