CNOT7基因敲减通过减少HepG2细胞TGF-β分泌对肿瘤免疫微环境的影响

发布时间：2021-01-07 01:11

　　目的:研究人CCR4-NOT转录复合体亚基7（CNOT7）基因敲减通过减少HepG2细胞TGF-β分泌对免疫微环境的影响。方法:（1）设计细胞转染方案,将实验分为3组:靶向敲减CNOT7组、阴性对照组和过表达CNOT7组,获得各组细胞后,用倒置荧光显微镜观察细胞转染效率;（2）Western blotting方法检测CNOT7、转化生长因子β（TGF-β）及核转录因子κB（NF-κB）p65蛋白的表达水平;（3）ELISA法测定细胞培养上清液中TGF-β水平;（4）流式细胞术检测转染后肿瘤细胞对自然杀伤（NK）细胞杀伤功能的敏感性;（5）流式细胞术检测三组细胞培养上清液对人外周血T细胞分泌功能的影响。结果:与阴性对照组相比,靶向敲减CNOT7组TGF-β和NF-κB p65蛋白表达水平显著降低（P<0.05）;过表达CNOT7组TGF-β和NF-κB p65蛋白表达水平显著升高（P<0.05）;靶向敲减CNOT7组细胞培养上清液中TGF-β水平显著降低（P<0.05）,过表达CNOT7组TGF-β水平显著升高（P<0.05）;NK细胞与肿瘤细胞共培养,靶向敲减C... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
abstract
常用缩写词中英文对照表
前言
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 实验方法
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 HepG2 细胞转染效率分析
    2.2 CNOT7 基因敲减对HepG2 细胞TGF-β1 蛋白、NF-κb p65 表达水平的影响
    2.3 CNOT7 基因敲减对HepG2 细胞分泌TGF-β1 水平的影响
    2.4 CNOT7 基因敲减后HepG2 细胞对NK细胞杀伤功能的敏感性
    2.5 CNOT7 基因敲减对T细胞分泌INF-γ水平的影响
    2.6 CNOT7 基因敲减对T细胞分泌TNF-α水平的影响
3 讨论
4 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
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本文编号：2961600