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瓜叶菊‘大花’Mlo基因RNAi载体的构建及其遗传转化研究

发布时间:2019-03-24 16:06
【摘要】:为进一步研究瓜叶菊Mlo基因的功能以及为将来获得具有广谱与持久的白粉菌抗性瓜叶菊种质资源奠定基础,以瓜叶菊(Pericallis hybrida B.Nord)‘大花’为试验材料,克隆瓜叶菊‘大花’Mlo基因保守片段,构建了瓜叶菊‘大花’RNAi载体;同时构建了瓜叶菊‘大花’高频再生体系;并利用根癌农杆菌介导法转化瓜叶菊‘大花’进而建立了遗传转化体系。经酶切鉴定,成功构建了Mlo基因的RNAi载体质粒pTCK303-mlo-RNAi,构建了瓜叶菊‘大花’高频再生体系,最终确定瓜叶菊‘大花’最佳愈伤诱导培养基为:MS+6-BA 2.4mg/L+NAA 1.0mg/L+KT 0.3mg/L+2,4-D 1.0mg/L;瓜叶菊‘大花’愈伤组织的分化培养最适培养基为:MS+6-BA 2.0mg/L+NAA0.1mg/L;瓜叶菊‘大花’生根培养的最佳培养基为1/2MS+NAA 0.5mg·L-1,并且初步探索了瓜叶菊‘大花’Mlo基因转化体系。
[Abstract]:In order to further study the function of the Mlo gene and to lay a foundation for the future to obtain a broad-spectrum and long-lasting powdery mildew-resistant melon-leaf chrysanthemum germplasm resource, the method comprises the following steps of: A large-flower 'RNAi vector is constructed, and the high-frequency regeneration system of the large-flower's-flower' is constructed, and the genetic transformation system is further established by using the agrobacterium-mediated transformation of the root cancer. The best callus induction medium was MS + 6-BA 2.4 mg/ L + NAA 1.0 mg/ L + KT 0.3 mg/ L + 2,4-D 1.0 mg/ L, and the optimum medium for callus differentiation and culture was as follows: MS + 6-BA 2.4 mg/ L + NAA 1.0 mg/ L + KT 0.3 mg/ L + 2,4-D 1.0 mg/ L. MS + 6-BA 2.0 mg/ L + NAA0.1 mg/ L; the best culture medium for rooting culture of the large-flower 'flower' of the melon leaves is 1/ 2MS + NAA 0.5 mg 路 L-1, and the transformation system of the large-flower 'Mlo gene of the flower of the melon leaves is preliminarily explored.
【作者单位】: 东北农业大学园艺学院;
【基金】:黑龙江省自然科学基金项目(C201112)
【分类号】:S682.11

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本文编号:2446477

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