HOXB7基因沉默对人胃癌细胞活力、迁移和侵袭的影响
发布时间：2019-11-24 14:24
【摘要】：目的:探讨靶向沉默HOXB7基因对人胃癌SGC-7901细胞活力、迁移和侵袭作用的影响及潜在机制。方法:设计靶向HOXB7的siRNA,然后瞬时转染胃癌SGC-7901细胞,实时荧光定量PCR和Western blot法检测siRNA靶向沉默的效果。MTT法检测细胞的活力,Western blot法检测细胞周期相关蛋白CDK4和cyclin D1蛋白的表达水平,Transwell小室侵袭实验检测SGC-7901细胞的侵袭能力,实时荧光定量PCR和Western blot法检测胃癌SGC-7901细胞PTEN和VEGF的表达水平以及p-AKT的蛋白水平。结果:胃癌组织中HOXB7基因在mRNA和蛋白水平的表达均显著高于对照组织。siRNA可有效靶向沉默SGC-7901细胞中HOXB7的表达,且沉默HOXB7表达后SGC-7901细胞活力明显下降,同时细胞周期相关蛋白CDK4和cyclin D1的表达亦下调。靶向沉默HOXB7可明显抑制SGC-7901细胞中AKT的磷酸化水平,抑制胃癌细胞的侵袭转移,同时下调VEGF的表达水平,抑制胃癌组织中的肿瘤血管生成。结论:HOXB7作为一个癌基因,可上调细胞周期相关蛋白CDK4、cyclin D1和侵袭相关分子VEGF的表达,上调AKT的磷酸化水平,进而抑制PTEN的功能,促进胃癌细胞SGC-7901的生长、迁移和侵袭能力。
【图文】：
3HOXB7基因靶向沉默对SGC-7901细胞活力的影响如图3所示，HOXB7基因沉默组24h、48h和72h后细胞活力明显低于未转染的空白对照组和转染siＲNAcontrol的阴性对照组，，说明HOXB7基因靶向沉默可以抑制SGC-7901细胞的存活率。4HOXB7基因靶向沉默对SGC-7901细胞中周期相关蛋白CDK4和cyclinD1表达的影响图4所示，HOXB7基因沉默组CDK4和cyclinD1的mＲNA水平均明显低于空白对照组和siＲNAcontrol阴性对照组。同时HOXB7基因沉默组CDK4和cyclinD1的蛋白表达强度均较其他2组明显降低，灰度计算结果差异有统计学显著性(P＜0.05)，表明HOXB7基因靶向沉默后SGC-7901细胞活力的下降可能与周期相关蛋白CDK4和cyclinD1表达下调有关，见图4。Figure3．TheeffectofHOXB7ontheviabilityoftheSGC-7901cells．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vssh-HOXB7group．图3SGC-7901细胞中的HOXB7对细胞存活率的影响Figure4．TheeffectofHOXB7ontheexpressionofcellcycle-relatedproteins．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vssh-HOXB7group．图4SGC-7901细胞中HOXB7对细胞周期相关蛋白的影响5HOXB7基因靶向沉默对SGC-7901细胞侵袭能力的影响通过Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力，与未转染空白对照组和转染siＲNAcontrol的阴性对照组比较，转染HOXB7siＲNA的基因沉默组中染色阳性的细胞数量即穿膜细胞数量减少，差异有统计学显著性(P＜0．05)，见图5。Figure5．TheeffectofHOXB7oncellinvasionability(×200)．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vssh-HOXB7group．图5SGC-7901细胞中HOXB7对细胞侵袭能力的影响·1827·
3HOXB7基因靶向沉默对SGC-7901细胞活力的影响如图3所示，HOXB7基因沉默组24h、48h和72h后细胞活力明显低于未转染的空白对照组和转染siＲNAcontrol的阴性对照组，说明HOXB7基因靶向沉默可以抑制SGC-7901细胞的存活率。4HOXB7基因靶向沉默对SGC-7901细胞中周期相关蛋白CDK4和cyclinD1表达的影响图4所示，HOXB7基因沉默组CDK4和cyclinD1的mＲNA水平均明显低于空白对照组和siＲNAcontrol阴性对照组。同时HOXB7基因沉默组CDK4和cyclinD1的蛋白表达强度均较其他2组明显降低，灰度计算结果差异有统计学显著性(P＜0.05)，表明HOXB7基因靶向沉默后SGC-7901细胞活力的下降可能与周期相关蛋白CDK4和cyclinD1表达下调有关，见图4。Figure3．TheeffectofHOXB7ontheviabilityoftheSGC-7901cells．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vssh-HOXB7group．图3SGC-7901细胞中的HOXB7对细胞存活率的影响Figure4．TheeffectofHOXB7ontheexpressionofcellcycle-relatedproteins．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vssh-HOXB7group．图4SGC-7901细胞中HOXB7对细胞周期相关蛋白的影响5HOXB7基因靶向沉默对SGC-7901细胞侵袭能力的影响通过Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力，与未转染空白对照组和转染siＲNAcontrol的阴性对照组比较，转染HOXB7siＲNA的基因沉默组中染色阳性的细胞数量即穿膜细胞数量减少，差异有统计学显著性(P＜0．05)，见图5。Figure5．TheeffectofHOXB7oncellinvasionability(×200)．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vssh-HOXB7group．图5SGC-7901细胞中HOXB7对细胞侵袭能力的影响·1827·
