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Bcl-2和BaK基因沉默对MG-63细胞凋亡和成骨活动的影响

发布时间:2018-10-20 16:37
【摘要】:目的探讨Bcl-2和Bak基因沉默对MG-63细胞凋亡、成骨活动以及钙离子浓度的影响。方法构建沉默Bcl-2和BaK表达的腺病毒载体,scramble RNA载体转染MG-63细胞,采用MTT检测转染后细胞存活率的情况,并应用ALP观察转染后细胞成骨活动情况以及流式细胞术检测钙离子的浓度间接测定细胞凋亡情况。结果 Bcl-2基因沉默后48 h相对对照组,细胞存活率降低,成骨活动减少,钙离子浓度升高;BaK基因沉默后细胞增存活率升高,成骨活动增加,细胞内钙离子浓度降低,而Bcl-2+BaK联合沉默组与对照组在各观察指标上差异无显著性。结论 Bcl-2和BaK基因沉默对人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡,钙离子浓度变化以及成骨活动产生影响,表明其可能与骨质疏松的发病有密切的关联。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of Bcl-2 and Bak gene silencing on apoptosis, osteogenesis and calcium concentration in MG-63 cells. Methods Adenoviral vector, scramble RNA, which silenced the expression of Bcl-2 and BaK, was constructed and transfected into MG-63 cells. MTT was used to detect the survival rate of the transfected cells. The osteogenic activity of transfected cells was observed by ALP and apoptosis was detected indirectly by flow cytometry. Results 48 hours after Bcl-2 gene silencing, cell survival rate decreased, osteogenesis activity decreased and calcium concentration increased, while BaK gene silencing increased cell viability, osteogenesis activity and intracellular calcium concentration. However, there was no significant difference between the Bcl-2 BaK combined silencing group and the control group. Conclusion Bcl-2 and BaK gene silencing has an effect on apoptosis, calcium concentration and osteogenesis activity of human osteosarcoma MG-63 cells, suggesting that the silencing of Bcl-2 and BaK genes may be closely related to the pathogenesis of osteoporosis.
【作者单位】: 广州中医药大学第三临床医学院;广州中医药大学第三附属医院;广州中医药大学护理学院;广州中医药大学研究生学院;
【基金】:国家自然科学基金(编号:81674004,81373653) 广东省科技计划项目(编号:2016A020216024)
【分类号】:R580

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本文编号:2283737

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