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辣椒细胞质雄性不育相关基因的克隆与表达分析

发布时间:2018-10-24 17:59
【摘要】:以辣椒细胞质雄性不育系21A及其相应保持系21B为试材,根据辣椒细胞质雄性不育相关基因orf456序列设计特异引物,对21A及21B的基因组DNA进行特异性扩增,获得了不育系特有的目的条带,克隆测序表明其大小为292bp,命名为CMS292。采用QRT-PCR方法,研究了CMS292分别在蕾期、盛花期对根、茎、叶和花蕾中的表达水平的影响,以期探索雄性不育相关基因的表达机制。结果表明:该基因只在不育系中表达,并且在所检测的组织中都有表达;蕾期根和花蕾中的表达量明显高于茎和叶,盛花期根和叶中的表达量高于茎和花蕾;从蕾期到盛花期根、茎和花蕾中的表达量呈下降趋势,而叶中的表达量呈上升趋势,推测CMS292控制辣椒花药中蛋白的表达,引起小孢子败育,进而导致雄性不育。
[Abstract]:The cytoplasmic male sterility (CMS) line 21A and its maintainer line 21B were used as test materials. Specific primers were designed according to the orf456 sequence of cytoplasmic male sterility related genes in capsicum, and the genomic DNA of 21A and 21B were amplified specifically. A specific target band of male sterile line was obtained. Cloning and sequencing showed that its size was 292 BP, named CMS292.. The effects of CMS292 on the expression levels of root, stem, leaf and bud in bud stage and flowering stage were studied by QRT-PCR method, in order to explore the expression mechanism of male sterility related genes. The results showed that the gene was only expressed in sterile lines and expressed in all the tested tissues, and the expression levels in roots and buds at bud stage were significantly higher than those in stems and leaves, and those in roots and leaves in flowering stage were higher than those in stems and buds. From bud stage to full flowering stage, the amount of expression in stem and bud decreased, but increased in leaf. It was speculated that CMS292 controlled the expression of protein in anther of capsicum, which led to microspore abortion and then to male sterility.
【作者单位】: 江苏省中国科学院植物研究所;江苏省农业科学院蔬菜研究所;
【基金】:国家“863”计划资助项目(2006AA100108,2008AA10Z150) 国家科技支撑计划资助项目(2006BAD01A7-04-03,2008BADB1B04) 江苏省科技支撑计划资助项目(BE2009309) 江苏省中国科学院植物研究所“绿手指”基金资助项目(01-06-11)
【分类号】:S641.3

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