本文编号：2565478
【图文】：
3HOXB7基因靶向沉默对SGC-7901细胞活力的影响如图3所示，HOXB7基因沉默组24h、48h和72h后细胞活力明显低于未转染的空白对照组和转染siＲNAcontrol的阴性对照组，，说明HOXB7基因靶向沉默可以抑制SGC-7901细胞的存活率。4HOXB7基因靶向沉默对SGC-7901细胞中周期相关蛋白CDK4和cyclinD1表达的影响图4所示，HOXB7基因沉默组CDK4和cyclinD1的mＲNA水平均明显低于空白对照组和siＲNAcontrol阴性对照组。同时HOXB7基因沉默组CDK4和cyclinD1的蛋白表达强度均较其他2组明显降低，灰度计算结果差异有统计学显著性(P＜0.05)，表明HOXB7基因靶向沉默后SGC-7901细胞活力的下降可能与周期相关蛋白CDK4和cyclinD1表达下调有关，见图4。Figure3．TheeffectofHOXB7ontheviabilityoftheSGC-7901cells．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vssh-HOXB7group．图3SGC-7901细胞中的HOXB7对细胞存活率的影响Figure4．TheeffectofHOXB7ontheexpressionofcellcycle-relatedproteins．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vssh-HOXB7group．图4SGC-7901细胞中HOXB7对细胞周期相关蛋白的影响5HOXB7基因靶向沉默对SGC-7901细胞侵袭能力的影响通过Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力，与未转染空白对照组和转染siＲNAcontrol的阴性对照组比较，转染HOXB7siＲNA的基因沉默组中染色阳性的细胞数量即穿膜细胞数量减少，差异有统计学显著性(P＜0．05)，见图5。Figure5．TheeffectofHOXB7oncellinvasionability(×200)．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vssh-HOXB7group．图5SGC-7901细胞中HOXB7对细胞侵袭能力的影响·1827·
3HOXB7基因靶向沉默对SGC-7901细胞活力的影响如图3所示，HOXB7基因沉默组24h、48h和72h后细胞活力明显低于未转染的空白对照组和转染siＲNAcontrol的阴性对照组，说明HOXB7基因靶向沉默可以抑制SGC-7901细胞的存活率。4HOXB7基因靶向沉默对SGC-7901细胞中周期相关蛋白CDK4和cyclinD1表达的影响图4所示，HOXB7基因沉默组CDK4和cyclinD1的mＲNA水平均明显低于空白对照组和siＲNAcontrol阴性对照组。同时HOXB7基因沉默组CDK4和cyclinD1的蛋白表达强度均较其他2组明显降低，灰度计算结果差异有统计学显著性(P＜0.05)，表明HOXB7基因靶向沉默后SGC-7901细胞活力的下降可能与周期相关蛋白CDK4和cyclinD1表达下调有关，见图4。Figure3．TheeffectofHOXB7ontheviabilityoftheSGC-7901cells．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vssh-HOXB7group．图3SGC-7901细胞中的HOXB7对细胞存活率的影响Figure4．TheeffectofHOXB7ontheexpressionofcellcycle-relatedproteins．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vssh-HOXB7group．图4SGC-7901细胞中HOXB7对细胞周期相关蛋白的影响5HOXB7基因靶向沉默对SGC-7901细胞侵袭能力的影响通过Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力，与未转染空白对照组和转染siＲNAcontrol的阴性对照组比较，转染HOXB7siＲNA的基因沉默组中染色阳性的细胞数量即穿膜细胞数量减少，差异有统计学显著性(P＜0．05)，见图5。Figure5．TheeffectofHOXB7oncellinvasionability(×200)．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vssh-HOXB7group．图5SGC-7901细胞中HOXB7对细胞侵袭能力的影响·1827·
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