靶向c-myc基因的CRISPR/Cas9腺病毒系统对肝癌的抑制作用

发布时间：2021-01-23 08:40

　　目的:设计、构建并包装靶向c-myc基因的CRISPR/Cas9腺病毒;评估靶向c-myc基因的CRISPR/Cas9腺病毒系统对肝癌的抑制作用.方法:采用生物信息学网站设计靶向c-myc基因的gRNA,以GFP作为对照设计GFP gRNA;通过T7E1筛选出编辑效率高的gRNA并将筛选的gRNA构建CRISPR/Cas9腺病毒载体并包装腺病毒,通过分析细胞增殖、周期和凋亡及迁移能力的变化来评估靶向c-myc基因的CRISPR/Cas9腺病毒系统对肝癌的抑制作用.结果:成功设计、构建并包装靶向c-myc基因的CRISPR/Cas9腺病毒;靶向c-myc基因的CRISPR/Cas9腺病毒系统能够显著抑制Hepa1-6细胞的增殖和迁移、阻滞细胞周期进程,但对细胞凋亡无影响.结论:靶向c-myc基因的CRISPR/Cas9腺病毒系统可在细胞水平明显抑制肝癌细胞的生长. 

【文章来源】：暨南大学学报(自然科学与医学版). 2016,37(04)北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        （1）细胞培养
        （2）小鼠c-myc gRNA序列设计
        （3）筛选编辑效率高的gRNA
        （4）c-myc gRNA CRISPR/Cas9腺病毒载体的构建、病毒的包装和鉴定
        （5）敲除c-myc基因对Hepa1-6细胞增殖、周期、凋亡及迁移的影响
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 T7E1检测c-myc gRNA的编辑效率
    2.2 腺病毒载体的构建
    2.3 检测c-myc腺病毒对Hepa1-6细胞的影响
3 讨论



本文编号：2994911