多粘类芽孢杆菌SC2的基因表达体系优化
发布时间：2020-12-04 04:03
多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）是一类功能良好的植物根际促生细菌（PGPR）,因其在农业上的生防作用越来越受到人们关注。本实验室筛选得到一株多粘类芽孢杆菌SC2,胞外多糖生产能力强,有很强的植物病原菌抗性,多粘类芽孢杆菌SC2的全基因组已完成测序,其分子生物学信息较丰富。SC2可产生多糖等胞外分泌物,不利于分子操作,而其自然突变株SC2-M1相对容易操作,可作为分子生物学遗传操作表达体系工具菌株。构建可在SC2-M1中稳定表达外源基因的载体,为研究SC2提供可行的分子生物学手段。本研究利用木糖异构酶和gfp基因在SC2-M1中超表达,验证构建载体在SC2-M1中的活性。pHY300PLK质粒上不含启动子和信号肽基因,常被用作启动子、信号肽等元件的表达载体,是常用的大肠杆菌（Escherichia coli）-枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）的穿梭质粒。通过在多粘类芽孢杆菌SC2-M1中转化质粒pGFP4412,确定pGFP4412上的gfp基因可在多粘类芽孢杆菌SC2-M1中稳定表达。从pGFP4412上扩增的gfp全基因表达框插入到质粒...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
多粘菌素的结构示意图
图 1-1 多粘菌素的结构示意图Fig. 1-1 Polymyxin structureusaricidins）是一种与多粘菌素相似的环状、D 四种分子量在 800-900Da 之间抗菌多肽（杀镰孢菌素对尖孢镰刀菌（Raza et al., 2009珠菌（Kajimura et al., 1997）、酿酒酵母菌等泛应用于防治植物病害，尤其是在防治黄瓜枯8），在农业的应用上前景广阔。杀镰孢菌素（五烷酸和 6 个氨基酸残基组成，在肽链上有 2、X3，图 1-2 为杀镰孢菌素结构图。编码杀，从已完成测序的多粘类芽孢杆菌 E681、SC成杀镰孢菌素的过程中起着重要的作用（Ch
多粘类芽孢杆菌 SC2 的基因表达体系优化不同，这些微生物的木糖代谢途径也不尽相同。如图 1-3 所示途径。这两种代谢途径分别为：（1）在酵母等真菌中普遍存氢酶途径（简称 XR-XDH 途径）；（2）在大肠杆菌和芽孢杆遍存在的另外一条途径—木糖异构酶（xylose isomerase, XI）R-XDH 途径是指在依赖 NADPH 的木糖还原酶（xylose reduc还原为木糖醇，随后在利用 NAD+的木糖醇脱氢酶（xylitol de被氧化为木酮糖，再经木酮糖激酶（xylulokinase, XK）的磷酸后进入非氧化磷酸戊糖途径（pentose phosphate pathway, PPP）-磷酸甘油醛的形式进入糖酵解途径（Glycolysis），在无氧条糖通过木糖异构酶（xylose isomerase, XI）一步转化为木酮糖磷酸戊糖途径，最终被转化为乙醇。
【参考文献】：
期刊论文
[1]多粘类芽孢杆菌研究进展[J]. 田宇曦,闵勇,杨自文,王开梅. 湖北农业科学. 2017(18)
[2]枯草芽孢杆菌表达系统及其启动子研究进展[J]. 余小霞,田健,刘晓青,伍宁丰. 生物技术通报. 2015(02)
[3]多粘类芽孢杆菌生物特性及其机理研究进展[J]. 王刘庆,王秋影,廖美德. 中国农学通报. 2013(11)
[4]多粘类芽孢杆菌的研究进展[J]. 苍桂璐,张付云,杨阳,王斌,何云海. 安徽农业科学. 2013(02)
[5]多粘类芽孢杆菌20185液态发酵产碱性果胶酶发酵条件的研究[J]. 蒋红菊,许威震,朱春林,孙东平. 中国酿造. 2011(10)
[6]多粘类芽孢杆菌CP7β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆、表达及应用[J]. 文凤云,廖富蘋,林健荣,钟杨生. 中国农业科学. 2010(22)
[7]GFP标记的多粘芽孢杆菌1114在番茄根际的定殖[J]. 彭祎,谭悠久,黄永春. 中国生物防治. 2010(03)
[8]土壤有益细菌在植物根际竞争定殖的影响因素[J]. 年洪娟,陈丽梅. 生态学杂志. 2010(06)
[9]多粘类芽孢杆菌在黄瓜叶面和土壤中定殖能力及其对土壤微生物的影响[J]. 赵新海,钟丽娟,张庆华,徐冲. 世界农药. 2009(05)
[10]绿色荧光蛋白——发现、表达和发展[J]. Mns Ehrenberg,罗文新,夏宁邵. 生物物理学报. 2008(06)
博士论文
[1]GhEF1A8启动子克隆与功能分析及抗草甘膦转基因棉花研究[D]. 孙豹.中国农业科学院 2014
[2]芽孢杆菌染色体编辑系统构建及三种抗真菌物质合成的遗传调控研究[D]. 汪洋.南京农业大学 2012
[3]生防多粘芽孢杆菌SQR-21的定殖与诱导植物系统抗性研究[D]. 张振华.南京农业大学 2011
