siRNA沉默Galectin-3基因对血管内皮EA.hy926细胞增殖和迁移影响

发布时间：2019-09-05 13:36

【摘要】：目的半乳糖凝集素-3(Galectin-3)在肿瘤血管形成中起重要作用,关于其在血管内皮细胞生物学行为中的研究较少。本研究探讨siRNA转染下调Galectin-3表达对血管内皮EA.hy926细胞增殖和迁移能力的影响。方法将EA.hy926细胞分为干扰组、阴性对照组和空白对照组,干扰组转染Galectin-3特异性小干扰RNA(small interference RNA,siRNA),阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组只加转染空白试剂。蛋白质印迹法检测转染前后EA.hy926细胞内Galectin-3蛋白表达的变化,MTT比色法检测转染前后EA.hy926细胞增殖变化,Transwell小室法检测转染前后EA.hy926细胞迁移变化。结果干扰组EA.hy926细胞转染3条靶向siRNA后,Galectin-3蛋白表达量分别为0.07±0.02、0.25±0.01和0.26±0.04,其中序列1的干扰效果最佳。转染序列1的EA.hy926细胞中Galectin-3蛋白表达低于阴性对照组的0.77±0.05(t=9.52,P=0.011),也低于空白对照组的0.87±0.11(t=11.23,P=0.003),故选择转染序列1的细胞作为干扰组进行后续实验。干扰组EA.hy926细胞增殖能力在72h为0.38±0.02,低于阴性对照组的0.52±0.01(t=11.32,P=0.001)和空白对照组的0.54±0.01(t=11.73,P=0.001)。干扰组EA.hy926细胞迁移的细胞数目为32.67±9.02,低于阴性对照组的84.00±2.65(t=12.54,P=0.001)和空白对照组的85.33±4.73,t=12.66,P=0.001。结论靶向Galectin-3的特异siRNA能够下调Galectin-3在EA.hy926细胞中的蛋白表达水平,有效抑制EA.hy926细胞的增殖和迁移能力。
【作者单位】： 镇江市第四人民医院检验科;南京医科大学第二附属医院临床分子基因检测中心;
【分类号】：R730.2

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本文编号：2532251