四季桂成花基因OfFT、OfSOC1和OfAP1克隆及其功能研究
发布时间：2021-01-18 19:09
桂花（Osmanthus fragrans）是木犀科（Oleaceae）木犀属常绿灌木或乔木,根据花期可分为秋桂与四季桂。四季桂可多季节成花,其中秋季开花花量大而集中,呈聚伞花序且无总梗,而其他季节花呈圆锥花序,并且有花序总梗。本研究以四季桂品种‘佛顶珠’和秋桂品种‘堰虹桂’为实验材料,采用PCR和RACE技术对桂花中的成花基因FT、SOC1和AP1进行克隆,采用实时荧光定量PCR技术对成花整合基因进行表达分析,并对关键整合因子FT和SOC1进行拟南芥转化实验验证功能。主要获得以下结果:（1）桂花成花基因的克隆与序列分析:克隆得到Of FT、Of SOC1A、Of SOC1B、Of AP1 c DNA序列,其在‘堰虹桂’和‘佛顶珠’中序列一致,其ORF长度分别为525 bp、657 bp、651 bp和720 bp;克隆得到Of FT DNA含有4个外显子和3个内含子,‘堰虹桂’中序列长度为2034 bp,‘佛顶珠’中序列长度为2041 bp;RACE克隆发现Of FT在‘堰虹桂’和‘佛顶珠’中均存在两种转录后调控,分别为同时缺失第三四外显子和单独缺失第四外显子。（2）桂花成花基因的表...
【文章来源】：浙江农林大学浙江省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
技术路线
3桂花成花整合基因的克隆和分析173.2结果与分析3.2.1桂花成花基因cDNA序列克隆与分析3.2.1.1目的片段的获得克隆得到FT基因1条，其cDNA全长600bp，通过NCBIBLAST在线比对分析，其与油橄榄（Oleaeuropaea）、枣树（Ziziphusjujuba）、贝壳杉（Shoreabeccariana）等物种中的FT基因同源性达到80%以上，确定为FT的同源基因，将其命名为OfFT，其中编码区长度为525bp，起始密码子为ATG，终止密码子为TAG，编码174个氨基酸。克隆得到OfSOC1基因2条，两条序列相似性为64.96%，通过NCBIBLAST在线比对分析，其均与油橄榄、烟草（Nicotianatabacum）、枣树等物种中的SOC1基因高达90%以上的相似性，将其命名为OfSOC1A和OfSOC1B。其中编码区长度分别为657bp和654bp，起始密码子均为ATG，终止密码子均为TGA，分别编码218和217个氨基酸。克隆得到AP1基因1条，其cDNA全长720bp，通过NCBIBLAST在线比对分析，其与油橄榄、芝麻（Sesamumindicum）、欧丁香（Syringavulgaris）等物种中的AP1/CAL基因同源性达到80%以上，将其命名为OfAP1，其中编码区长度为720bp，起始密码子为ATG，终止密码子为TGA，编码239个氨基酸。图3.1桂花OfFT（a）、OfSOC1A（b）、OfSOC1B（c）、OfAP1（d）cDNA克隆Figure3.1AgroseelectrophoresisofOfFT（a）、OfSOC1A（b）、OfSOC1B（c）andOfAP1（d）RT-PCR3.2.1.2桂花成花基因氨基酸结构分析和系统进化将OfFT、OfSOC1A、OfSOC1B和OfAP1核苷酸序列翻译成氨基酸序列后，使用NCBI，BlastConservedDomin分析，发现OfFT属于PEBP家族基因，具有
四季桂成花基因 OfFT、OfSOC1、OfAP1 克隆及其功能研究PEBP 家族共同的结构域；OfSOC1A、OfSOC1B 和 OfAP1 都属于 MADS 家族基因，都含有 MADS 结构域和 K 盒结构（图 3.2）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]水曲柳FmSOC1基因烟草中遗传转化[J]. 齐凤慧,陈思齐,付德山,孟祥宇,詹亚光. 西北林学院学报. 2017(05)
[2]‘四季桂’不同季节的花芽分化与发育比较[J]. 陆婷,王艺光,骆义波,张超,付建新,董彬,胡绍庆,赵宏波. 园艺学报. 2017(06)
[3]红掌2个SOC1基因的克隆、序列与表达分析[J]. 马广莹,朱开元,史小华,邹清成,刘慧春,詹菁,田丹青. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2017(03)
[4]梅花PmSOC1-like基因的克隆与表达分析[J]. 李玉舒,杨炜茹,程堂仁,王佳,张启翔. 华北农学报. 2016(05)
[5]桂花花芽分化和花开放研究进展[J]. 王英,张超,付建新,赵宏波. 浙江农林大学学报. 2016(02)
[6]蝴蝶兰SOC1基因的克隆及表达分析[J]. 崔波,王洁琼,宋彩霞,蒋素华,梁芳,袁秀云,马杰. 分子植物育种. 2016(03)
[7]金柑FcSOC1同源基因的克隆及表达分析[J]. 旦帅男,胡颖,何新华,张奕,安振宇,徐趁,罗聪,黄桂香. 基因组学与应用生物学. 2015(12)
[8]马尾松PmFT1基因克隆及对花发育的影响[J]. 陈虎,杨章旗,谭健晖,冯源恒,贾婕,唐国强,欧军. 基因组学与应用生物学. 2015(04)