[4]枯草杆菌基因一步敲除法的建立和MPH在芽孢杆菌中表达的研究[D]. 闫新.南京农业大学 2008
[5]枯草杆菌新型表达系统和遗传操作体系的建立及应用[D]. 张晓舟.南京农业大学 2006
硕士论文
[1]枯草芽孢杆菌Tpb55菌株对黑胫病的防治效果、根际定殖规律及微生态效应[D]. 韩腾.中国农业科学院 2016
[2]多粘类芽孢杆菌SC2的全基因组测序[D]. 王翠翠.山东农业大学 2011
[3]枯草芽孢杆菌B2发酵工艺初探及其田间定殖和促生防病效果研究[D]. 李美丽.甘肃农业大学 2008
本文编号：2896985
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
多粘菌素的结构示意图
图 1-1 多粘菌素的结构示意图Fig. 1-1 Polymyxin structureusaricidins）是一种与多粘菌素相似的环状、D 四种分子量在 800-900Da 之间抗菌多肽（杀镰孢菌素对尖孢镰刀菌（Raza et al., 2009珠菌（Kajimura et al., 1997）、酿酒酵母菌等泛应用于防治植物病害，尤其是在防治黄瓜枯8），在农业的应用上前景广阔。杀镰孢菌素（五烷酸和 6 个氨基酸残基组成，在肽链上有 2、X3，图 1-2 为杀镰孢菌素结构图。编码杀，从已完成测序的多粘类芽孢杆菌 E681、SC成杀镰孢菌素的过程中起着重要的作用（Ch
多粘类芽孢杆菌 SC2 的基因表达体系优化不同，这些微生物的木糖代谢途径也不尽相同。如图 1-3 所示途径。这两种代谢途径分别为：（1）在酵母等真菌中普遍存氢酶途径（简称 XR-XDH 途径）；（2）在大肠杆菌和芽孢杆遍存在的另外一条途径—木糖异构酶（xylose isomerase, XI）R-XDH 途径是指在依赖 NADPH 的木糖还原酶（xylose reduc还原为木糖醇，随后在利用 NAD+的木糖醇脱氢酶（xylitol de被氧化为木酮糖，再经木酮糖激酶（xylulokinase, XK）的磷酸后进入非氧化磷酸戊糖途径（pentose phosphate pathway, PPP）-磷酸甘油醛的形式进入糖酵解途径（Glycolysis），在无氧条糖通过木糖异构酶（xylose isomerase, XI）一步转化为木酮糖磷酸戊糖途径，最终被转化为乙醇。
【参考文献】：
期刊论文
[1]多粘类芽孢杆菌研究进展[J]. 田宇曦,闵勇,杨自文,王开梅. 湖北农业科学. 2017(18)
[2]枯草芽孢杆菌表达系统及其启动子研究进展[J]. 余小霞,田健,刘晓青,伍宁丰. 生物技术通报. 2015(02)
[3]多粘类芽孢杆菌生物特性及其机理研究进展[J]. 王刘庆,王秋影,廖美德. 中国农学通报. 2013(11)
[4]多粘类芽孢杆菌的研究进展[J]. 苍桂璐,张付云,杨阳,王斌,何云海. 安徽农业科学. 2013(02)
[5]多粘类芽孢杆菌20185液态发酵产碱性果胶酶发酵条件的研究[J]. 蒋红菊,许威震,朱春林,孙东平. 中国酿造. 2011(10)
[6]多粘类芽孢杆菌CP7β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆、表达及应用[J]. 文凤云,廖富蘋,林健荣,钟杨生. 中国农业科学. 2010(22)
[7]GFP标记的多粘芽孢杆菌1114在番茄根际的定殖[J]. 彭祎,谭悠久,黄永春. 中国生物防治. 2010(03)
[8]土壤有益细菌在植物根际竞争定殖的影响因素[J]. 年洪娟,陈丽梅. 生态学杂志. 2010(06)
[9]多粘类芽孢杆菌在黄瓜叶面和土壤中定殖能力及其对土壤微生物的影响[J]. 赵新海,钟丽娟,张庆华,徐冲. 世界农药. 2009(05)
[10]绿色荧光蛋白——发现、表达和发展[J]. Mns Ehrenberg,罗文新,夏宁邵. 生物物理学报. 2008(06)
博士论文
[1]GhEF1A8启动子克隆与功能分析及抗草甘膦转基因棉花研究[D]. 孙豹.中国农业科学院 2014
[2]芽孢杆菌染色体编辑系统构建及三种抗真菌物质合成的遗传调控研究[D]. 汪洋.南京农业大学 2012
[3]生防多粘芽孢杆菌SQR-21的定殖与诱导植物系统抗性研究[D]. 张振华.南京农业大学 2011
[4]枯草杆菌基因一步敲除法的建立和MPH在芽孢杆菌中表达的研究[D]. 闫新.南京农业大学 2008
[5]枯草杆菌新型表达系统和遗传操作体系的建立及应用[D]. 张晓舟.南京农业大学 2006
硕士论文
[1]枯草芽孢杆菌Tpb55菌株对黑胫病的防治效果、根际定殖规律及微生态效应[D]. 韩腾.中国农业科学院 2016
[2]多粘类芽孢杆菌SC2的全基因组测序[D]. 王翠翠.山东农业大学 2011
[3]枯草芽孢杆菌B2发酵工艺初探及其田间定殖和促生防病效果研究[D]. 李美丽.甘肃农业大学 2008
本文编号：2896985
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