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缢蛏C型凝集素基因ScCTL-1和ScCTL-2的克隆鉴定与免疫功能研究

发布时间:2021-01-16 02:26
  缢蛏(Sinonovacula constricta)是我国重要的海水养殖贝类之一。近年来,随着缢蛏高密度养殖的发展和养殖环境的不断恶化,细菌性疾病成为了缢蛏养殖中的一大问题。研究表明,C型凝集素(C-type lectin)作为一种模式识别受体(Pattern recognition receptor,PRR),广泛参与贝类的免疫防御机制,在贝类免疫中占据着重要的地位。但目前为止,在缢蛏中尚少有关于C型凝集素研究的报道。本文克隆了2个缢蛏C型凝集素基因,并对它们的mRNA表达模式以及重组蛋白的免疫功能进行了研究。1.从之前构建的缢蛏转录组文库中获得了2个C型凝集素基因ScCTL-1和ScCTL-2的序列片段,使用RACE-PCR技术克隆得到它们的cDNA全长序列。序列分析结果表明,ScCTL-1基因cDNA全长2370bp,包含一个长度为1899bp的开放阅读框(Open reading frame,ORF),编码632个氨基酸,蛋白相对分子量约为70.22kDa;ScCTL-2基因cDNA全长2194bp,包含一个长度为1893bp的ORF,编码630个氨基酸,蛋白相对分子量约为7... 

【文章来源】:上海海洋大学上海市

【文章页数】:61 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

缢蛏C型凝集素基因ScCTL-1和ScCTL-2的克隆鉴定与免疫功能研究


CTLD空间结构图

结合位点,基序,糖类


LD 的 Ca2+结合位点。4 个 Ca2+结合位点分别在人 ASGPR-I 与大鼠 MBP示,并用箭头指明编号。Ca-binding sites in CTLDs. Shown are ribbon diagrams of two representa, rat MBP-Aand human ASGPR-I, demonstrating the four typical locations of cLD. Ca2+ions are shown as black spheres, and numbers referenced to the diffee indicated next to the arrows[27].a2+依赖的糖类结合TLD 中,直接参与糖类结合的 Ca2+结合位点 2 拥有两个特征化基序和“WND”基序。两个基序与 Ca2+一同参与 CTLD 对糖类鼠 MBP-A 为例:大鼠 MBP-A 的“EPN”基序(E185,P186, 的长环区。位于基序中心顺式构象的脯氨酸是在所有 CTLD 中,它不参与 CTLD 的 Ca2+配合和糖类结合过程中化学键的形成侧氨基酸结构的作用。脯氨酸两侧的谷氨酸和天冬酰胺各自与键。大鼠 MBP-A 的“WND”基序(W204,N205,D206)位

序列,缢蛏,系统发育树,拓扑稳定性


16图 2-2 缢蛏两个 C 型凝集素的系统发育树分析。在 MEGA5 中使用邻近法对经ClustalW-generated 多重比对的 CTLD 序列进行系统发育树的构建。拓扑稳定性使用 10,000 次自动重复,图中数值表示置信度。Fig. 2-2 Phylogenetic tree constructed to show the 8 CTLDs of two C-type lectins from S. constrictawith other CTLDs. The phylogenetic tree was constructed by ClustalW-generated multiple sequencealignment of the amino acid sequences, using neighbor-joining in the MEGA 5 package. Thetopological stability of the neighbor-joining trees was evaluated using 10,000 bootstrappingreplications. The numbers at branches indicate the bootstrap values (%).


本文编号:2979973

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