二色补血草囊泡运输相关基因的克隆及功能分析
发布时间：2021-01-18 19:12
盐分胁迫是全球范围内普遍存在的一种主要非生物胁迫,影响植物生长、降低农业生产力和限制区域发展。盐碱地作为国家的重要后备土地资源,其价值不容忽视,盐碱地的开发和利用对于解决我国土地资源短缺尤为重要。开发利用盐碱地最经济有效的措施就是利用耐盐碱植物本身对盐碱的抗性,所以研究盐生植物的耐盐机理具有重要的意义。虽然国内外对盐生植物的研究已经取得了一定的成果,但是对于盐生植物耐盐的分子机理还需要进行深入的研究,其中二色补血草作为典型的泌盐盐生植物,其泌盐机理还不清楚,所以本论文克隆了可能与二色补血草泌盐相关的基因并分析其功能。本试验通过从二色补血草叶片中克隆到3个囊泡运输相关基因,并对这3个基因的功能做进一步的研究:（1）对3个基因进行生物信息学分析。（2）在二色补血草中过量表达分析。（3）利用CRISPR-Cas9技术分别将二色补血草中的3个基因敲除,进一步验证该类基因的功能。（4）在拟南芥中进行过量表达分析。（5）研究拟南芥囊泡运输相关基因缺失的突变体植株。主要试验结果如下:1.根据二色补血草RNASeq的结果,我们得到了3个与二色补血草囊泡运输相关基因,分别为LB00297、LB11044...
【文章来源】：山东师范大学山东省
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
A，提取二色补血草叶片RNA的TAE电泳结果；B，C，D分别是
B，C 分别是 LB11277、LB11044 和 LB00297 的 3'PCR 产物，D、E、F分别是 LB11277、LB11044 和 LB00297 的 5'PCR 产物。其中 1，2，3，4 分别是1st PCR 产物、负对照、2nd PCR 产物、负对照；5，6 分别是 1st PCR 产物、2nd PCR 产物；M：标准分子量为 2000 的 DNA Marker。Fig.1-2 A, B, C: The 3'partial fragment of LB11277, LB11044 and LB00297 from PCR;D, E, F: The 5'partial fragment of LB11277, LB11044 and LB00297 from PCR;1, 2, 3, 4: 1st gene from PCR, negative control, 2nd gene from PCR, negative control;5, 6: 1st gene from PCR, 2nd gene from PCR; M: DL2000 DNA Marker.3.3 RACE 后全长基因片段的获得如图 1-3，A、B 和 C 第 1 泳道分别是 LB11277、LB11044 和 LB00297 的全长序列，预计条带分别约 1.5 kbp、1.3 kbp 和 0.9 kbp。将得到的 PCR 产物送至测序公司测序，测序得到的序列在 NCBI 网站上进行 Blast 分析。获得的 LB00297 基因的片段大小为 1066 bp，该基因共有编码序列 660 bp，
山东师范大学硕士学位论文11277 基因的片段大小为 1478 bp，如表 1-6醉蝶花（Tarenaya hassleriana）的囊泡膜蛋4%。该基因共有编码序列 717 bp，编码 238与拟南芥中的囊泡运输基因 AT4G00170 进行-6）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]CRISPR/Cas9系统:基因组定点编辑技术及其在植物基因功能研究中的应用[J]. 包爱科,白天惠,赵天璇,苏家豪. 草业学报. 2017(07)
[2]碱性盐胁迫对白三叶种子萌发及幼苗生长的影响[J]. 潘多锋,申忠宝,王建丽,高超,李道明,张瑞博. 北方园艺. 2015(14)
[3]盐碱地改良技术研究综述[J]. 胡一,韩霁昌,张扬. 陕西农业科学. 2015(02)
[4]CRISPR-Cas介导的基因编辑工具[J]. 左其生,李东,张亚妮,李碧春. 生物技术通报. 2014(07)
[5]基于CRISPR-Cas系统的基因组定点修饰新技术[J]. 王梦瑶,杨亦农,边红武. 中国生物化学与分子生物学报. 2014(05)
[6]一种新的由CRISPR/Cas系统介导的基因组靶向修饰技术[J]. 刘思也,夏海滨. 中国生物工程杂志. 2013(10)
[7]TALEN or Cas9-Rapid,Efficient and Specific Choices for Genome Modifications[J]. Chuanxian Wei,Jiyong Liu,Zhongsheng Yu,Bo Zhang,Guanjun Gao,Renjie Jiao. Journal of Genetics and Genomics. 2013(06)
[8]NaCl胁迫对黄瓜种子萌发的影响及DNA甲基化的MSAP分析[J]. 黄韫宇,张海军,邢燕霞,齐艳,孙倩倩,周春蕾,赵冰,郭仰东. 中国农业科学. 2013(08)
[9]NaCl胁迫对拟南芥种子萌发与幼苗生长的影响[J]. 鲁红侠,杨艳,朱小茜. 安徽农业科学. 2013(08)
[10]盐胁迫对拟南芥种子萌发的影响[J]. 陆玉建,高春明,郑香峰,钮松召. 湖北农业科学. 2012(22)
博士论文
[1]基于CRISPR/Cas9的水稻多基因编辑及其在育种中的应用[D]. 沈兰.扬州大学 2017
[2]CRISPR-Cas9技术在B型血友病小鼠模型构建及治疗的应用研究[D]. 关玉婷.华东师范大学 2016
