基于CRISPR/Cas9的水稻ALOG家族成员基因敲除突变体的构建及其成员G1L6的调控网络的研究

发布时间：2021-01-21 02:26

　　ALOG（ArabidopsisLSH1andOryza G1）基因家族成员广泛存在于陆生植物中,并在其生长发育的过程中起到关键的作用。在水稻中ALOG基因家族共有10个成员（Gi,G1I1～G1L9）。其中三个成员（G1,G1L5和G1L6）的功能已被研究,它们都参与了水稻花发育的过程,而其它7个成员的功能尚属未知。本项目主要关注水稻功能未知的7个ALOG基因和已经报道过的G1L6基因,通过CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建它们的基因敲除株系,并进一步地构建基因过表达株系,以此来研究它们的基因功能。观察发现,所有的基因家族成员过表达株系都没有明显的发育缺陷表型,而大多数的家族成员的基因敲除株系也没有明显的发育缺陷表型（G1L1和G1L2的基因敲除株系除外）。考虑到这些基因家族成员之间序列有相似性,这种家族内单基因突变未出现缺陷表型的原因可能跟他们之间功能冗余性有关。G1L6转基因敲除植株表型跟之前报道过的内外稃变窄,呈现“鸟嘴”状的表型很相似,但是其纯合植株表现出明显的不育性状。G1L1和G1L2的转基因敲除株系表现出穗发育缺陷的表型,具体表现为主穗轴变长,而且上面的小穗变少。... 

【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

通过~lappingPCR方法构建sgRNA表达盒方法示意图

图２－２转录组测序实验流程图??Ｆｉｇ．?２－２?Ｔｈｅ?ｆｌｏｗ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ＲＮＡ－ｓｅｑ??样品的质量好坏是整个实验是否成下方法对样品进行检测，检测结果Ａ的纯度（ＯＤ２６０／２８０）、浓度、核酸检测１＾六的完整性，检测指标包括：检测合格后，便可以进行文库的构建品的二级结构，用带有Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）的２６??

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本文编号：2990266