AIMP1基因在多发性骨髓瘤发生发展中的作用及其机制研究
发布时间：2021-01-09 22:49
背景和目的:多发性骨髓瘤（Multiple Myeloma,MM）是一种以骨髓中浆细胞的恶性增生为主要的病理学特征的血液系统常见的恶性肿瘤,疾病过程中最为明显的临床病变就是骨骼损害,表现为广泛性的溶骨性病变与不明原因的病理性骨折。而破骨细胞作为骨髓微环境的主角之一,由于骨髓瘤细胞的大量增殖与骨髓微环境的相互作用使其被异常激活,从而引发一系列骨骼损害相关的症状发生。本研究基于基因芯片技术筛选出与多发性骨髓瘤（Multiple Myeloma,MM）病人生存率与预后相关的基因,从中选择一个重要的候选癌基因氨基酰tRNA合成酶相互作用多功能蛋白质1（Aminoacy-tRNA synthetase-interacting multi-functional protein 1,AIMP1）作为分析与研究对象;在体外研究AIMP1基因表达对多发性骨髓瘤细胞增殖与破骨细胞分化的关系的影响;探究AIMP1引起多发性骨髓瘤细胞增殖与破骨分化的机制;寻找一种中药以抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖。方法:1.首先采集了大量初诊及大剂量化疗后的MM患者骨髓样本,Affymetrix U133 Plus2.0用作基...
【文章来源】：南京中医药大学江苏省
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．髙表达ＡＩＭＰ１相关肿瘤的箱形图
间差异。使用??Ｇｒａｐｈ?Ｐａｄ?Ｐｒｉｓｍ?８．０以及Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ?Ｅｘｃｅｌ?２０１０软件处理实验数据并作图。ｐ＜０．?０５表??示存在统计学意义。??４．结果??４．丨ＡＩＭＰ１高表达提示ＭＭ患者预后不良??使用基因芯片对ＮＰ、ＭＧＵＳ和ＭＭ患者的骨髓浆细胞进行全基因组基因表达谱筛??选，分析数据可得知，在ＭＭ患者的骨髓浆细胞中，ＡＩＭＰ１表达量明显高于ＮＰ和??ＭＧＵＳ，并且ＭＧＵＳ作为已知的ＭＭ的前体疾病，其ＡＩＭＰ１表达量亦高于ＮＰ（ｐ＜??０．?０００１）（图２－１Ａ）。同时，处于ＴＴ２的ＭＭ患者，尚表达ＡＩＭＰ１的ＭＭ患者的总生??存率（ＯＳ）以及无事件生存率（ＥＦＳ）均低于低表达的患者（ｐ＝０．０００２，ｐ＜０．?０００１）??（图２－ｌＢ，２＿ｌＣ）。另外，对于接受ＡＰＥＸ的ＭＭ患者，高表达ＡＩＭＰ１的ＭＭ患者的??总生存率（ＯＳ）低于低表达的患者（ｐ＜０．０００１）（图２－１Ｄ）。为了验证上述结果的可??靠性，我们使用酶联免疫吸附测定实验（ＥＬＩＳＡ）检测了?ＮＰ与ＭＭ患者血清中ＡＩＭＰ１??的含量，结果与预期一致，ＭＭ患者血清中的ＡＩＭＰ１含量明显高于正常人（ｐ＝０．?０１９５）??（图２－１Ｅ）。上述结果证明，高表达Ａ１ＭＰ１提示ＭＭ患者预后不良，提示ＡＩＭＰ１可作??为ＭＭ预后的潜在标志物。??Ａ?ｐ＜０．０００１?Ｂ?ＴＴ２??５０００－１??Ｔ＂?１００－Ｌ．?—?Ｌｏｗ??ｉ：：?＾?ｉ?ｉ??｜?２０００．?ｙｊｐ?§?？??＾?１０００－?２?２０?ｐ＝〇〇〇〇２??ｎ?ＷＭ?ｏＪ￣．￣￣．￣￣．￣￣，——，??０１??＇?＾??０?２０?４０?６
