STAG2基因在人膀胱癌细胞系5637侵袭迁移和凋亡过程中的作用

发布时间：2019-08-13 08:53

【摘要】：目的:研究Stromal antigen 2(STAG2)基因在膀胱癌中的表达,并探讨STAG2基因在膀胱癌细胞侵袭迁移及凋亡过程中的作用。方法:采用逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)和蛋白印迹法(Western Blotting)分析STAG2在膀胱癌细胞表达特点;利用慢病毒技术过表达STAG2基因转染膀胱癌细胞并使用嘌呤霉素筛选稳定转染细胞株;细胞划痕实验和Transwell实验观察STAG2过表达对膀胱癌细胞迁移和侵袭功能的影响;流式细胞仪检测STAG2基因过表达对膀胱癌细胞的凋亡影响,Western Blotting检测下游分子E-cadherin、Vimentin表达水平。结果:在膀胱癌细胞系5637中STAG2表达远低于正常膀胱上皮细胞;慢病毒过表达效率达到80%以上;STAG2过表达后膀胱癌细胞划痕愈合速度变慢;穿过Transwell小室的细胞数明显变少;膀胱癌细胞凋亡数明显增加,下游分子E-cadherin表达升高、Vimentin表达下降。结论:STAG2可能是一个新的肿瘤抑制基因,在膀胱癌细胞侵袭迁移和细胞凋亡中起着重要。
【图文】：

（正文见第3页）图1STAG2在5637与SV-HUC-1中的表达水平图25637细胞转染慢病毒明场及荧光丰度图35637细胞转染效率验证图4划痕实验检测STAG2表达变化对膀胱癌体外迁移能力的影响图5Transwell实验检测STAG2表达变化对膀胱癌体外侵袭能力的影响图6STAG2表达变化对膀胱癌细胞凋亡的影响说明：A.正常对照细胞（NC）；B.STAG2过表达5637细胞图7E-cadherin、Vimentin表达水平0h24hCNTAG2SA56375637-NC5637-STAG2NC5637-STAG2B5637SV-HUC-1STAG2Tubulin14100055000STAG2NC光荧肠明5637NCSTAG21100005500037000E-cadherinVimentinGAPDHBAnnexinV-FITCAAnnexinV-FITCCNC5637-STAG2NC5637-STAG23020100tpopAoslsate(%)rdNC5637-STAG2elativeRTSG2Asxpresion100806040200b1.51.00.50.0elativeRTSG2AsxpresionSV-HUC-15637SV-HUC-15637aABAOD)(NC5637-STAG2NC5637-STAG21.51.00.50.0

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【作者单位】： 安徽医科大学深圳第二临床学院;深圳市第二人民医院;
【基金】：国家自然科学基金项目资助课题(81270740) 深圳市知识创新计划基础研究项目资助课题(JCYJ20140416180323426)
【分类号】：R737.14

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