γ辐射对雌果蝇生理生化特性及辐射损伤修复基因Gadd45的影响

发布时间：2020-05-28 11:42

【摘要】：目的:本研究旨在探索不同剂量γ辐照对W1118、UAS-EGFP和Actin-Gal4三品系雌果蝇造成的生存、运动、生殖等影响,以及不同剂量γ辐射对雌果蝇产生的辐射损伤与氧化效应;从而为将雌果蝇开发成监测核事故泄漏剂量理想的辐射生物剂量计以及将耐辐射奇球菌抗辐射基因导入果蝇体内开展辐射防护研究提供一定的理论依据。方法:1、采用不同剂量137Cs-γ射线处理W1118、UAS-EGFP和Actin-Gal4三品系雌果蝇,测定其生存、运动和生殖蛹化能力指标,确定生存生殖剂量阈值。2、ELISA微板法检测细胞内活性氧含量、总超氧化物歧化酶活力和过氧化氢酶活力以及丙二醛含量和还原型谷胱甘肽含量,对果蝇成虫的辐射氧化损伤进行评价。3、辐照后提取果蝇基因组,经PCR扩增及电泳纯化后进行测序,Blast比对分析W1118、UAS-EGFP、Actin-Gal4三品系雌果蝇辐照前后Gadd45基因结构和表达的改变。结果:1、W1118、UAS-EGFP、Actin-Gal4三品系雌果蝇的半数致死剂量分别为1513Gy、1643Gy、1809Gy,95%致死剂量分别为1767Gy、2152Gy、2320Gy,完全死亡剂量分别为2200Gy、2200Gy、2600Gy,生殖阈值分别为240Gy、160Gy、200Gy。三品系3日龄雌果蝇成虫的生存率、攀爬高度分数、产卵量、蛹化高度与γ辐照剂量呈负相关。2、160Gy辐照组和1550Gy辐照组三品系雌果蝇体内SOD和CAT活力以及GSH含量均降低,ROS和MDA含量升高。3、1550Gy辐射处理组Gadd45基因核苷酸序列与未辐照的果蝇Gadd45基因核苷酸序列的相似性为99%,序列中的缺失率为1%。辐射组于第262、337位碱基由T变为A/N。辐射组核苷酸序列于第276、433位出现A、T核苷酸的非特异性缺失。结论:1、137Cs-γ辐射可能通过其诱发的高水平自由基氧化损伤从而降低或终止W1118、UAS-EGFP、Actin-Gal4三品系雌果蝇成虫的生存、运动和生殖蛹化能力。2、137Cs-γ辐照可致W1118、UAS-EGFP、Actin-Gal4三品系雌果蝇DNA损伤修复基因Gadd45碱基非特异性缺失,进而造成Gadd45基因结构损伤。
【图文】：

图 2.2.1 果蝇攀爬运动装置图.3 γ辐射后生殖能力测定不同品系(W1118，UAS-EGFP，Actin-Gal4)三日龄雌果蝇每个辐照剂量设置，每个重复 10 只果蝇，经不同剂量(0Gy，40Gy，80Gy，，120Gy，160Gy，20Gy)137Cs-γ辐照处理后，与正常雄果蝇交配，产卵后倒出亲本果蝇，从第一开始连续记录 30 天内羽化的子代果蝇数。.4 γ辐射后蛹化高度测定

2果蝇高度测量示意图
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：Q691

【参考文献】

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1 霍桂桃;吕建军;屈哲;林志;张

本文编号：2685190