Ｓ的关系；Ｃ：??不同ＡＩＭＰ１表达量与ＴＴ２?ＭＭ患者ＥＦＳ的关系；Ｄ：不同ＡＩＭＰ１表达量与ＡＰＥＸ?ＭＭ??患者ＯＳ的关系；Ｅ：ＡＩＭＰ１在正常人与ＭＭ患者血清中的含量（ＮＰ：正常患者；ＭＭ：??ＭＭ患者；）。??４．?２敲低ＡＩＭＰ１可以抑制ＭＭ细胞增殖??收集Ｈ９２９、ＯＣＩ细胞空白对照组（Ｃｔｒｌ）与ＡＩＭＰ１?ｓｈＲＮＡ组（ＫＤ）的细胞沉淀并??提取蛋白，使用Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ检测以上细胞株中Ａ１ＭＰ１的蛋白表达情况以验证敲低??ＡＩＭＰ１的ＭＭ细胞株构建成功（图２－２Ａ）。Ａ１ＭＰＩ敲低细胞构建成功后，分别取Ｈ９２９??与０Ｃ丨处于对数生长期的Ｃｔｒｌ组与ＡＩＭＰ１?ＫＤ组细胞，使用ＭＴＴ法检测不同时间段各??组细胞的０Ｄ值，根据计算所得相对０Ｄ值来表示细胞活性（ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ）。实验结果??证明，在培养４８与７２小时后，Ａ１ＭＰ１敲低组细胞的细胞活性均低于对照组（图２－２Ｂ）??（ｐ＜０．?００１）。由此可证明，Ａ１ＭＰ１敲低后ＭＭ细胞的增殖受到抑制。??Ａ?Ｂ??Ｈ９２９?ＯＣｉ??８－．??Ｃｔｒｌ?ＫＤ?Ｃｔｒｌ?ＫＤ?＞?ｔｉｌ?＂＂?Ｈ９２９?Ｃｔｒ１??Ｉ?６－?ｊ?ｃａ?Ｈ９２９?ＫＤ??ＡＩＭＰ１?｜?｜?ａ?ＯＣＩ?Ｃｔｒｌ??％?４－?Ｃ３?ＯＣＩ?ＫＤ??「－－二??５?ｌ?Ｗ??ｐ－Ａｃｔｔｎ?孀■■？觸＿■＃?？■■■？?２－?ｌ?Ａ??＇?＿ｎｎｎ?ｉｎ?ｉｆｌ?Ｉｆｉ?丨ｆｉ??２４ｈ?４８ｈ?７２ｈ??ｈｏｕｒｓ??图２－２．敲低ＡＩＭＰ１可以抑制ＭＭ细胞增。Ａ：?ＡＩＭＰ１敲低的细胞中Ａ１ＭＰ１的??
【参考文献】：
期刊论文
[1]硼替佐米为主联合化疗方案与传统化疗方案治疗多发性骨髓瘤的疗效比较[J]. 黄源,张慧. 现代肿瘤医学. 2020(01)
[2]多发性骨髓瘤的治疗新进展[J]. 鲁阳,刘爱春. 医学综述. 2019(17)
[3]浅谈中医对多发性骨髓瘤的认识[J]. 何娅玲,刘松山,车虹. 世界最新医学信息文摘. 2019(20)
[4]硼替佐米对老年多发性骨髓瘤病人IL-6、CRP和β2-MG水平的影响及疗效观察[J]. 童勇,孙志强,朱华民,凌宇,郝丹,周婴,包世杰,冯春,杜飞. 实用老年医学. 2018(10)
[5]多发性骨髓瘤临床治疗及中医辨治策略探讨[J]. 王丹,周英. 湖北中医杂志. 2018(08)
[6]羟考酮缓释片联合椎体成形术及放疗治疗多发性骨髓瘤椎体转移性疼痛的临床观察[J]. 李莉,张文华,代小春,江恒,敬新蓉,罗文平,李青,廖皓,钟国成,张明慧,席洁琳,孙薏. 肿瘤预防与治疗. 2018(02)
