β-1，3-半乳糖基转移酶2基因敲除对小鼠学习记忆、海马内神经元及突触的影响

发布时间：2020-03-28 18:06

【摘要】：目的应用β-1,3-半乳糖基转移酶2(B3galt2)基因敲除小鼠研究该基因对学习记忆及海马内神经元、突触可塑性的影响,从而进一步阐明B3galt2在学习记忆和海马内神经元及突触可塑性调控中的重要作用,为进一步研究B3galt2及其它糖基转移酶在中枢神经系统中作用提供理论依据。方法应用β-1,3-半乳糖基转移酶2基因敲除小鼠繁育及基因型鉴定的方法,获得来自同一窝、相同性别的6个月野生型、杂合子和纯合子小鼠,采用水迷宫方法检测动物学习记忆功能,应用β-半乳糖苷酶染色方法验证B3galt2基因在海马内的表达方式,应用免疫组织化学染色法观察海马内神经元及突触的变化。结果1、通过繁育β-1,3-半乳糖基转移酶2基因敲除小鼠,成功获得来自同一窝及相同性别的6个月野生型、杂合子和纯合子小鼠。2、β-1,3-半乳糖基转移酶2基因敲除影响小鼠的学习和记忆功能。3、β-1,3-半乳糖基转移酶2在小鼠海马内表达。4、β-1,3-半乳糖基转移酶2基因敲除降低海马内神经元的数目及突触相关性蛋白SNAP25和树突标记性蛋白MAP2的表达水平。结论1、β-1,3-半乳糖基转移酶2基因在6个月小鼠海马中明显表达。2、β-1,3-半乳糖基转移酶2参与小鼠学习记忆功能及海马内神经元和突触的调控。
【图文】：

鉴定结果,相同性,小鼠,杂合子

实验结果一、基因型鉴定结果采用PCR方法、应用小鼠鼠尾组织中基因组DNA对小鼠的基因型进行鉴定，图 1 为 PCR 结果举例。该实验选用来自同一窝、相同性别的 6 个月的野生型、杂合子和纯合子小鼠完成除了β-半乳糖苷酶染色以外的实验，选用来自同一窝、相同性别的 6 个月的野生型和杂合子完成β-半乳糖苷酶染色实验。

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14图2 小鼠Morris水迷宫实验结果A:各小鼠连续5天测试训练期间游泳距离；B:各小鼠连续5天测试训练期间平均游泳速度；C: 各小鼠连续5天测试训练期间通过各个象限的次数；D:撤掉平台的探索训练中野生型、杂合子、纯合子小鼠游泳轨迹图。三、β-半乳糖苷酶染色结果为了验证B3galt2基因在6个月小鼠脑内的表达，，我们用6个月的B3galt2杂合子小鼠脑组织做了x-gal染色。同时，用6个月的野生型小鼠做相同颜色，作为阴性对照。实验结果表明，B3galt2杂合子小鼠脑中海马及皮层β-半乳糖苷酶染色阳性，在海马内DG、CA1区域中β-半乳糖苷酶表达明显（见图3）。该实验结果提示6个月小鼠海马内的DG、CA1区域表达B3galt2。
【学位授予单位】：锦州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：Q42

【参考文献】