融安金柑开花关键基因FT/TFL1同源基因克隆及其功能初步研究

发布时间：2020-12-17 15:04

　　Flowering Locus T （FT）/Terminal Flower Like 1 （TFL1）基因家族是植物开花调控途径的重要整合因子和调控植物开花的关键所在,在花形成过程中起着关键的作用。目前已从苹果、葡萄、山核桃、柑橘、龙眼、杧果等多种果树中克隆获得了FT/TFL1同源基因,并对部分植物FT/TFL1同源基因的功能进行了研究。金柑的开花习性与其它柑橘类果树不同,其开花的分子机理研究较为鲜见。为初步探明FT/TFL1基因在金柑开花调控中的作用,本论文以融安金柑为试材,进行其同源基因克隆与生物信息学分析、表达特性及转基因等研究。主要研究结果如下：1.获得3个融安金柑FT/TFL1同源基因的CDS序列,命名为FcFT1 （531 bp）、 FcFT2 （516bp）、FcTFL1（519bp）。对其进行生物信息学分析可知：FcFT1编码177个氨基酸,蛋白质原子总数为2791,分析式为C888H1377N255O266S5;理论蛋白质分子量为20.0 kDa,等电点为6.74；FcFT2编码172个氨基酸,蛋白质原子总数为2653,分析式为C845H1328N230O240S1... 

【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩写及符号说明
1 前言
    1.1 研究背景
    1.2 植物开花调控相关基因研究进展
        1.2.1 FT基因研究进展
        1.2.2 TFL1基因研究进展
    1.3 研究目的与意义
    1.4 技术路线图
2 材料与方法
    2.1 植物材料
    2.2 试剂药品
    2.3 主要仪器
    2.4 实验方法
        2.4.1 样品RNA提取与逆转录
        2.4.2 基因全长克隆
        2.4.3 DNA的提取
        2.4.4 基因的生物信息学分析
        2.4.5 实时荧光定量表达分析
        2.4.6 基因超量表达载体构建
        2.4.7 农杆菌感受态的制备和转化农杆菌
        2.4.8 农杆菌介导转化拟南芥方法
        2.4.9 拟南芥转基因植株的筛选
        2.4.10 拟南芥转基因植株的检测方法与性状观察
3 结果与分析
    3.1 同源基因克隆
    3.2 生物信息学分析
        3.2.1 蛋白质理化信息分析
        3.2.2 氨基酸序列同源性比较与进化树分析
    3.3 FcFT1同源基因时空表达分析
        3.3.1 FcFT1基因的组织特异性分析
        3.3.2 FcFT1基因在不同花器官表达特性分析
        3.3.3 FcFT1在盛花期的日周期变化规律
    3.4 FcFT2同源基因时空表达分析
        3.4.1 FcFT2基因的组织特异性分析
        3.4.2 FcFT2基因在不同花器官表达特性分析
        3.4.3 FcFT2在盛花期的日周期变化规律
    3.5 FcTFL1同源基因时空表达分析
        3.5.1 FcTFL1基因的组织特异性分析
        3.5.2 FcTFL1基因在不同花器官表达特性分析
        3.5.3 FcTFL1在盛花期的日周期变化规律
    3.6 真核载体构建及遗传转化拟南芥
        3.6.1 载体构建
        3.6.2 农杆菌浸染拟南芥及T0代的筛选
        3.6.3 转基因拟南芥T1代的培养与检测
        3.6.4 转基因拟南芥T1代植株的特性观察
4 讨论
    4.1 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因的克隆及序列分析
        4.1.1 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1同源基因克隆
        4.1.2 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1序列分析和聚类分析
    4.2 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因的表达分析
        4.2.1 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因的组织特异性分析
        4.2.2 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因在不同花器官表达特性分析
        4.2.3 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因在盛花期的日周期变化规律
    4.3 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因对拟南芥遗传转化分析
5 结论与创新性
    5.1 结论
    5.2 创新性
致谢
参考文献
附录


【参考文献】：
期刊论文
[1]龙眼胚性愈伤组织中TFL1基因克隆及其表达分析[J]. 陈裕坤,林玉玲,赖钟雄.  园艺与种苗. 2015(08)
[2]高等植物成花素FT基因:基因与机制的研究进展[J]. 吕有军,王彩霞,杨卫军,张永山.  分子植物育种. 2015(06)
[3]TFL1基因在甜樱桃童期向成年阶段转变过程中的作用[J]. 李长龙,李洋,王晶,闫国华,张晓明,段续伟,张开春,李天忠.  园艺学报. 2015(06)
[4]FT/TFL类基因在山葡萄雌雄花中的表达分析[J]. 徐维华,郑秋玲,刘万好,沙玉芬,范书亭,唐美玲.  华北农学报. 2014(S1)
[5]桑树成花素基因FT表达载体的构建及转化拟南芥植株的早花现象[J]. 吴素丽,蒋涛,刘立群,郭龙,苏超,张敏娟,钱永华,焦锋.  蚕业科学. 2014(06)
[6]植物开花整合子基因FT的研究进展[J]. 李球红,费元,庞基良.  北方园艺. 2014(18)
[7]成花基因FT/TFL1基因家族及其对植物成花转变遗传改良的研究进展[J]. 杜丽,李勇鹏,姚瑶.  江苏农业科学. 2014(07)
[8]木本果树开花相关基因的研究进展[J]. 魏丹凤,曾黎辉.  亚热带农业研究. 2014(02)
[9]百子莲开花相关基因ApFT的克隆及表达分析[J]. 石玉波,张荻,申晓辉,王玲,卓丽环.  园艺学报. 2014(04)
[10]黄瓜CsFT基因的克隆及其功能分析[J]. 张娟,颜爽爽,赵文圣,张小兰.  园艺学报. 2013(11)

博士论文
[1]龙眼种质资源遗传多样性分析及低温对石硖龙眼影响研究[D]. 陈虎.广西大学 2012
[2]芒果SCoT分子标记与逆境和重要开花时间相关基因研究[D]. 罗聪.广西大学 2012
[3]大豆FT/TFL1基因克隆、表达模式及功能分析[D]. 胡瑞波.中国农业科学院 2009
[4]葡萄花发育相关基因的克隆与表达特性研究[D]. 宗成文.南京农业大学 2007

硕士论文
[1]早实枳FT类似基因的结构分析和功能验证[D]. 靖艳玲.华中农业大学 2013
[2]桑树FT基因的克隆及表达分析[D]. 李四军.西北农林科技大学 2013
[3]水稻TFL2基因功能初步研究[D]. 綦煌松.广西大学 2012
[4]蔷薇科植物TFL1和SOC1基因的克隆及表达分析[D]. 李晶晶.华中农业大学 2011
[5]农杆菌介导的TFL1基因转化菊花的研究[D]. 侯香玲.河南大学 2011
[6]洋葱LEAFY和FT同源基因的克隆与表达初析[D]. 黄钰.东北农业大学 2011
[7]蔷薇科几种植物FT同源基因克隆及序列分析[D]. 左阳.华中农业大学 2010
[8]早实枳TFL1/CEN同源基因的表达分析及功能特征[D]. 李红莲.华中农业大学 2010
[9]光周期诱导甘菊成花中ClFT基因表达特性的研究[D]. 王琳琳.北京林业大学 2010
[10]苹果MdFT基因克隆及功能的初步鉴定[D]. 李伟明.甘肃农业大学 2009



本文编号：2922244