[7]中医药治疗多发性骨髓瘤辨治体会[J]. 倪海雯,陈晓丽,姜鹏君,于慧. 中医药临床杂志. 2017(10)
[8]AIMP1生物学活性的研究进展[J]. 邹宸,郑志. 医学综述. 2017(16)
[9]骨髓瘤骨病的发生机制及治疗进展[J]. 朱尊民. 临床血液学杂志. 2017(04)
[10]多发性骨髓瘤遗传学的研究进展[J]. 杨毅,邓玲,聂代蓉,陈永平,牟庆云,钟晖,向靓. 现代生物医学进展. 2016(26)
本文编号：2967541
【文章来源】：南京中医药大学江苏省
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．髙表达ＡＩＭＰ１相关肿瘤的箱形图
间差异。使用??Ｇｒａｐｈ?Ｐａｄ?Ｐｒｉｓｍ?８．０以及Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ?Ｅｘｃｅｌ?２０１０软件处理实验数据并作图。ｐ＜０．?０５表??示存在统计学意义。??４．结果??４．丨ＡＩＭＰ１高表达提示ＭＭ患者预后不良??使用基因芯片对ＮＰ、ＭＧＵＳ和ＭＭ患者的骨髓浆细胞进行全基因组基因表达谱筛??选，分析数据可得知，在ＭＭ患者的骨髓浆细胞中，ＡＩＭＰ１表达量明显高于ＮＰ和??ＭＧＵＳ，并且ＭＧＵＳ作为已知的ＭＭ的前体疾病，其ＡＩＭＰ１表达量亦高于ＮＰ（ｐ＜??０．?０００１）（图２－１Ａ）。同时，处于ＴＴ２的ＭＭ患者，尚表达ＡＩＭＰ１的ＭＭ患者的总生??存率（ＯＳ）以及无事件生存率（ＥＦＳ）均低于低表达的患者（ｐ＝０．０００２，ｐ＜０．?０００１）??（图２－ｌＢ，２＿ｌＣ）。另外，对于接受ＡＰＥＸ的ＭＭ患者，高表达ＡＩＭＰ１的ＭＭ患者的??总生存率（ＯＳ）低于低表达的患者（ｐ＜０．０００１）（图２－１Ｄ）。为了验证上述结果的可??靠性，我们使用酶联免疫吸附测定实验（ＥＬＩＳＡ）检测了?ＮＰ与ＭＭ患者血清中ＡＩＭＰ１??的含量，结果与预期一致，ＭＭ患者血清中的ＡＩＭＰ１含量明显高于正常人（ｐ＝０．?０１９５）??（图２－１Ｅ）。上述结果证明，高表达Ａ１ＭＰ１提示ＭＭ患者预后不良，提示ＡＩＭＰ１可作??为ＭＭ预后的潜在标志物。??Ａ?ｐ＜０．０００１?Ｂ?ＴＴ２??５０００－１??Ｔ＂?１００－Ｌ．?—?Ｌｏｗ??ｉ：：?＾?ｉ?ｉ??｜?２０００．?ｙｊｐ?§?？??＾?１０００－?２?２０?ｐ＝〇〇〇〇２??ｎ?ＷＭ?ｏＪ￣．￣￣．￣￣．￣￣，——，??０１??＇?＾??０?２０?４０?６