[9]拟南芥开花时间调控的分子基础[J]. 张艺能,周玉萍,陈琼华,黄小玲,田长恩. 植物学报. 2014(04)
[10]大岩桐SOC1同源基因的克隆及其功能研究[J]. 韩雪,姜仕豪,钟丹,胡立霞,庞基良. 分子植物育种. 2014(01)
博士论文
[1]菊花FT-likes基因开花调控功能研究[D]. 孙静.南京农业大学 2014
硕士论文
[1]绿竹和雷竹SOC1同源基因克隆和功能分析[D]. 马腾飞.浙江农林大学 2013
[2]桂花不同栽培变种的成花条件及花器官发育的形态解剖学研究[D]. 曹际云.山东大学 2008
本文编号：2985490
【文章来源】：浙江农林大学浙江省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
技术路线
3桂花成花整合基因的克隆和分析173.2结果与分析3.2.1桂花成花基因cDNA序列克隆与分析3.2.1.1目的片段的获得克隆得到FT基因1条，其cDNA全长600bp，通过NCBIBLAST在线比对分析，其与油橄榄（Oleaeuropaea）、枣树（Ziziphusjujuba）、贝壳杉（Shoreabeccariana）等物种中的FT基因同源性达到80%以上，确定为FT的同源基因，将其命名为OfFT，其中编码区长度为525bp，起始密码子为ATG，终止密码子为TAG，编码174个氨基酸。克隆得到OfSOC1基因2条，两条序列相似性为64.96%，通过NCBIBLAST在线比对分析，其均与油橄榄、烟草（Nicotianatabacum）、枣树等物种中的SOC1基因高达90%以上的相似性，将其命名为OfSOC1A和OfSOC1B。其中编码区长度分别为657bp和654bp，起始密码子均为ATG，终止密码子均为TGA，分别编码218和217个氨基酸。克隆得到AP1基因1条，其cDNA全长720bp，通过NCBIBLAST在线比对分析，其与油橄榄、芝麻（Sesamumindicum）、欧丁香（Syringavulgaris）等物种中的AP1/CAL基因同源性达到80%以上，将其命名为OfAP1，其中编码区长度为720bp，起始密码子为ATG，终止密码子为TGA，编码239个氨基酸。图3.1桂花OfFT（a）、OfSOC1A（b）、OfSOC1B（c）、OfAP1（d）cDNA克隆Figure3.1AgroseelectrophoresisofOfFT（a）、OfSOC1A（b）、OfSOC1B（c）andOfAP1（d）RT-PCR3.2.1.2桂花成花基因氨基酸结构分析和系统进化将OfFT、OfSOC1A、OfSOC1B和OfAP1核苷酸序列翻译成氨基酸序列后，使用NCBI，BlastConservedDomin分析，发现OfFT属于PEBP家族基因，具有
四季桂成花基因 OfFT、OfSOC1、OfAP1 克隆及其功能研究PEBP 家族共同的结构域；OfSOC1A、OfSOC1B 和 OfAP1 都属于 MADS 家族基因，都含有 MADS 结构域和 K 盒结构（图 3.2）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]水曲柳FmSOC1基因烟草中遗传转化[J]. 齐凤慧,陈思齐,付德山,孟祥宇,詹亚光. 西北林学院学报. 2017(05)
[2]‘四季桂’不同季节的花芽分化与发育比较[J]. 陆婷,王艺光,骆义波,张超,付建新,董彬,胡绍庆,赵宏波. 园艺学报. 2017(06)
[3]红掌2个SOC1基因的克隆、序列与表达分析[J]. 马广莹,朱开元,史小华,邹清成,刘慧春,詹菁,田丹青. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2017(03)
[4]梅花PmSOC1-like基因的克隆与表达分析[J]. 李玉舒,杨炜茹,程堂仁,王佳,张启翔. 华北农学报. 2016(05)
[5]桂花花芽分化和花开放研究进展[J]. 王英,张超,付建新,赵宏波. 浙江农林大学学报. 2016(02)
[6]蝴蝶兰SOC1基因的克隆及表达分析[J]. 崔波,王洁琼,宋彩霞,蒋素华,梁芳,袁秀云,马杰. 分子植物育种. 2016(03)
[7]金柑FcSOC1同源基因的克隆及表达分析[J]. 旦帅男,胡颖,何新华,张奕,安振宇,徐趁,罗聪,黄桂香. 基因组学与应用生物学. 2015(12)
[8]马尾松PmFT1基因克隆及对花发育的影响[J]. 陈虎,杨章旗,谭健晖,冯源恒,贾婕,唐国强,欧军. 基因组学与应用生物学. 2015(04)
[9]拟南芥开花时间调控的分子基础[J]. 张艺能,周玉萍,陈琼华,黄小玲,田长恩. 植物学报. 2014(04)
[10]大岩桐SOC1同源基因的克隆及其功能研究[J]. 韩雪,姜仕豪,钟丹,胡立霞,庞基良. 分子植物育种. 2014(01)
博士论文
[1]菊花FT-likes基因开花调控功能研究[D]. 孙静.南京农业大学 2014
硕士论文
[1]绿竹和雷竹SOC1同源基因克隆和功能分析[D]. 马腾飞.浙江农林大学 2013
[2]桂花不同栽培变种的成花条件及花器官发育的形态解剖学研究[D]. 曹际云.山东大学 2008
本文编号：2985490
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