马拉色菌在三种疾病中的基因型、药敏和脂肪酶活性研究

发布时间：2020-12-22 15:44

　　[目的]以健康组为对照,研究不同疾病分离的马拉色菌的基因型、药敏、脂肪酶活性,并分析其相关性。[方法]1.对分离自花斑糠疹、马拉色菌毛囊炎、脂溢性皮炎三种疾病和健康人皮肤的马拉色菌菌株进行DNA的提取,采用真菌通用引物ITS1/ITS4及NL1/NL4对致病菌rDNA的ITS区及DI/D2区进行PCR扩增并测序,碱基序列通过Sequencher软件拼接,用BLAST与Genebank的数据库进行比对进行菌种鉴定,并将各个菌株序列使用CLUSTAL序列分析软件进行多重比较,再通过Mega软件构建N-J系统树,通过系统发育树明确各个菌株亲缘性的远近。2.用脂肪酶活性测定试剂盒进行马拉色菌脂肪酶活性测定。3.结合前期药敏结果,分析马拉色菌基因型和药敏、脂肪酶活性之间的相关性。[结果]1. ITS区成功测序93株菌,D1/D2区成功测序98株菌,二者相比,D1/D2区测试成功率更高,二者测序比对结果完全一致。2.分子鉴定与传统方法鉴定（即生理生化形态学鉴定方法）结果相比较,二者鉴定结果一致性为58% （57/98）。3.分子鉴定结果显示,三种疾病的优势菌种为合轴马拉色菌和糠秕马拉色菌（分别占三... 

【文章来源】：昆明医科大学云南省

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

为真菌荧光染液染色

荧光染色液是一种快速检测真菌的新型染色液，的真菌细胞壁Ｐ－多糖结合，如几丁质和纤维素等，行检测。?克墨水染色?图２为真菌荧纯化??ｍｍ的橄榄油培养基平板，待分离的马拉色菌在育５－１４天，然后挑取单菌落于斜面橄榄油培养＾一？

图５过氧化氢酶实验阳性??吐温试验??－２０、２％吐温－４０、２％吐温－６０、２％吐温－８０分别加入沙堡ｉｎ灭菌后备用，在直径９ｃｍ的无菌平皿中制成４种吐温培养色菌制成２个麦氏单位（约相当于１０７菌量）的菌悬液，取吐温培养基上，３５°Ｃ培养７２小时，观察菌落生长情况。糠吐温培养基上均能生长，合轴马拉色菌在吐温－２０培养基上菌在吐温－８０培养基上生长较差（生长面积明显小于另外３长，在其余吐温培养基上生长良好，钝形马拉色菌、球形在４种吐温培养基上均无生长。??

【参考文献】：
期刊论文
[1]山苍子油及其分别与酮康唑、伊曲康唑及氟康唑联合抗马拉色菌的体外药敏试验[J]. 黄云丽,李红宾,许雪,李玉叶,董天祥.  临床皮肤科杂志. 2016(08)
[2]非培养DNA提取法鉴定马拉色菌菌种[J]. 张浩,冉玉平,谢震,代亚玲.  中国皮肤性病学杂志. 2014(03)
[3]马拉色菌属种内基因多态性机制的分析[J]. 穰真,崔凡,王有为,李薇.  四川医学. 2012(10)
[4]花斑糠疹和马拉色菌毛囊炎致病菌菌种分析[J]. 耿承芳,占萍,陶丽,李智华,江清,金云,罗云鹏.  中国皮肤性病学杂志. 2011(01)
[5]糠秕马拉色菌菌丝态和酵母态细胞差异表达片段的筛选[J]. 闫薇,冉玉平,梁作辉,夏庆杰,闫乃红,张浩.  中国皮肤性病学杂志. 2009(12)
[6]从花斑糠疹皮损分离的马拉色菌随机扩增多态性DNA研究[J]. 谢震,冉玉平,刘瑞,杨如学,李志瑜,代亚玲.  中华皮肤科杂志. 2009 (08)
[7]正常人耵聍中马拉色菌菌种构成研究[J]. 张浩,冉玉平,青春,代亚玲,向耘.  中国真菌学杂志. 2007(02)
[8]花斑癣患者皮屑中马拉色菌的巢式PCR法分析[J]. 赵秀红,冉玉平,熊琳,周光平,山崎Masashi,坪井良治,小川秀兴.  西部医学. 2004(01)



本文编号：2932013