番茄OPA3-like基因的生物信息学分析及原核表达
[Abstract]:[Objective] to obtain highly expressed optic nerve atrophy protein 3 (OPA3-like) and analyze its bioinformatics function. [Methods] the basic physicochemical properties of OPA3-like protein, signal peptide, transmembrane region and subcellular localization of OPA3-like protein were analyzed by using Vector NTI and ExPASy, Signal P, Plant-mPLoc and other online tools. T28a-OPA3-like, pET32a-OPA3-like were transformed into Escherichia coli BL21 (DE3) and Rosetta (DE3) respectively. The fusion protein was induced by IPTG, and the results were verified by SDS-PAGE. [results]OPA3-like protein is an unstable protein, which contains a transmembrane region and may be located in the chloroplast; the prokaryotic expression indicates that the fusion protein is two for the same recombinant plasmid. There was no obvious difference in the amount of expression in the bacteria, of which the conversion of pET28a-OPA3-like could express the fusion protein of 20kDa, and the conversion of pET32a-OPA3-like could express the fusion protein of the 37kDa, and the expression of the inclusion body was mainly in the form of inclusion body, transforming the expression of pET22b-OPA3-like non fusion protein. [Conclusion] the expression bacteria of the transformed pET32a-OPA3-like can express the fusion efficiently. Protein (37 kDa) is helpful to further study the subcellular localization and function of OPA3-like in plants.
【作者单位】: 石河子大学农业生物技术重点实验室;
【基金】:国家自然科学基金项目(“番茄OPA3-like基因的功能研究”,No.31460466)
【分类号】:Q946.1
【参考文献】
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【共引文献】
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【二级参考文献】
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,本文编号:2123389
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