HEATR1基因与胃癌细胞增殖的相关性研究

发布时间：2020-12-04 04:36

　　目的:运用一株胃癌细胞AGS,将其分为shCtrl（对照组）及shHEATR1（目标组）,运用细胞功能学实验检测HEATR-1（HEATR repeat containing-1）基因对于肿瘤细胞增殖的相关作用,当其在慢病毒感染并敲除目的基因后,观察正常两组之间的细胞增殖是否受到抑制。方法:根据在基因库中检索HEATR-1的mRNA核苷酸序列,设计、目的基因慢病毒载体构建。培养生长状态良好的目的细胞,依据相关要求设计好实验条件后进行病毒感染。依据预实验确定的感染时间点,在一定荧光条件下显微观察GFP表达水平,细胞汇合度达80%左右收集细胞进入下游实验。经聚合酶链式反应检测胃癌细胞株AGS目的基因表示水平,确定高表达后,在慢病毒感染目标组之后行Q-PCR检测HEATR-1的mRNA表达水平确认敲除效率。并对shCtrl（对照组）及shHEATR1（目标组）行MTT检测,评估HEATR-1敲除后对细胞增殖功能的影响,探讨HEATR-1阳性表达与胃癌组织增殖的关系。结果:对照及目的慢病毒感染目的细胞后72小时于显微镜下荧光观察,观察结果显示细胞感染效率达到80%以上细胞状态正常。荧光定量PC... 

【文章来源】：皖南医学院安徽省

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

HEATR1在两组胃癌细胞中mRNA敲除量从图1定量PCR结果可以看出，经shRNA慢病毒感染后实验AGS细胞中HEATR1基因在mRNA水平的表达量受到抑制（p<0.05），敲减效率达到89.5%;

图 1 HEATR1 在两组胃癌细胞中 mRNA 敲除量从图 1 定量 PCR 结果可以看出，经 shRNA 慢病毒感染后实验 AGS 细胞中 HEATR1基因在 mRNA 水平的表达量受到抑制（p<0.05），敲减效率达到 89.5%。


本文编号：2897021