二化螟取食诱导蛋白酶抑制剂基因OsLTPL164和OsLTPL151的表达模式及干扰载体构建
发布时间：2020-12-18 19:57
二化螟（Chilo suppressalis）作为水稻上危害最为严重的常发性害虫之一,对水稻产量造成巨大经济损失。作为防治二化螟最主要的武器,化学杀虫剂的大量使用已导致农药残留、环境污染、粮食安全和害虫抗药性等问题凸显。利用基因工程培育抗螟水稻品种是较安全、高效的方法,但水稻抗螟虫相关基因的功能研究相对匮乏。植物蛋白酶抑制剂（Potease Inhibitor,PI）是一类低分子量的多肽或蛋白质,参与植物对害虫和其它逆境胁迫的抗性。然而,编码水稻蛋白酶抑制剂的基因的分子鉴定和表达模式尚不清楚。因此,本试验以东北地区常规种植的水稻1688、1665和1654品系作为供试材料,克隆了两个水稻蛋白酶抑制剂基因OsLTPL164和OsLTPL151,并运用荧光定量PCR（RT-qPCR）分析了OsLTPL164和OsLTPL151在三个水稻品系中、二化螟取食及机械损伤下的表达模式;测定了二化螟取食及机械损伤下三个水稻品系不同组织的α-淀粉酶活性;通过RNAi技术和超表达技术构建了OsLTPL164和OsLTPL151的沉默载体和超表达载体。研究结果为明确OsLTPL164和OsLTPL151在...
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：83 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
二化螟的虫态（来自搜狗图片网络）
图 1-3 RNA 干扰机制图（付月灵，2010）Fig.1-3 The mechanism picture of RNA interference基因功能中的研究进展NA 干扰研究广泛应用于植物基因功能分析、植物抗病、抗良和植物发育及生理代谢途径的研究（刘爱玲基因功能需要构建可以转录成 dsRNA 的表达需要选择一段 RNA 干扰片段，此片段需根据序相反的正向片段和反向片段（任鹏飞等，20芥、烟草等运用较广泛，植物干扰表达载体常ia1301（刘燕霞等，2014；李林，2010；Allen e）构建基因 OsHsfA7 的 RNA 干扰载体对该基因1301M，以 CaMV35S 为启动子驱动表达，研因 OsbHLH120 的 RNAi 干扰载体，结果表明
图 2-1 OsLTPL164、OsLTPL151 的二级结构图 2-1The secondary structure of OsLTPL164 and OsLTPL151A.OsLTPL164 B.OsLTPL151图 2-2 OsLTPL164、OsLTPL151 的结构域Fig.2-2 The domain of OsLTPL164 and OsLTPL151A.OsLTPL164 B.OsLTPL1512.2.2 蛋白酶抑制剂基因 OsLTPL164 的组成型表达分析2.2.2.1 同一水稻品系不同组织中的表达水平
【参考文献】：
期刊论文
[1]水稻虫害二化螟发生及防治技术[J]. 李金生. 农业开发与装备. 2017(12)
[2]浙江省水稻二化螟绿色防控技术应用实践[J]. 郑许松,鲁艳辉,钟列权,黄贤夫,陈海波,姚晓明,吕仲贤. 中国植保导刊. 2017(11)
[3]水稻虫害二化螟防治技术[J]. 郭禄昌. 乡村科技. 2017(23)
[4]早稻二化螟的综合防治[J]. 黄守行,黄明刚,李伟兵,杨建国. 吉林农业. 2017(14)
[5]北方稻区水稻害虫的发生与防治研究[J]. 司学政. 乡村科技. 2017(18)
[6]干旱胁迫下木薯茎杆可溶性糖、淀粉及相关酶的代谢规律[J]. 赵超,王海燕,刘美珍,王文泉. 植物生理学报. 2017(05)
[7]利用RNA干扰技术沉默稻纵卷叶螟几丁质合成酶A基因[J]. 李娇,杜娟,李尚伟. 山地农业生物学报. 2016(03)
[8]水稻虫害二化螟发生及防治技术[J]. 于成山. 北京农业. 2016(03)
[9]水稻抗旱基因OsbHLH120 RNAi干扰载体的构建及遗传转化[J]. 刘磊,炎会敏,杜彦修,张静,孙红正,彭廷,赵全志. 分子植物育种. 2015(12)
[10]东北稻区抗螟性水稻品种筛选研究[J]. 王悦,杨雪清,马殿荣,王小奇. 中国植保导刊. 2015(12)
博士论文
[1]运用RNAi技术培育抗二化螟水稻[D]. 江山.华中农业大学 2016
[2]水稻抗虫相关基因OsWRKY53及OsHI-PSKR的功能解析[D]. 胡凌飞.浙江大学 2014
[3]褐飞虱体内small RNA的鉴定、利用RNAi技术培育抗褐飞虱水稻及OsATG7基因的功能研究[D]. 陈秋红.华中农业大学 2012
[4]水稻抗虫相关基因OsICS和OsHPL3的功能分析[D]. 王宝辉.浙江大学 2012
硕士论文
[1]抗二化螟水稻品种鉴定及抗虫基因初步挖掘与验证[D]. 王悦.沈阳农业大学 2016
[2]转Bt基因水稻对二化螟幼虫抗性及其成虫产卵选择行为的影响[D]. 柯剀切.华中农业大学 2015
[3]水稻抗虫相关基因OsJAMYB功能解析[D]. 鞠红平.浙江大学 2012
[4]转hrfl基因小麦赤霉病抗性分析与水稻RNA沉默通用载体构建[D]. 李林.南京农业大学 2010
[5]水稻转录因子BTB/TAZ抗病功能的RNAi分析[D]. 付月灵.中国农业科学院 2010
