抗除草剂基因对紫花苜蓿遗传转化的研究

发布时间：2020-03-18 21:12

【摘要】：紫花苜蓿(Medicago sativa L.)作为世界上栽培历史最悠久、种植面积最大、利用价值最高的优质豆科牧草,其产业化日渐兴起。伴随着农业、畜牧业生产模式的转变,除草剂得到了大面积的推广和使用,紫花苜蓿苗期长,植株生长缓慢,造成杂草迅速蔓延,阻碍紫花苜蓿幼苗生长及发育,严重影响其产量和质量。随着转基因作物时代的到来,抗除草剂转基因作物也成为一种普遍的种植要求。自从1986年的首例紫花苜蓿转基因成功以来,紫花苜蓿遗传转化的研究已取得一定的进展。但现有的紫花苜蓿遗传转化体系转化效率很低,限制了优良外源基因对紫花苜蓿的转化,降低了转基因紫花苜蓿新品种的选育速度。本试验以紫花苜蓿组培苗叶片为外植体,应用农杆菌介导法,成功将CP4EPSPS基因转到受体中。在试验过程中,优化了影响遗传转化的因素,包括草铵膦筛选浓度(2mg/L)、共培养时间(3d)、农杆菌侵染浓度(OD_(600)=0.8)、农杆菌种类(LBA105)、草甘膦喷施浓度(1%)等。试验获得73株抗性植株,PCR检测验证得到24转基因植株,经试纸条检测和喷施草甘膦最终确定6株为阳性植株。
【图文】：

图 2. 不同浓度草铵膦溶液对愈伤组织的影响Fig.2 Effects of Different Concentrations of Glufosinate on Callus表 3-2 草铵膦抗性浓度筛选结果(30d)Table 3-2 Effect of Different Concentrations of Glufosinate on Callus Induction草铵膦浓度(mg/L)外植体数（个）愈伤组织数 a(个)愈伤组织数 b(个)愈伤组织数 c(个)愈伤诱导率(％)01.01.52.02.5606060606020201430201813401919112098.3395.0063.3315.000.00

图 3.喷施 1%浓度草甘膦溶液对紫花苜蓿的影响Fig.3 Effects of Spraying 1% Glyphosate Solution on Alfalfa表 3-3 不同浓度草甘膦溶液对紫花苜蓿影响结果Table 3-3 Effect of Different Concentrations of Glyphosate on Callus Inductio草甘膦浓度%植株成活数（个） 平均植株成活率10d 30d 10d 30dA 组 B 组 C 组 A 组 B 组 C 组 / /0 20 20 20 20 20 20 100 1000.5 19 19 18 14 16 16 93.33 76.670.7 11 8 9 8 7 7 46.67 36.671 5 3 4 2 3 3 20 13.332 0 0 0 0 0 0 0 0
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S541.9

【参考文献】

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本文编号：2589195