靶向沉默RACK1基因对人肺腺癌裸鼠皮下移植瘤及化疗敏感性的影响

发布时间：2018-11-09 15:39

【摘要】：目的:通过裸鼠皮下移植瘤的体内实验,研究沉默活化的蛋白激酶C受体1(receptor for activated C kinase 1,RACK1)表达对于肺腺癌肿瘤生长速度及其对顺铂、紫杉醇两种化疗药物敏感性的影响。方法:(1)使用人肺腺癌A549细胞株建立裸鼠皮下移植瘤模型。(2)待肿瘤直径为0.3cm-0.5cm时,将荷瘤裸鼠随机分成3组,每组18只,分别于瘤内注射生理盐水(Control组)、空载质粒-脂质体复合物(Vector-sh RNA组)及sh RNA-RACK1质粒-脂质体复合物(RACK1-sh RNA组)。(3)转染成功后,将RACK1-sh RNA组、Vector-sh RNA组和Control组三组根据注射药物不同每组分为生理盐水组、顺铂组和紫杉醇组,每组6只,腹腔灌注化疗,隔日给药。(4)观察三组裸鼠转染前后与化疗前后的皮下移植瘤体积变化,绘制肿瘤生长曲线,并用western-blot检测各组肿瘤组织中RACK1蛋白的表达。(5)于28d时处死裸鼠,剥离肿瘤。一部分移植瘤组织置于4%多聚甲醛固定液中浸泡,石蜡包埋后行HE染色,一部分移植瘤组织置于液氮中保存,行Western Blot检测。结果:(1)成功建立人肺腺癌A549细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,经HE染色病理学检查,证实模型具有类似人肺腺癌的病理学特征。(2)移植瘤形成后第28天,RACK1-sh RNA组皮下移植瘤体积为197.04±39.24mm3,重量为0.17±0.04g;Vector-sh RNA组皮下移植瘤体积为275.35±61.71mm3,重量为0.27±0.06g;Control组皮下移植瘤体积为298.66±49.29mm3,重量为0.28±0.06g;RACK1-sh RNA组较Vector-sh RNA组和Control组差异有统计学意义(F=6.56,P0.05)。(3)Western blot结果显示,RACK1-sh RNA组、Vector-sh RNA组和Control组中RACK1相对表达量分别为(0.21±0.11),(0.76±0.08)及(0.83±0.05)。与Vector-sh RNA组和Control组相比,RACK1-sh RNA组RACK1蛋白的表达量显著降低,差异有统计学意义(F=97.53,P0.05),Vector-sh RNA组和Control组比较差异无统计学意义(P0.05)。(4)在给予顺铂腹腔灌注化疗后发现,RACK1-sh RNA组皮下移植瘤体积为144.56±25.94mm3,重量为0.08±0.05g;Vector-sh RNA组皮下移植瘤体积为220.58±38.39mm3,重量为0.20±0.09g;Control组皮下移植瘤体积为264.34±44.87mm3,重量为0.25±0.04g;较Vector-sh RNA组和Control组中注射顺铂的裸鼠相比,于14天、21天、28天RACK1-sh RNA组肿瘤生长速度相对缓慢,于28天处死裸鼠,皮下移植瘤重量相对较小,差异有统计学意义(F14天=6.03,F21天=10.25,F28天=15.90,F瘤重=12.27,P0.05)。(5)在给予紫杉醇腹腔灌注化疗后发现,RACK1-sh RNA组皮下移植瘤体积为150.54±24.82mm3,重量为0.09±0.03g;Vector-sh RNA组皮下移植瘤体积为238.42±46.17mm3,重量为0.24±0.07g;Control组皮下移植瘤体积为239.63±22.58mm3,重量为0.27±0.05g;较Vector-sh RNA组和Control组中注射紫杉醇的裸鼠相比,于14天、21天、28天RACK1-sh RNA组肿瘤生长速度相对缓慢,于28天处死裸鼠,皮下移植瘤重量相对较小,差异有统计学意义(F14天=14.43,F21天=16.04,F28天=14.42,F瘤重=18.05,P0.05)。结论:(1)靶向沉默RACK1基因对裸鼠肺腺癌皮下移植瘤生长有明显抑制作用。(2)靶向沉默RACK1基因可以促进人肺腺癌A549细胞裸鼠皮下移植瘤对铂类和紫杉醇类两种化疗药物的敏感性,RACK1蛋白可能成为肺腺癌治疗的新靶点。
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【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R734.2

【参考文献】