二穗短柄草超长链脂肪醇合成基因BdFAR 2的克隆及功能验证
发布时间：2020-12-17 14:22
干旱灾害在我国频繁发生,每年因干旱带来的损失十分严重。小麦是我国重要的粮食作物,但是干旱、病虫危害等自然胁迫已经影响到其产量和品质。因此,提高作物抗旱能力成为育种工作的一个重要目标。近年来,随着对农作物等表皮蜡质成分和生物学功能的进一步研究,人们对小麦表皮蜡质的关注越来越多。超长链脂肪醇合成基因FAR（Fatty acyl-coenzyme A reductase）曾在拟南芥和小麦中被证实参与脂肪醇的合成过程。因此,本实验克隆了二穗短柄草表皮蜡质脂肪醇合成基因BdFAR 2,并通过酵母异源表达和二穗短柄草过表达,对其功能进行了分析验证,获得了以下的研究结果:1.蜡质的检测结果表明:二穗短柄草叶片表皮蜡质主要由初级醇、脂肪酸、醛和烷烃组成,其中,初级醇的含量最多,并以C26醇为主,脂肪酸、醛和烷烃的含量相对较低。叶片正反面表皮蜡质晶体均为片状结构。2.通过生物信息学技术分析目的基因与小麦蜡质合成基因蛋白序列,从二穗短柄草中克隆了1个超长链脂肪醇合成基因,命名为BdFAR 2,3.BdFAR 2基因在酵母中异源表达的结果表明,BdFAR 2基因具有合成C24...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
叶片表皮不同蜡质晶体结构（引自KochandEnsikat2008）
结果发现，拟南芥的蜡质合成主要有两种途径，即脱羰途径和酰基还原途径（图1-2）（Kolattukudy 1996）。图1-2 拟南芥茎蜡质合成途径（包括酰基还原途径及脱羰基途径）Fig.1-2 Pathways for wax biosynthesis in Arabidopsis stems (including acyl reduction pathway anddecarbonylation pathway)两种途径中，酰基还原途径因主要合成的产物为伯醇，又被称为初级醇途径，前人通过对小麦的酰基还原途径进行分析研究发现，小麦中，酰基还原途经主要合成的是C28伯醇（Baker 1982）。关于蜡质合成途径的研究一般认为初级醇的合成是通过两个分开的酶分别催化合成的，即 VLCFA 酰基辅酶 A 酯先形成初级醇，该过程通过酯酰还原
公司进行将其部分菌液进行测序，测序正确的单克冰箱备用。粒将正确的单克隆接种到含有一定比例的 Kan（50 m和 200 r·min-1条件下，进行 12~14 h 的培养后，按照取试剂盒中说明书的具体步骤进行提取质粒，并将体的构建以连接带有候选基因的克隆载体 pMD18-T 为模板与经过相同双酶切反应 pYES2 酵母表达载体上，方 2.2.2.2。pYES2-BdFAR 2 和空载体 pYES2 质粒 DNA 转入到charomyces cerevisiae）INVSc1 菌株中，通过营养缺目的基因的酵母菌株。
【参考文献】：
期刊论文
[1]冬闲田种植大麦不同生育期的营养价值和青贮品质[J]. 田静,谢昭良,刘家杏,许留兴,唐国建,张建国. 草业科学. 2017(04)
[2]小麦品系CP98(11)不同器官表皮蜡质组分和蜡质晶体结构的差异分析[J]. 罗文巧,吴洪启,赵帅,汪勇,赵璟琛,王中华. 西北植物学报. 2017(03)
[3]不同小麦品种(系)穗部表皮蜡质的成分及含量分析[J]. 杨昊虹,史雪,夏凌峰,汪勇,王中华,李春莲. 麦类作物学报. 2017(03)
[4]大麦叶片表皮蜡质组分和含量及其与抗旱性的关系[J]. 赵东宾,张海禄,王仙,齐军仓,惠宏杉,林立昊,王凤,郑许光. 新疆农业科学. 2017(01)
[5]大麦幼苗叶片表皮蜡质组分及含量对外源ABA的响应及其对表皮透性的影响[J]. 朱双艳,齐军仓,惠宏杉,廖乐,林立昊,华淼源. 西南农业学报. 2015(05)
[6]基于可变模糊评价法的农业旱灾灾后恢复力评估研究——以河北省为例[J]. 谷洪波,刘新意,刘芷妤. 干旱地区农业研究. 2014(05)
[7]二穗短柄草表皮蜡质组成分析及蜡质显微结构观察[J]. 李婷婷,张芸芸,孙瑜琳,王艳婷,王美玲,胡世玮,汪勇,史雪,权力,王中华. 麦类作物学报. 2014(07)
[8]小麦叶片表皮蜡质成分及含量分析[J]. 张芸芸,李婷婷,孙瑜琳,王艳婷,王美玲,汪勇,史雪,权力,李春莲,王中华. 麦类作物学报. 2014(07)
[9]纽荷尔脐橙果皮光泽型突变体贮藏性研究[J]. 曾琼,吴启,王玥辰,刘德春,刘山蓓,刘传福,刘勇. 江西农业大学学报. 2013(03)
