转基因水稻G6H1和转基因玉米C00303.5基体标准物质研制

发布时间：2020-05-22 02:57

【摘要】：转基因产品成分检测是转基因生物安全管理和标识的重要内容,而转基因生物标准物质是获得准确,可靠,具有可比性检测结果的保证。本文重点针对基体标准物质制备开展研究,分别制备了转基因水稻G6H1和转基因玉米C00303.5系列基体标准物质,并对制备的标准物质的均匀性,稳定性进行分析,并采用微滴数字PCR技术和实验室联合定值方法测定了标准物质特征量值。本研究第一部分通过将转基因水稻G6H1和其受体材料秀水110候选物的纯度和纯合度筛选,然后分别冷冻研磨成粉末,按质量分数称量配制得到均匀的转基因水稻G6H1基体标准物质G6H1_a,G6H1_b,G6H1_c。采用实时荧光定量PCR技术分别测试了基体标准物质的瓶内和瓶间均匀性,分析结果表明三种标准物质的瓶内和瓶间均具有良好的均匀性。稳定性考察表明转基因水稻G6H1基体标准物质可在常温(26℃)条件下运输1个月,4℃或-20℃条件下稳定储存24个月。标准物质采用重量法配比的质量分数作为标准值,并评定其不确定度,分别赋值(49.825±0.343)g/kg,(9.967±0.985)g/kg,(4.986±1.259)g/kg。使用微滴数字PCR(ddPCR)对三种基体标准物质的特征量值和不确定度进行了分析,拷贝数比值的赋值为(5.01±0.07)%,(1.06±0.16)%,(0.53±0.10)%。G6H1基体标准物质分装每瓶1 g,使用时最小取样量为100 mg。以上数据显示转基因水稻G6H1基体标准物质可用于转基因水稻G6H1的定性和定量检测,以及转基因水稻G6H1特异性检测方法的评价和实验室质量控制等领域。本研究第二部分主要制备了转基因玉米C00303.5的基体标准物质,按照预期量值5.00%,1.00%和0.50%的比例配比混合制备了三种基体标准物质C00303.5_a(C35_(a)),C00303.5_b(C35_(b)),C00303.5_c(C35_(c))。制备的C00303.5基体标准物质具备良好的瓶内和瓶间均匀性,可在-20℃、4℃、24℃的运输条件下保持8周稳定,最小取样量为100 mg。以上结果表明转基因玉米C00303.5基体标准物质可进行下一步长期稳定性分析和特征量值测定。转基因生物标准物质的研制与应用是国内外农业转基因生物安全管理体系建设的迫切需求,同时也是转基因生物检测的重要技术支持。本研究中制备的基体标准物质将为我国转基因生物安全管理提供支撑。
【图文】：

图 1-1 1996-2016 年全球范围内转基因作物种植情况[3]igure 1-1 Global area of transgenic crops during 1996-2016因作物种植面积超过 100 万公顷的国家有 11 个，，占据全球 39%的份额；巴西以 4910 万公顷紧 年增长 11%，成为全球转基因作物种植面积增长种植面积同比 2015 年的 370 万公顷减少到 280 万 10 的国家还包括阿根廷，加拿大，印度，巴拉圭

图 1-1 1996-2016 年全球范围内转基因作物种植情况[3]Figure 1-1 Global area of transgenic crops during 1996-2016[3]2016 年转基因作物种植面积超过 100 万公顷的国家有 11 个，，美国以 7297万公顷高居榜首，占据全球 39%的份额；巴西以 4910 万公顷紧随其后，占比27%，相比 2015 年增长 11%，成为全球转基因作物种植面积增长最多的国家。我国转基因作物种植面积同比 2015 年的 370 万公顷减少到 280 万，位居第 8，种植面积排名前 10 的国家还包括阿根廷，加拿大，印度，巴拉圭，巴基斯坦，南非，乌拉圭。
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S513;S511

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本文编号：2675334