棉花转甲基酶基因GhBSMT1的克

发布时间：2019-03-25 09:17

【摘要】：采用RT-PCR结合RACE技术从陆地棉中棉所12中克隆得到全长为1280 bp的苯甲酸/水杨酸羧基甲基转移酶基因序列,命名为GhBSMT1。预测该转移酶分子量40.8 kD,等电点6.12,为不稳定的亲水蛋白。通过原核表达获得大小约41 k D的可溶性重组目标蛋白。利用实时荧光定量PCR技术检测了棉花中GhBSMT1在植物激素处理和棉铃虫取食后表达转录情况,发现GhBSMT1在棉花的根、茎和叶中均有表达。水杨酸甲酯(Me SA)处理能够引起GhBSMT1下调表达,而茉莉酸甲酯(Me JA)处理对靶标基因影响不显著。另外,棉铃虫取食棉株6 h或48 h后,GhBSMT1表达量显著降低。结果表明,GhBSMT1在棉花各组织均有分布并受外源Me SA调控,该基因的表达还被棉铃虫取食抑制。
[Abstract]:The total length of 1280bp benzoic acid/ Salicylic acid-base methyltransferase gene was obtained by using RT-PCR and RACE technique from the cotton in Gossypium hirsutum L. to name GBSMT1. The molecular weight of the transferase is predicted to be 40.8 kD and the isoelectric point is 6.12, which is an unstable hydrophilic protein. A soluble recombinant target protein of a size of about 41 k D was obtained by prokaryotic expression. The expression of GhBSMT1 in cotton was detected by real-time fluorescence quantitative PCR, and the expression of GhBSMT1 in the roots, stems and leaves of cotton was found. The treatment of methyl salicylate (Me SA) can cause the down-regulation of GhBSMT1, and the effect of methyl jasmonate (Me JA) on the target gene is not significant. In addition, the expression of GhBSMT1 decreased significantly after 6 h or 48 h of the cotton bollworm. The results showed that GhBSMT1 was distributed and regulated by the exogenous Me SA, and the expression of the gene was also inhibited by the cotton bollworm.
【作者单位】： 山东农业大学植物保护学院;中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金(31471778,31672038,31621064)
【分类号】：S562

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本文编号：2446841