[10]植物表皮蜡质合成和运输途径研究进展[J]. 吉庆勋,刘德春,刘勇. 中国农学通报. 2012(03)
硕士论文
[1]一粒小麦、节节麦叶片表皮蜡质组成及β-酮脂酰辅酶A合成酶KCS基因的克隆与功能分析[D]. 王艳婷.西北农林科技大学 2015
[2]小麦叶片和穗表皮蜡质组分分析及其相关合成基因的筛选[D]. 孙瑜琳.西北农林科技大学 2015
[3]干旱、盐、UV-B、ABA对小麦、水稻叶片角质层的影响[D]. 宫慧芳.山西师范大学 2012
本文编号：2922190
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
叶片表皮不同蜡质晶体结构（引自KochandEnsikat2008）
结果发现，拟南芥的蜡质合成主要有两种途径，即脱羰途径和酰基还原途径（图1-2）（Kolattukudy 1996）。图1-2 拟南芥茎蜡质合成途径（包括酰基还原途径及脱羰基途径）Fig.1-2 Pathways for wax biosynthesis in Arabidopsis stems (including acyl reduction pathway anddecarbonylation pathway)两种途径中，酰基还原途径因主要合成的产物为伯醇，又被称为初级醇途径，前人通过对小麦的酰基还原途径进行分析研究发现，小麦中，酰基还原途经主要合成的是C28伯醇（Baker 1982）。关于蜡质合成途径的研究一般认为初级醇的合成是通过两个分开的酶分别催化合成的，即 VLCFA 酰基辅酶 A 酯先形成初级醇，该过程通过酯酰还原
公司进行将其部分菌液进行测序，测序正确的单克冰箱备用。粒将正确的单克隆接种到含有一定比例的 Kan（50 m和 200 r·min-1条件下，进行 12~14 h 的培养后，按照取试剂盒中说明书的具体步骤进行提取质粒，并将体的构建以连接带有候选基因的克隆载体 pMD18-T 为模板与经过相同双酶切反应 pYES2 酵母表达载体上，方 2.2.2.2。pYES2-BdFAR 2 和空载体 pYES2 质粒 DNA 转入到charomyces cerevisiae）INVSc1 菌株中，通过营养缺目的基因的酵母菌株。
【参考文献】：
期刊论文
[1]冬闲田种植大麦不同生育期的营养价值和青贮品质[J]. 田静,谢昭良,刘家杏,许留兴,唐国建,张建国. 草业科学. 2017(04)
[2]小麦品系CP98(11)不同器官表皮蜡质组分和蜡质晶体结构的差异分析[J]. 罗文巧,吴洪启,赵帅,汪勇,赵璟琛,王中华. 西北植物学报. 2017(03)
[3]不同小麦品种(系)穗部表皮蜡质的成分及含量分析[J]. 杨昊虹,史雪,夏凌峰,汪勇,王中华,李春莲. 麦类作物学报. 2017(03)
[4]大麦叶片表皮蜡质组分和含量及其与抗旱性的关系[J]. 赵东宾,张海禄,王仙,齐军仓,惠宏杉,林立昊,王凤,郑许光. 新疆农业科学. 2017(01)
[5]大麦幼苗叶片表皮蜡质组分及含量对外源ABA的响应及其对表皮透性的影响[J]. 朱双艳,齐军仓,惠宏杉,廖乐,林立昊,华淼源. 西南农业学报. 2015(05)
[6]基于可变模糊评价法的农业旱灾灾后恢复力评估研究——以河北省为例[J]. 谷洪波,刘新意,刘芷妤. 干旱地区农业研究. 2014(05)
[7]二穗短柄草表皮蜡质组成分析及蜡质显微结构观察[J]. 李婷婷,张芸芸,孙瑜琳,王艳婷,王美玲,胡世玮,汪勇,史雪,权力,王中华. 麦类作物学报. 2014(07)
[8]小麦叶片表皮蜡质成分及含量分析[J]. 张芸芸,李婷婷,孙瑜琳,王艳婷,王美玲,汪勇,史雪,权力,李春莲,王中华. 麦类作物学报. 2014(07)
[9]纽荷尔脐橙果皮光泽型突变体贮藏性研究[J]. 曾琼,吴启,王玥辰,刘德春,刘山蓓,刘传福,刘勇. 江西农业大学学报. 2013(03)
[10]植物表皮蜡质合成和运输途径研究进展[J]. 吉庆勋,刘德春,刘勇. 中国农学通报. 2012(03)
硕士论文
[1]一粒小麦、节节麦叶片表皮蜡质组成及β-酮脂酰辅酶A合成酶KCS基因的克隆与功能分析[D]. 王艳婷.西北农林科技大学 2015
[2]小麦叶片和穗表皮蜡质组分分析及其相关合成基因的筛选[D]. 孙瑜琳.西北农林科技大学 2015
[3]干旱、盐、UV-B、ABA对小麦、水稻叶片角质层的影响[D]. 宫慧芳.山西师范大学 2012
本文编号：2922190
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/2922190.html
最近更新
教材专著