Ｓ的关系；Ｃ：??不同ＡＩＭＰ１表达量与ＴＴ２?ＭＭ患者ＥＦＳ的关系；Ｄ：不同ＡＩＭＰ１表达量与ＡＰＥＸ?ＭＭ??患者ＯＳ的关系；Ｅ：ＡＩＭＰ１在正常人与ＭＭ患者血清中的含量（ＮＰ：正常患者；ＭＭ：??ＭＭ患者；）。??４．?２敲低ＡＩＭＰ１可以抑制ＭＭ细胞增殖??收集Ｈ９２９、ＯＣＩ细胞空白对照组（Ｃｔｒｌ）与ＡＩＭＰ１?ｓｈＲＮＡ组（ＫＤ）的细胞沉淀并??提取蛋白，使用Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ检测以上细胞株中Ａ１ＭＰ１的蛋白表达情况以验证敲低??ＡＩＭＰ１的ＭＭ细胞株构建成功（图２－２Ａ）。Ａ１ＭＰＩ敲低细胞构建成功后，分别取Ｈ９２９??与０Ｃ丨处于对数生长期的Ｃｔｒｌ组与ＡＩＭＰ１?ＫＤ组细胞，使用ＭＴＴ法检测不同时间段各??组细胞的０Ｄ值，根据计算所得相对０Ｄ值来表示细胞活性（ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ）。实验结果??证明，在培养４８与７２小时后，Ａ１ＭＰ１敲低组细胞的细胞活性均低于对照组（图２－２Ｂ）??（ｐ＜０．?００１）。由此可证明，Ａ１ＭＰ１敲低后ＭＭ细胞的增殖受到抑制。??Ａ?Ｂ??Ｈ９２９?ＯＣｉ??８－．??Ｃｔｒｌ?ＫＤ?Ｃｔｒｌ?ＫＤ?＞?ｔｉｌ?＂＂?Ｈ９２９?Ｃｔｒ１??Ｉ?６－?ｊ?ｃａ?Ｈ９２９?ＫＤ??ＡＩＭＰ１?｜?｜?ａ?ＯＣＩ?Ｃｔｒｌ??％?４－?Ｃ３?ＯＣＩ?ＫＤ??「－－二??５?ｌ?Ｗ??ｐ－Ａｃｔｔｎ?孀■■？觸＿■＃?？■■■？?２－?ｌ?Ａ??＇?＿ｎｎｎ?ｉｎ?ｉｆｌ?Ｉｆｉ?丨ｆｉ??２４ｈ?４８ｈ?７２ｈ??ｈｏｕｒｓ??图２－２．敲低ＡＩＭＰ１可以抑制ＭＭ细胞增。Ａ：?ＡＩＭＰ１敲低的细胞中Ａ１ＭＰ１的??
【参考文献】：
期刊论文
[1]硼替佐米为主联合化疗方案与传统化疗方案治疗多发性骨髓瘤的疗效比较[J]. 黄源,张慧. 现代肿瘤医学. 2020(01)
[2]多发性骨髓瘤的治疗新进展[J]. 鲁阳,刘爱春. 医学综述. 2019(17)
[3]浅谈中医对多发性骨髓瘤的认识[J]. 何娅玲,刘松山,车虹. 世界最新医学信息文摘. 2019(20)
[4]硼替佐米对老年多发性骨髓瘤病人IL-6、CRP和β2-MG水平的影响及疗效观察[J]. 童勇,孙志强,朱华民,凌宇,郝丹,周婴,包世杰,冯春,杜飞. 实用老年医学. 2018(10)
[5]多发性骨髓瘤临床治疗及中医辨治策略探讨[J]. 王丹,周英. 湖北中医杂志. 2018(08)
[6]羟考酮缓释片联合椎体成形术及放疗治疗多发性骨髓瘤椎体转移性疼痛的临床观察[J]. 李莉,张文华,代小春,江恒,敬新蓉,罗文平,李青,廖皓,钟国成,张明慧,席洁琳,孙薏. 肿瘤预防与治疗. 2018(02)
[7]中医药治疗多发性骨髓瘤辨治体会[J]. 倪海雯,陈晓丽,姜鹏君,于慧. 中医药临床杂志. 2017(10)
[8]AIMP1生物学活性的研究进展[J]. 邹宸,郑志. 医学综述. 2017(16)
[9]骨髓瘤骨病的发生机制及治疗进展[J]. 朱尊民. 临床血液学杂志. 2017(04)
[10]多发性骨髓瘤遗传学的研究进展[J]. 杨毅,邓玲,聂代蓉,陈永平,牟庆云,钟晖,向靓. 现代生物医学进展. 2016(26)
本文编号：2967541
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