草莓CRISPR/Cas9基因组编辑技术体系建立和FaMAPK12基因功能分析
发布时间:2020-12-17 22:08
草莓不仅是重要的园艺作物,同时因其生长周期短、基因组小、可以稳定遗传转化等特点也日益成为果实发育和成熟机理研究的模式材料。CRISPR/Cas9基因组编辑技术是近年来兴起的生命科学研究领域的重要技术,具有精确、便捷、高效的特点,其在草莓中的应用将极大地推动草莓遗传改良和分子生物学研究。本实验室前期研究证明,蔗糖可以作为信号调控草莓果实发育和成熟。为此,本研究首先在草莓中建立了 CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术,在此基础上,还对调控草莓果实成熟的蔗糖信号转导机制进行了研究。首先以二倍体(Fragariaxvescaa)和八倍体(Fragaria x ananassa)草莓果实为材料,研究了使用CRISPR/Cas9在草莓果实瞬时转化体系中进行基因组编辑的可行性。本研究设计了双靶点基因组编辑载体,两个sgRNA分别靶向FvMYB10和FvCHS。瞬时转化草莓果实后并通过PCR-RE(PCRRestriction enzyme assay)检测和测序检测发现,两个靶点位置都发生了碱基突变。以上结果表明,可以使用CRISPR/Cas9在草莓果实瞬时转化系统中进行基因组编辑。实现果实瞬...
【文章来源】:中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:95 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
图1-1?RNA引导的Cas9核酸酶的示意
图1131??Fig.?1-1?Schematic?of?the?RNA-guided?Cas9?nuclease"?”.??
fAAAGUGGCACCGA?/??1??IIIIIIIG??3\UUUUUUCGUGGCU?Qasg??图1-1?RNA引导的Cas9核酸酶的示意图1131??Fig.?1-1?Schematic?of?the?RNA-guided?Cas9?nuclease"?”.??CRISPR?/?Cas9?基因组编辑工具来源于原核细菌?II?型?CRISPR?(clustered?regularly?interspaced??short?palindromic?repeats)/Cas适应性免疫系统ll4‘151。II型CRISPR系统包折Cas9核酸酶和两种非??编码?CRISPR?RNA(crRNA):前体?crRNA?(pre-crRNA)阵列和反式激活?crRNA?(tracrRNA)。??Pre-crRNA列阵包含多个被相同重复序夕丨J间隔开的Guide?RNA〇?tracrRNA的作用是协助将??1??
【参考文献】:
期刊论文
[1]Generation of thermosensitive male-sterile maize by targeted knockout of the ZmTMS5 gene[J]. Jun Li,Huawei Zhang,Xiaomin Si,Youhui Tian,Kunling Chen,Jinxing Liu,Huabang Chen,Caixia Gao. Journal of Genetics and Genomics. 2017(09)
[2]Current and future editing reagent delivery systems for plant genome editing[J]. Yidong Ran,Zhen Liang,Caixia Gao. Science China(Life Sciences). 2017(05)
[3]CRISPR/Cas9技术在植物基因功能研究和新种质创制中的应用与展望[J]. 严芳,周焕斌. 中国科学:生命科学. 2016(05)
[4]CRISPR/Cas9基因组定向编辑技术的发展与在作物遗传育种中的应用[J]. 景润春,卢洪. 中国农业科学. 2016(07)
[5]CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术及其在作物品种改良中的应用[J]. 平文丽,李雪君,林娟,丁燕芳,孙焕,孙计平. 中国农学通报. 2016(05)
[6]基因组编辑技术在植物基因功能鉴定及作物育种中的应用[J]. 周想春,邢永忠. 遗传. 2016(03)
[7]植物CRISPR/Cas9基因组编辑系统与突变分析[J]. 马兴亮,刘耀光. 遗传. 2016(02)
[8]CRISPR/Cas9基因组编辑技术在植物基因功能研究及植物改良中的应用[J]. 曾秀英,侯学文. 植物生理学报. 2015(09)
[9]植物基因组编辑及衍生技术最新研究进展[J]. 单奇伟,高彩霞. 遗传. 2015(10)
本文编号:2922786
【文章来源】:中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:95 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
图1-1?RNA引导的Cas9核酸酶的示意
图1131??Fig.?1-1?Schematic?of?the?RNA-guided?Cas9?nuclease"?”.??
fAAAGUGGCACCGA?/??1??IIIIIIIG??3\UUUUUUCGUGGCU?Qasg??图1-1?RNA引导的Cas9核酸酶的示意图1131??Fig.?1-1?Schematic?of?the?RNA-guided?Cas9?nuclease"?”.??CRISPR?/?Cas9?基因组编辑工具来源于原核细菌?II?型?CRISPR?(clustered?regularly?interspaced??short?palindromic?repeats)/Cas适应性免疫系统ll4‘151。II型CRISPR系统包折Cas9核酸酶和两种非??编码?CRISPR?RNA(crRNA):前体?crRNA?(pre-crRNA)阵列和反式激活?crRNA?(tracrRNA)。??Pre-crRNA列阵包含多个被相同重复序夕丨J间隔开的Guide?RNA〇?tracrRNA的作用是协助将??1??
【参考文献】:
期刊论文
[1]Generation of thermosensitive male-sterile maize by targeted knockout of the ZmTMS5 gene[J]. Jun Li,Huawei Zhang,Xiaomin Si,Youhui Tian,Kunling Chen,Jinxing Liu,Huabang Chen,Caixia Gao. Journal of Genetics and Genomics. 2017(09)
[2]Current and future editing reagent delivery systems for plant genome editing[J]. Yidong Ran,Zhen Liang,Caixia Gao. Science China(Life Sciences). 2017(05)
[3]CRISPR/Cas9技术在植物基因功能研究和新种质创制中的应用与展望[J]. 严芳,周焕斌. 中国科学:生命科学. 2016(05)
[4]CRISPR/Cas9基因组定向编辑技术的发展与在作物遗传育种中的应用[J]. 景润春,卢洪. 中国农业科学. 2016(07)
[5]CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术及其在作物品种改良中的应用[J]. 平文丽,李雪君,林娟,丁燕芳,孙焕,孙计平. 中国农学通报. 2016(05)
[6]基因组编辑技术在植物基因功能鉴定及作物育种中的应用[J]. 周想春,邢永忠. 遗传. 2016(03)
[7]植物CRISPR/Cas9基因组编辑系统与突变分析[J]. 马兴亮,刘耀光. 遗传. 2016(02)
[8]CRISPR/Cas9基因组编辑技术在植物基因功能研究及植物改良中的应用[J]. 曾秀英,侯学文. 植物生理学报. 2015(09)
[9]植物基因组编辑及衍生技术最新研究进展[J]. 单奇伟,高彩霞. 遗传. 2015(10)
本文编号:2922786
本文链接:https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/2922786.html
最近更新
教材专著