牦牛GDF9和BMP15基因的克

发布时间：2020-12-26 05:27

　　以牦牛GDF9和BMP15基因为研究对象,采用PCR方法分别克隆出GDF9和BMP15的两个外显子片段,RT-PCR方法分析了GDF9和BMP15及靶定mi RNA在各组织中的表达情况。实验结果显示,克隆扩增获得外显子区进行生物信息学分析。牦牛GDF9基因外显子片段长分别411 bp和1 082 bp,编码453个氨基酸;BMP15基因外显子片段长分别为323 bp和802 bp,编码372个氨基酸。GDF9编码蛋白是亲水蛋白,含有一个信号肽和15个潜在磷酸化位点;BMP15编码蛋白是亲水蛋白,不含信号肽,有6个潜在磷酸化位点。通过实时荧光定量PCR方法分析牦牛GDF9和BMP15基因在不同组织中的表达量,结果表明GDF9在卵巢和子宫中表达相对较高,且卵巢表达显著高于其他组织,心、肾、胰和脾中无表达。BMP15仅在卵巢中表达。Target Scan预测靶定牦牛GDF9和BMP15基因的靶定mi RNA,分析GDF9靶基因bta-mi R-193a-3p和bta-mi R-193b在心、脾、肺、肾和子宫中的表达量,结果显示bta-mi R-193a-3p脾中表达量显著高于其他组织,但在心... 

【文章来源】：生物技术通报. 2016年02期 北大核心

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1组织样、细菌菌株和载体
        1.1.2分子生物学试剂
        1.1.3引物设计与合成
    1.2 方法
        1.2.1牦牛总DNA提取
        1.2.2 RNA的提取
        1.2.3反转录
        1.2.4 GDF9和BMP15基因的克隆
        1.2.5 GDF9和BMP15基因序列的生物信息学分析
            1.2.5.1理化性质分析
            1.2.5.2进化分析
        1.2.6 GDF9和BMP15基因靶标mi RNA预测
2 结果
    2.1 牦牛GDF9和BMP15基因的序列分析
    2.2 牦牛GDF9和BMP15蛋白的生物信息学分析
        2.2.1牦牛GDF9和BMP15基因编码蛋白一级结构序列分析
        2.2.2牦牛GDF9和BMP15基因编码蛋白二级和三级结构序列分析
        2.2.3 牦牛GDF9 和BMP15 基因编码蛋白的系统发育树分析
    2.3 牦牛GDF9和BMP15组织表达分析
    2.4 牦牛GDF9和BMP15靶定mi RNA的预测筛选与表达分析
3 讨论
4 结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Hsa-miR-193b抑制人子宫内膜腺癌细胞株HEC-1B侵袭能力[J]. 李荣,陈雪梅,何俊琳,丁裕斌,杨德辉,许皓,郑安舜,刘学庆.  第三军医大学学报. 2011(15)



本文编号：2939123