小麦TaDCD和TaLCD基因对ABA、干旱及盐胁迫的调节作用

发布时间：2021-01-13 23:43

　　植物生长经常受到不利环境条件的挑战,包括极端温度、干旱和高盐度。近年来,研究认为硫化氢（H2S）能够提高植物对逆境胁迫的耐受性。目前关于H2S生理作用的研究多是通过外源施加H2S的供体、H2S清除剂或H2S合成抑制剂后,研究植物的生理生化变化,并测定相应的生理指标,关于内源性H2S生理功能的研究过少。植物内源性H2S产生的主要途径是以半胱氨酸（Cys）为底物,经半胱氨酸脱巯基（CDes）酶催化降解生成。以Cys为底物合成H2S的关键酶L/D-CDes的编码基因LCD和DCD已经在拟南芥中克隆得到,但是小麦中这两个基因的序列还没有人报导,因此,实验室前期首次从小麦中克隆得到L/D-CD基因,转入拟南芥中过表达,得到转基因株系,为研究这两个基因的功能打下了基础。本实验以野生型拟南芥（WT）和TaLCD、TaDCD过表达株系为实验材料,探讨TaLCD、TaDCD基因对ABA、干旱及盐胁迫的调节作用。主要实验结果如下:本实验通过对TaDCD过表达拟南芥的种子萌发、根系生长、气孔关闭和抗旱性进行研究,确定了 TaD-CDes的生理效应。结果表明,与野生型株系（WT）相比,TaDCD过表达植株的种... 

【文章来源】：河南农业大学河南省

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２植物体内ＩｈＳ合成的主要途径＾??Ｆｉｇ．２?Ｔｈｅ?ｍａｉｎ?ｐａｔｈｗａｙ?ｆｏｒ?ｆｈＳ?ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ?ｉｎ?ｐｌａｎｔｓ??

３．４?结果与分析??３．４．１?ｒｆｌＤＣ￡）过表达植株鉴定??本实验对７Ｖ／ＤＣＤ过表达株系进行了转录水平和酶活水平鉴定，结果表明转基因拟南??芥中Ｄ型半胱氨酸脱巯基酶的转录水平和酶活性均高于野生型。其中Ｌｍｅ?１中Ｄ－ＣＤｅｓ酶??活性是野生型的３．４９倍，Ｌｉｎｅ?２的酶活性是ＷＴ的２．６倍（图３）。??ａ?，：．，〇〇〇，?８?４０］?．??１?－ＪＳ＿?ａｍ??！：：?１?，?Ｉ?＿?圍??ＷＴ?Ｌｉｎｅ！?Ｌｉｎｃ２?Ｌｉｎｅ?Ｉ?Ｌｉｎｒ２??图３野生型（ＷＴ）和转基因株系中ＴａＤ－ＣＤｅｓ的转录表达（Ａ）和酶活性（Ｂ）??ＷＴ和７Ｖ／ＺＸＶ）过表达的两个株系（用Ｌｉｎｅｌ＆Ｌｉｎｅ２表示）种植在１／２ＭＳ培养基上，生长丨０天后取样收集??幼苗，进行ｑＲＴ－ＰＣＲ和酶活性检测，值是三次重复的平均值：ｔＳＤ，在每个重复中使用每种基因型至少２０??株幼苗。星号＊表明转基因株系与野生型（ＷＴ）之间存在显著差异（Ｐ＜０．０５）??Ｆｉｇ．３?Ｔｈｅ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?（ａ）?ａｎｄ?ｅｎｚｙｍｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ?（ｂ）?ｏｆ?ＴａＤ－ＣＤｃｓ??ｉｎ?ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ?（ＷＴ）?ａｎｄ?ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ?ｐｌａｎｔｓ．??ＷＴ?ａｎｄ?Ｉａｖｏ?ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｓｔｒａｉｎ?ｏｆ?ＴａＤＣＤ?（ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ｂｙ?Ｌｉｎｅｌ?＆?Ｌｉｎｅ?２）?ｗｅｒｅ?ｐｌａｎｔｅｄ?ｏｎ?１／２?ＭＳ?ｍｅｄｉｕｍ．??Ａｆｔｅｒ?１０?ｄａｙｓ?ｏｆ?ｇｒｏｗｔｈ，?ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ?ｗｅｒｅ?ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ?ａｎｄ?ｔｅｓｔｅｄ?ｆｏｒ

１５０ｉ?ＣＤ?ＷＴ??＾?ｍｍ?Ｕｎｅ１??ｌｌ〇ａ?＊■Ｌｉｎｅ２??ｉ?ｍ?ｒ．??Ｉ＂?Ｉ?ｆＴｌ?ｒｋ？??Ｌ?Ｊ?—．１—：麗??Ｃｏｎｔｒｏｌ?０?２５?０．５?ｐＭ?ＡＢＡ??图４不同浓度ＡＢＡ处理下拟南芥的发芽率??Ｆｉｇ．４?Ａ．ｔｌｉａｌｉａｎａ?ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ?ｒａｔｅ?ｕｎｄｅｒ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ＡＢＡ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?０．２５?ｐＭ?ＡＢＡ??１??十＿十＿??（＝３?ＷＴ??１Ｓ０－１?．?．?？??ｓｉ?Ｌｉｎｅｉ??＃?ｓ？ｓＢ?Ｌｉｎｅ２??Ｉ１，?ｍ??ｔ?ｆｉ?．??Ｃ?ＳＯ－?ｉｄ?ｆ??＾?０?，ｉ?■??Ｃｏｎｔｒｏｌ?０．２５?０．５?ｐＭ?ＡＢＡ??图５不同浓度ＡＢＡ处理下拟南芥子叶绿化率??Ｆｉｇ．５?Ａ．ｔｈａｌｉａｎａ?ｃｏｔｙｌｅｄｏｎ?ｇｒｅｅｎｉｎｇ?ｒａｔｅ?ｕｎｄｅｒ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＡＢＡ??１９??


本文编号：2975767