基因沉默PRDX1表达对人结直肠癌SW480细胞侵袭迁移的影响

发布时间：2019-02-22 12:31

【摘要】：目的:探讨RNA干扰过氧化还原酶1(Peroxiredoxin 1,PRDX1)表达对人结直肠癌SW480细胞侵袭转移能力的影响。方法:筛选RNA干扰PRDX1的慢病毒质粒,与阴性对照慢病毒质粒分组转染结直肠癌SW480细胞,转染后的SW480细胞可分为PRDX1基因沉默组(si-PRDX1)和阴性对照组(Vector)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)分别检测两组细胞中PRDX1 mRNA和蛋白表达;采用Transwell侵袭和迁移实验检测基因沉默PRDX1表达对结直肠癌细胞侵袭及迁移能力的影响;通过Western blot检测两组细胞中基质金属蛋白酶(MMP)家族部分蛋白表达水平。结果:基因沉默PRDX1表达可有效抑制结直肠癌SW480细胞中PRDX1 mRNA和蛋白水平的表达,与阴性对照组相比(Vector),差异均具有统计学意义(P0.01),说明基因沉默PRDX1的SW480细胞系构建成功;Transwell侵袭和迁移实验显示si-PRDX1组细胞的侵袭及迁移能力较对照组均明显降低(P0.01);Western blot结果显示,与Vector组相比,si-PRDX1组细胞中组织基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达明显增加,而MMP-2及MMP-9的表达显著下降,且差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:基因沉默人结直肠癌SW480细胞的PRDX1表达可有效抑制细胞的侵袭、迁移及转移能力,其机制可能会通过调控TIMP-2、MMP-2及MMP-9的表达介导。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of RNA interfering peroxidase 1 (Peroxiredoxin 1) expression on the invasion and metastasis of human colorectal cancer SW480 cells. Methods: the lentivirus plasmids interfering with PRDX1 by RNA were screened and transfected into SW480 cells of colorectal cancer. The transfected SW480 cells were divided into PRDX1 gene silencing group (si-PRDX1) and negative control group (Vector). The transfected SW480 cells were divided into two groups: PRDX1 gene silencing group (si-PRDX1) and negative control group (Vector). Real-time fluorescent quantitative PCR (qRT-PCR) and Western blot (Western blot) were used to detect the expression of PRDX1 mRNA and protein, and Transwell invasion and migration assay were used to detect the effect of gene silencing PRDX1 expression on the invasion and migration of colorectal cancer cells. The expression level of matrix metalloproteinase (MMP) family was detected by Western blot. Results: gene silencing of PRDX1 could effectively inhibit the expression of PRDX1 mRNA and protein in SW480 cells of colorectal cancer. Compared with the negative control group, the expression of (Vector), was significantly different between the two groups (P0.01). The results showed that the SW480 cell line with gene silencing PRDX1 was successfully constructed. Transwell invasion and migration assay showed that the invasion and migration ability of si-PRDX1 group was significantly lower than that of control group (P0.01). The results of Western blot showed that the expression of tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP-2) in si-PRDX1 group was significantly higher than that in Vector group, while the expression of MMP-2 and MMP-9 was significantly decreased in si-PRDX1 group. The difference was statistically significant (P0.05). Conclusion: gene silencing the expression of PRDX1 in human colorectal cancer SW480 cells can effectively inhibit the invasion, migration and metastasis of human colorectal cancer cells, and its mechanism may be mediated by regulating the expression of TIMP-2,MMP-2 and MMP-9.
【作者单位】： 遵义医学院附属医院肿瘤医院腹部肿瘤科;遵义医学院免疫学教研室 贵州省免疫学研究生教育创新基地;安徽省肿瘤医院放疗科;
【基金】：国家自然科学基金项目(81560407) 贵州省科技厅社会发展攻关项目(黔科合SY字[2015]3046号);贵州省科技厅联合基金项目(黔科合LH字[2015]7505号) 贵州省科学技术基金项目(黔科合J字[2013]2312号)资助
【分类号】：R735.34

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本文编号：2428233