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发酵条件优化及基因簇加倍对厦门霉素生物合成的影响

发布时间:2018-10-21 07:33
【摘要】:【目的】优化发酵培养条件及加倍xim基因簇,提高厦门霉素的产量。【方法】采用单因素添加:C源(鼠李糖、葡萄糖酸)、无机N源(KNO3)、稀有金属元素(Sc Cl3)及A-Factor(γ-丁内酯),优化适宜厦门链霉菌318菌株产生厦门霉素的培养条件;通过位点特异性整合将厦门霉素生物合成基因簇进行加倍,构建高产的基因工程菌株厦门链霉菌318Pls1,并对其培养基进行了正交实验优化。【结果】与初产量(15 mg/L)相比,在GYM培养基中进行单因素添加可使318菌株的厦门霉素产量达到20 mg/L;而基因簇加倍菌株318Pls1在GYM培养基上的厦门霉素产量可达35 mg/L,在正交实验优化后的9#培养基中厦门霉素产量可达76.15 mg/L。【结论】对厦门霉素的发酵培养条件进行了优化,并通过基因簇过表达获得了生物合成能力提高的菌株,为进一步提高其产量奠定了基础。
[Abstract]:[objective] to optimize the fermentation conditions and double xim gene cluster to increase the yield of Xiamen mycin. [methods] single factor addition: C source (rhamnose) was used. Gluconic acid, inorganic N source (KNO3), rare metal element (Sc Cl3) and A-Factor (纬 -butyrolactone) were optimized for the production of Xiamen mycin by Streptomyces Xiamen 318, and the biosynthesis gene cluster of Xiamen mycin was doubled by site-specific integration. The high yield genetic engineering strain Streptomyces Xiamen 318Pls1 was constructed, and its medium was optimized by orthogonal experiment. [results] compared with the initial yield (15 mg/L), the culture medium of Streptomyces Xiamen was optimized by orthogonal experiment. By adding a single factor into GYM medium, the yield of Xiamen mycin of 318 strain can reach 20 mg/L;, and that of 318Pls1 of gene cluster doubling strain on GYM medium can reach 35 mg/L,. After orthogonal experiment, the yield of Xiamen mycin can reach 35 mg/L,. After orthogonal experiment, the yield of Xiamen mycin can be up to 35 mg/L,. The yield of amphomycin was 76.15 mg/L. [conclusion] the fermentation conditions of Xiamen mycin were optimized. The strain with improved biosynthesis ability was obtained by over-expression of gene cluster, which laid a foundation for further increasing its yield.
【作者单位】: 上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室;上海交通大学系统生物医学研究院;上海交通大学海洋研究院;
【基金】:国家自然科学基金项目(No.81473105)~~
【分类号】:TQ920.6

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