慢病毒载体介导SCL基因转染DCP膀胱效果的评价

发布时间：2020-12-05 11:17

　　目的:通过膀胱灌注观察慢病毒转染膀胱的效果并确定能取得较好转染效果的病毒量;制备豚鼠糖尿病膀胱病变（Diabetic cystopathy,DCP）模型,经尿道膀胱灌注干细胞白血病基因（SCL基因）慢病毒,观察其转染效果并检测SCL的表达。为进一步探究DCP的临床治疗奠定基础。方法:1.豚鼠经尿道灌注及静脉注射不同量的携带绿色荧光的慢病毒,饲养7d后取膀胱、肝、肺、肾等组织冰冻切片,激光共聚焦显微镜下观察各组织绿色荧光的分布;确定能取得较好膀胱转染效果且膀胱外组织无明显绿色荧光分布的病毒量。2.通过单次腹腔注射链脲佐菌素构建豚鼠DCP膀胱模型,筛选15只分为两组（12/3只）用于进一步实验;实验组豚鼠经尿道灌注SCL慢病毒,分别于灌注结束后第2d、7d、14d、28d取膀胱组织,设空白对照组不予处理直接取膀胱组织;组织冰冻切片后在激光共聚焦显微镜下观察绿色荧光的分布,q RT-PCR法检测SCL基因的表达,并比较各组间是否存在差异。结果:1.滴度为4×108TU/ml的慢病毒,经尿道膀胱灌注30μl量时可见膀胱组织黏膜下有绿色荧光、40μl量时组织肌层有广泛绿色荧光分布、50μl量时组... 

【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语表
前言
材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 携带绿色荧光慢病毒转染豚鼠膀胱
        2.2.2 构建DCP豚鼠模型
        2.2.3 SCL慢病毒转染DCP膀胱
    2.3 统计学方法
结果
    3.1 携带绿色荧光慢病毒转染豚鼠膀胱
        3.1.1 膀胱组织绿色荧光分布
        3.1.2 膀胱外组织绿色荧光分布
    3.2 豚鼠DCP模型构建
    3.3 SCL慢病毒转染DCP膀胱
        3.3.1 激光共聚焦显微镜下观察慢病毒转染效果
        3.3.2 灌注后不同时间点膀胱组织中SCL基因的表达
讨论
    4.1 SCL基因的功能
    4.2 DCP的临床治疗手段及基因治疗研究前景
    4.3 慢病毒载体介导GFP转染豚鼠膀胱
    4.4 SCL慢病毒转染DCP膀胱
        4.4.1 豚鼠DCP膀胱模型制备
        4.4.2 SCL慢病毒转染DCP膀胱的效果
    4.5 局限性与展望
结论
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
个人简介
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表


【参考文献】：
期刊论文
[1]慢病毒介导RNA干扰沉默Fas基因在脐带间充质干细胞中的表达[J]. 王露,翟玮玮,杨向荣,王芳,李见,张强,李玉云.  南方医科大学学报. 2014(10)
[2]高糖环境对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞内向电流的影响[J]. 徐礼臻,王勤章,韩涛,丁国富,马克涛,王江平.  山东医药. 2011(34)
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[5]高糖环境对豚鼠膀胱ICCs细胞超微结构的影响[J]. 范勇洪,丁国富,王勤章,李云飞,蔡志强.  现代生物医学进展. 2009(23)
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[7]早期糖尿病膀胱尿动力学及cajal样细胞的变化和意义[J]. 李云飞,王勤章,丁国富.  临床泌尿外科杂志. 2009(09)
[8]豚鼠糖尿病膀胱模型的建立[J]. 李维仁,王勤章,丁国富,王乾,李应龙,王江平.  现代泌尿外科杂志. 2008(05)
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硕士论文
[1]豚鼠糖尿病膀胱ICC样细胞形态学变化的研究[D]. 李维仁.石河子大学 2008



本文编号：2899367