马氏珠母贝维生素D受体介导维生素D3对PCaβ基因表达的调控

发布时间：2018-12-15 17:35

【摘要】：维生素D受体(VDR)是一种核激素受体,在介导维生素D调节机体钙-磷代谢、参与骨形成和矿化以及骨代谢等方面发挥重要作用。本实验克隆获得马氏珠母贝维生素D受体(Pm-VDR)编码区,检测其在不同组织中的表达模式,并分析维生素D3(VD3)刺激后Pm-VDR和马氏珠母贝L-型电压依赖性钙通道(PCaβ)基因的表达,探究Pm-VDR在马氏珠母贝生物矿化过程中的作用。结果显示:Pm-VDR开放式阅读框(ORF)为1407bp,编码468个氨基酸;相对分子量为53871.17kD,等电点为6.19;脂溶性系数为68.14,总平均亲水性为-0.70,属于亲水性蛋白。Pm-VDR具有由两个锌指结构组成的DNA结合域和一个激素受体的配体结合域。多序列比对结果显示Pm-VDR在物种之间具有较高的保守性,与长牡蛎同源性最高。qRT-PCR分析发现Pm-VDR在马氏珠母贝肝胰腺和鳃中表达量显著高于其他组织,其中肝胰腺的表达量最高。在0.2%、2%、20%浓度的VD3刺激12h后,Pm-VDR和PCaβ基因在鳃中表达量均显著上调(p0.05),上调的最低浓度分别为2%和0.2%。综上所述,Pm-VDR可能通过介导VD3调控PCaβ基因的表达参与马氏珠母贝鳃组织对Ca2+的吸收过程,从而调控贝体的生物矿化。
[Abstract]:Vitamin D receptor (VDR) is a nuclear hormone receptor, which plays an important role in mediating vitamin D to regulate the metabolism of calcium and phosphorus, taking part in bone formation, mineralization and bone metabolism. In this study, the coding region of vitamin D receptor (Pm-VDR) of Pinctada martensii was obtained and its expression patterns in different tissues were detected. The expression of Pm-VDR and L- type voltage-dependent calcium channel (PCa 尾) gene induced by vitamin D _ 3 (VD3) was analyzed to explore the role of Pm-VDR in the biological mineralization process of mother shellfish. The results showed that the Pm-VDR open reading frame (ORF) was 1407bp, encoding 468 amino acids, the relative molecular weight was 53871.17kD, the isoelectric point was 6.19; The liposolubility coefficient was 68.14, and the total average hydrophilicity was -0.70, which belongs to hydrophilic protein. Pm-VDR has a DNA binding domain composed of two zinc finger structures and a ligand binding domain of a hormone receptor. The results of multiple sequence alignment showed that Pm-VDR was highly conserved among species and had the highest homology with oyster. QRT-PCR analysis showed that the expression of Pm-VDR in hepatopancreas and gills of Pinctada martensii was significantly higher than that in other tissues. The expression of hepatopancreas was the highest. After being stimulated with 20% VD3 for 12 h, the expression of Pm-VDR and PCa 尾 genes in Gill was significantly up-regulated (p0.05), and the lowest concentrations were 2% and 0.2%, respectively. In conclusion, Pm-VDR may mediate VD3 regulation of PCa 尾 gene expression and participate in the process of Ca2 absorption in the Gill tissue of Pinctada martensii, thus regulating the biological mineralization of shellfish.
【作者单位】：广东海洋大学水产学院;广东省珍珠养殖与加工工程技术研究中心;
【基金】：广东省普通高校重大科研项目培育计划“珍珠贝良种培育与新型育种模式”(2014GKXM049) 广东省海洋渔业与产业发展专项“马氏珠母贝优质抗逆选系苗种规模化繁育与示范养殖”(Z2014009)和“马氏珠母贝海选1号苗种规模化繁育与示范养殖”(B201601-Z10)共同资助
【分类号】：Q78;S917.4

【参考文献】

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