B细胞易位基因1在脑胶质瘤组织中表达及意义

发布时间：2018-12-26 14:28

【摘要】：脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤,据国内流行病学统计,其发病率在35.26%-60.96%(平均44.69%)。其发生于神经外胚层,由于其发病机制不清楚,临床表现多样性,通常被认为是一种致命的人类恶性肿瘤,其呈浸润性生长,治疗效果差,复发率高,预后差。WHO(2007)将脑胶质瘤划分为Ⅰ~Ⅳ级:1.低级别胶质瘤(WHOⅠ级和Ⅱ级)常见于儿童和年轻人,2.高级别胶质瘤(WHOⅢ级和Ⅳ级)常见于中老年人。胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)最具破坏性,尽管现阶段的肿瘤检测以及放化疗等治疗手段都有了很大的进步,GBM患者的中位生存期仍然很短,约14个月。这就促使我们不得去寻找更多更有效的治疗办法。近年来分子生物学的快速发展推动了脑胶质瘤治疗的进步,使得分子靶向治疗越来越成为脑胶质瘤治疗研究的热门领域,可以预言随着越来越多的靶向药物被发现,脑胶质瘤的治愈率和中位生存率将可能获得提高。因此,分析脑胶质瘤的生物学特性,从基因水平探索脑胶质瘤相关发病机制成为研究的焦点。B细胞易位基因(B-cell translocation gene,BTG)属人类BTG/TOB的家族,该家族至少包括6种不同成员,即BTG1、BTG2/PC3/Tis21、BTG3/Ana、BTG4/PC3B、TOB1和TOB2,参与细胞增殖及生长周期的调控,并介导多种细胞分化。研究表明BTG1基因对细胞增殖起负调控作用,其表达随着细胞周期的变化而变化,在细胞周期的G0/G1期BTG1表达最高,随后下降。BTG1在癌组织中表达下降,如卵巢癌、食管癌、胃癌、肝细胞癌、甲状腺癌、乳腺癌及肺癌等,且其过表达抑制多种癌细胞的增殖、转移、浸润和凋亡,如卵巢癌等。以上研究证实BTG1是一种新的抑癌基因。虽然这些研究提示BTG1具备肿瘤抑制基因的特征,BTG1基因是否是脑胶质瘤相关抑制基因?在胶质瘤中的表达状况如何?目前国内外尚未见文献报道。人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome 10,PTEN)是位于人类10号染色体的一个抑癌基因,在肿瘤的发生发展中起着至关重要的抑制作用,它在多种肿瘤如子宫内膜癌,前列腺癌,肾细胞癌,结肠癌及肺癌等中存在杂合缺失或突变。有研究证明PTEN具有抑制脑胶质瘤生长的作用并有少数研究试图通过它寻找新的治疗靶点。本研究采用免疫组化EnVision法和Western blot方法检测并分析BTG1和PTEN蛋白在脑胶质瘤中的表达情况及其与临床病理参数的关系,以期为脑胶质瘤的临床治疗找到新的基因靶点。材料和方法1.收集郑州大学第一附属医院2013年12月至2016年4月行肿瘤全切的80例胶质瘤组织标本,并选取25例颅脑减压所得正常脑组织作对照。2.应用免疫组织化学(EnVision法)染色方法分别检测各级别胶质瘤组织和正常脑组织中BTG1和PTEN蛋白的表达情况。3.随机选取4例新鲜的脑胶质瘤组织及正常脑组织,应用Western blot检测其中BTG1和PTEN蛋白的表达情况。4.应用SPSS17.0版软件进行统计学处理。多组之间数据比较采用Kruskal Wallis Test分析;相关分析采用Spearman秩相关检验和Logistic回归分析。所有的实验数据均至少重复3次,以P0.05为差异有统计学意义。结果免疫组化结果:1.BTG1阳性表达主要定位于细胞浆,呈浅黄色、黄褐色或棕黄色染色。BTG1在正常脑组织中的阳性表达率较高,表达率为96.0%(24/25),表达强度为较强,而在脑胶质瘤的阳性表达率降低,表达率为73.8%(59/80),表达强度减弱。二者相比差异有统计学意义(P0.05)。2.PTEN阳性表达主要定位于细胞浆,呈浅黄色、黄褐色或棕黄色染色。PTEN在正常组织中的阳性表达率较高,表达率为100%(25/25),表达强度为较强,而在胶质瘤的阳性表达率降低,表达率为77.5%(62/80),表达强度减弱。二者相比差异有统计学意义(P0.05)。3.BTG1和PTEN蛋白的表达与胶质瘤临床病理参数的关系BTG1和PTEN蛋白的表达与脑胶质瘤组织学WHO分级的关系的分析结果显示脑胶质瘤组织中二者的表达与肿瘤组织学WHO分级呈负相关(P0.05),随着脑胶质瘤的级别增高,蛋白表达率降低且表达强度下降。各级胶质瘤及正常脑组织之间BTG1和PTEN表达分别两两比较(Kruskal Wallis Test分析)显示,Ⅰ级胶质瘤与正常脑组织相比无显著差异(P0.05),Ⅲ级和Ⅳ级相比无显著差异(P0.05);其余各组之间相比均有显著差异(P0.05)。BTG1和PTEN之间的相关分析(Spearman秩相关检验)显示二者表达呈正相关关系;Logistic回归分析显示BTG1和PTEN蛋白在20岁以上患者比20岁以下患者的表达率及表达强度下降(P0.05);但二者的表达与肿瘤直径及患者性别无关(P0.05)。Western blot结果:脑胶质瘤和正常脑组织中BTG1和PTEN蛋白的表达分析结果显示,胶质瘤组织中BTG1和PTEN蛋白的表达低于正常脑组织,与免疫组织化学的结果一致。结论1脑胶质瘤组织比正常组织BTG1和PTEN蛋白的表达阳性率明显降低,提示其表达水平与肿瘤组织学分级呈负相关,提示BTG1在脑胶质瘤的发生和发展中可能起着重要的生物学作用。2 BTG1和PTEN蛋白表达的检查有助于胶质瘤诊断的分级,二者有可能成为新的基因治疗靶点。
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【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.41

【参考文献】