耐辐射异常球菌dlp基因缺失突变株构建及其生物学功能研究

发布时间：2019-05-08 03:39

【摘要】：耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans,DR)因其具有对非生物胁迫超强的抵抗能力而备受关注。旨在了解该菌亲水蛋白Dlp在细胞耐受非生物胁迫中的作用,采用融合PCR和基因同源重组技术,获得了dlp基因缺失突变株Δdlp,对野生型DR及突变株Δdlp进行非生物胁迫。结果表明,dlp的缺失导致DR细胞对高盐和氧化胁迫敏感。体外检测氧化胁迫条件下Dlp蛋白对苹果酸脱氢酶(MDH)和乳酸脱氢酶(LDH)活性的保护,结果显示,Dlp蛋白的加入能缓解氧化胁迫条件下MDH、LDH酶活性的损失。由此表明,亲水蛋白Dlp增强了耐辐射异常球菌对非生物胁迫的抗性,并能以类似分子伴侣的形式保护胁迫条件下酶的活性。
[Abstract]:Radiation-resistant abnormal cocci (Deinococcus radiodurans,DR) has attracted much attention because of its strong resistance to abiotic stress. In order to understand the role of hydrophilic protein Dlp in cell tolerance to abiotic stress, a mutant 螖 dlp, with deletion of dlp gene was obtained by fusion PCR and homologous recombination technique. The mutant 螖 DR and mutant strain 螖 dlp were subjected to abiotic stress on wild type DR and mutant strain 螖 dlp. The results showed that the absence of dlp resulted in the sensitivity of DR cells to high salt and oxidative stress. The protective effects of Dlp protein on the activity of malate dehydrogenase (MDH) and lactate dehydrogenase (LDH) under oxidative stress were measured in vitro. The results showed that the addition of Dlp protein could alleviate the loss of MDH,LDH activity under oxidative stress. The results showed that the hydrophilic protein Dlp enhanced the resistance to abiotic stress and protected the enzyme activity under stress conditions in the form of molecular chaperones.
【作者单位】： 西南科技大学生命科学与工程学院;中国农业科学院生物技术研究所;四川大学生命科学学院;中国人民大学附属中学;
【基金】：国家重点基础研究发展计划(“973计划”)(2013CB733903)
【分类号】：Q93

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本文编号：2471588