焦磷酸测序分析表皮生长因子受体21号外显子基因突变方法的建立

发布时间：2018-07-09 10:32

  本文选题：焦磷酸测序 + EGFR　； 参考：《现代预防医学》2017年10期

【摘要】：目的建立表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)21号外显子基因突变的焦磷酸测序方法。方法用纯野生和纯突变的EGFR21质粒DNA按比例配制7份不同突变比例的DNA样本和1份正常人血液样本,对焦磷酸测序技术检测EGFR21基因突变方法进行验证,制备175例非小细胞肺癌标本g DNA,应用Qigene Pyro Mark Q24焦磷酸测序仪进行EGFR21基因的焦磷酸测序。结果建立了可同时检测EGFR基因21号外显子L858R和L861Q突变的焦磷酸测序方法,175例非小细胞肺癌标本中共检测出EGFR21突变型样本29例,总突变率为16.57%(29/175),其中L858R突变占14.29%(25/175),L861Q突变占2.28%(4/175)。结论 EGFR21基因突变的焦磷酸测序新方法具有快速、简便、灵敏度和准确度高的优点,特别适合于科研和临床批量检测的需要。
[Abstract]:Objective to establish a pyrosequencing method for exon 21 mutation of epidermal growth factor receptor (EGFR). Methods Seven samples of EGFR21 plasmid DNA with different mutation proportions and one normal blood sample were prepared with pure wild and pure mutated EGFR21 plasmid DNA. The detection of EGFR21 gene mutation by pyrosequencing was performed. The EGFR21 gene was sequenced by Qigene Pyro Mark Q24 pyrosequencing apparatus in 175 specimens of non-small cell lung cancer (NSCLC). Results the pyrosequencing method for simultaneous detection of L858R and L861Q mutations in exon 21 of EGFR gene was established. A total of 29 samples of EGFR21 mutation type were detected in 175 non-small cell lung cancer samples. The total mutation rate was 16.57% (29 / 175), of which L858R mutation accounted for 14.29% (25 / 175) and L861Q mutation accounted for 2.28% (4 / 175). Conclusion the new pyrosequencing method for EGFR21 gene mutation has the advantages of fast, simple, high sensitivity and high accuracy. It is especially suitable for scientific research and clinical batch detection.
【作者单位】： 长沙卫生职业学院;中南大学临床药理研究所;中南大学湘雅医院临床药理研究所;
【分类号】：R734.2

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