[3]囊泡运输在二色补血草盐腺泌盐中的作用研究[D]. 冯中涛.山东师范大学 2015
[4]二色补血草叶片盐腺泌盐机理的研究[D]. 丁烽.山东师范大学 2010
硕士论文
[1]基于CRISPR-Cas9系统的谷氨酸棒状杆菌基因组编辑技术的研究[D]. 靳海迎.山东大学 2017
[2]盐胁迫对高羊茅种子萌发、幼苗生理生化指标的影响及miRNA的鉴定[D]. 孙西红.河南科技大学 2014
[3]互花米草富集盐腺细胞转录组测序分析及耐盐相关基因的克隆与鉴定[D]. 刘瑜.烟台大学 2011
本文编号：2985496
【文章来源】：山东师范大学山东省
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
A，提取二色补血草叶片RNA的TAE电泳结果；B，C，D分别是
B，C 分别是 LB11277、LB11044 和 LB00297 的 3'PCR 产物，D、E、F分别是 LB11277、LB11044 和 LB00297 的 5'PCR 产物。其中 1，2，3，4 分别是1st PCR 产物、负对照、2nd PCR 产物、负对照；5，6 分别是 1st PCR 产物、2nd PCR 产物；M：标准分子量为 2000 的 DNA Marker。Fig.1-2 A, B, C: The 3'partial fragment of LB11277, LB11044 and LB00297 from PCR;D, E, F: The 5'partial fragment of LB11277, LB11044 and LB00297 from PCR;1, 2, 3, 4: 1st gene from PCR, negative control, 2nd gene from PCR, negative control;5, 6: 1st gene from PCR, 2nd gene from PCR; M: DL2000 DNA Marker.3.3 RACE 后全长基因片段的获得如图 1-3，A、B 和 C 第 1 泳道分别是 LB11277、LB11044 和 LB00297 的全长序列，预计条带分别约 1.5 kbp、1.3 kbp 和 0.9 kbp。将得到的 PCR 产物送至测序公司测序，测序得到的序列在 NCBI 网站上进行 Blast 分析。获得的 LB00297 基因的片段大小为 1066 bp，该基因共有编码序列 660 bp，
山东师范大学硕士学位论文11277 基因的片段大小为 1478 bp，如表 1-6醉蝶花（Tarenaya hassleriana）的囊泡膜蛋4%。该基因共有编码序列 717 bp，编码 238与拟南芥中的囊泡运输基因 AT4G00170 进行-6）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]CRISPR/Cas9系统:基因组定点编辑技术及其在植物基因功能研究中的应用[J]. 包爱科,白天惠,赵天璇,苏家豪. 草业学报. 2017(07)
[2]碱性盐胁迫对白三叶种子萌发及幼苗生长的影响[J]. 潘多锋,申忠宝,王建丽,高超,李道明,张瑞博. 北方园艺. 2015(14)
[3]盐碱地改良技术研究综述[J]. 胡一,韩霁昌,张扬. 陕西农业科学. 2015(02)
[4]CRISPR-Cas介导的基因编辑工具[J]. 左其生,李东,张亚妮,李碧春. 生物技术通报. 2014(07)
[5]基于CRISPR-Cas系统的基因组定点修饰新技术[J]. 王梦瑶,杨亦农,边红武. 中国生物化学与分子生物学报. 2014(05)
[6]一种新的由CRISPR/Cas系统介导的基因组靶向修饰技术[J]. 刘思也,夏海滨. 中国生物工程杂志. 2013(10)
[7]TALEN or Cas9-Rapid,Efficient and Specific Choices for Genome Modifications[J]. Chuanxian Wei,Jiyong Liu,Zhongsheng Yu,Bo Zhang,Guanjun Gao,Renjie Jiao. Journal of Genetics and Genomics. 2013(06)
[8]NaCl胁迫对黄瓜种子萌发的影响及DNA甲基化的MSAP分析[J]. 黄韫宇,张海军,邢燕霞,齐艳,孙倩倩,周春蕾,赵冰,郭仰东. 中国农业科学. 2013(08)
[9]NaCl胁迫对拟南芥种子萌发与幼苗生长的影响[J]. 鲁红侠,杨艳,朱小茜. 安徽农业科学. 2013(08)
[10]盐胁迫对拟南芥种子萌发的影响[J]. 陆玉建,高春明,郑香峰,钮松召. 湖北农业科学. 2012(22)
博士论文
[1]基于CRISPR/Cas9的水稻多基因编辑及其在育种中的应用[D]. 沈兰.扬州大学 2017
[2]CRISPR-Cas9技术在B型血友病小鼠模型构建及治疗的应用研究[D]. 关玉婷.华东师范大学 2016
[3]囊泡运输在二色补血草盐腺泌盐中的作用研究[D]. 冯中涛.山东师范大学 2015
[4]二色补血草叶片盐腺泌盐机理的研究[D]. 丁烽.山东师范大学 2010
硕士论文
[1]基于CRISPR-Cas9系统的谷氨酸棒状杆菌基因组编辑技术的研究[D]. 靳海迎.山东大学 2017
[2]盐胁迫对高羊茅种子萌发、幼苗生理生化指标的影响及miRNA的鉴定[D]. 孙西红.河南科技大学 2014
[3]互花米草富集盐腺细胞转录组测序分析及耐盐相关基因的克隆与鉴定[D]. 刘瑜.烟台大学 2011
本文编号：2985496
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