[6]寒地稻区二化螟发生规律、测报方法及防治策略的研究[D]. 吴丽岩.黑龙江八一农垦大学 2009
[7]OsCH2和OsHSP82基因过表达载体构建和水稻遗传转化[D]. 王加龙.湖南农业大学 2006
[8]水稻逆境相关基因的遗传转化和功能鉴定[D]. 黄越敏.华中农业大学 2006
[9]不同启动子驱动下马铃薯蛋白酶抑制剂PinⅡ转基因水稻的遗传、表达和抗虫性分析[D]. 武亮.南京农业大学 2006
[10]黑龙江省二化螟发生规律及其生物防治的研究[D]. 裴海英.东北农业大学 2003
本文编号：2924522
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：83 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
二化螟的虫态（来自搜狗图片网络）
图 1-3 RNA 干扰机制图（付月灵，2010）Fig.1-3 The mechanism picture of RNA interference基因功能中的研究进展NA 干扰研究广泛应用于植物基因功能分析、植物抗病、抗良和植物发育及生理代谢途径的研究（刘爱玲基因功能需要构建可以转录成 dsRNA 的表达需要选择一段 RNA 干扰片段，此片段需根据序相反的正向片段和反向片段（任鹏飞等，20芥、烟草等运用较广泛，植物干扰表达载体常ia1301（刘燕霞等，2014；李林，2010；Allen e）构建基因 OsHsfA7 的 RNA 干扰载体对该基因1301M，以 CaMV35S 为启动子驱动表达，研因 OsbHLH120 的 RNAi 干扰载体，结果表明
图 2-1 OsLTPL164、OsLTPL151 的二级结构图 2-1The secondary structure of OsLTPL164 and OsLTPL151A.OsLTPL164 B.OsLTPL151图 2-2 OsLTPL164、OsLTPL151 的结构域Fig.2-2 The domain of OsLTPL164 and OsLTPL151A.OsLTPL164 B.OsLTPL1512.2.2 蛋白酶抑制剂基因 OsLTPL164 的组成型表达分析2.2.2.1 同一水稻品系不同组织中的表达水平
【参考文献】：
期刊论文
[1]水稻虫害二化螟发生及防治技术[J]. 李金生. 农业开发与装备. 2017(12)
[2]浙江省水稻二化螟绿色防控技术应用实践[J]. 郑许松,鲁艳辉,钟列权,黄贤夫,陈海波,姚晓明,吕仲贤. 中国植保导刊. 2017(11)
[3]水稻虫害二化螟防治技术[J]. 郭禄昌. 乡村科技. 2017(23)
[4]早稻二化螟的综合防治[J]. 黄守行,黄明刚,李伟兵,杨建国. 吉林农业. 2017(14)
[5]北方稻区水稻害虫的发生与防治研究[J]. 司学政. 乡村科技. 2017(18)
[6]干旱胁迫下木薯茎杆可溶性糖、淀粉及相关酶的代谢规律[J]. 赵超,王海燕,刘美珍,王文泉. 植物生理学报. 2017(05)
[7]利用RNA干扰技术沉默稻纵卷叶螟几丁质合成酶A基因[J]. 李娇,杜娟,李尚伟. 山地农业生物学报. 2016(03)
[8]水稻虫害二化螟发生及防治技术[J]. 于成山. 北京农业. 2016(03)
[9]水稻抗旱基因OsbHLH120 RNAi干扰载体的构建及遗传转化[J]. 刘磊,炎会敏,杜彦修,张静,孙红正,彭廷,赵全志. 分子植物育种. 2015(12)
[10]东北稻区抗螟性水稻品种筛选研究[J]. 王悦,杨雪清,马殿荣,王小奇. 中国植保导刊. 2015(12)
博士论文
[1]运用RNAi技术培育抗二化螟水稻[D]. 江山.华中农业大学 2016
[2]水稻抗虫相关基因OsWRKY53及OsHI-PSKR的功能解析[D]. 胡凌飞.浙江大学 2014
[3]褐飞虱体内small RNA的鉴定、利用RNAi技术培育抗褐飞虱水稻及OsATG7基因的功能研究[D]. 陈秋红.华中农业大学 2012
[4]水稻抗虫相关基因OsICS和OsHPL3的功能分析[D]. 王宝辉.浙江大学 2012
硕士论文
[1]抗二化螟水稻品种鉴定及抗虫基因初步挖掘与验证[D]. 王悦.沈阳农业大学 2016
[2]转Bt基因水稻对二化螟幼虫抗性及其成虫产卵选择行为的影响[D]. 柯剀切.华中农业大学 2015
[3]水稻抗虫相关基因OsJAMYB功能解析[D]. 鞠红平.浙江大学 2012
[4]转hrfl基因小麦赤霉病抗性分析与水稻RNA沉默通用载体构建[D]. 李林.南京农业大学 2010
[5]水稻转录因子BTB/TAZ抗病功能的RNAi分析[D]. 付月灵.中国农业科学院 2010
[6]寒地稻区二化螟发生规律、测报方法及防治策略的研究[D]. 吴丽岩.黑龙江八一农垦大学 2009
[7]OsCH2和OsHSP82基因过表达载体构建和水稻遗传转化[D]. 王加龙.湖南农业大学 2006
[8]水稻逆境相关基因的遗传转化和功能鉴定[D]. 黄越敏.华中农业大学 2006
[9]不同启动子驱动下马铃薯蛋白酶抑制剂PinⅡ转基因水稻的遗传、表达和抗虫性分析[D]. 武亮.南京农业大学 2006
[10]黑龙江省二化螟发生规律及其生物防治的研究[D]. 裴海英.东北农业大学 2003
本文编号：2924522
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