湿地藓LEAFY基因的结构特征与表达分析
发布时间：2021-01-27 23:00
FLORICAULA/LEAFY（FLO/LFY）同源基因时花发育的调节因子,处于花发育调控网络的中心节点。目前,大部分的LFY基因的研究都集中在开花植物中,但是LFY基因并不是开花植物所特有的,在不开的植物如苔藓中也存在。本研究以湿地藓（Hyophila javanica Brid.）为研究材料,通过PCR、RT-PCR、RACE结合Tail-PCR的技术,获得湿地藓LFY同源基因的cDNA序列、基因组DNA序列及启动子序列。通过生物信息学分析,对湿地藓LFY基因的结构,蛋白质的性质进行分析。并构建了LFY同源基因的系统进化树,对LFY同源基因进行进化分析。本研究开展了湿地藓LFY基因的原核表达分析,并对原核表达的条件进行优化,为后续蛋白质的纯化奠定基础。此外本研究还对湿地藓LFY基因的表达进行了实时荧光定量分析。本研究可以为揭示LFY基因在苔藓植物中的功能研究提供有价值的参考。本研究的主要结果如下:（1）利用RT-PCR结合RACE技术克隆了湿地藓LFY基因的完整基因片段,该基因全长为2633 bp,包括4个外显子与3个内含子,其cDNA全长为1402 bp和1219 bp（HjL...
【文章来源】：西南林业大学云南省
【文章页数】：96 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
苔藓植物生活史Fig.1Lifecycleofamoss
西南林业大学硕士学位论文30软件，进行多序列比对分析，找到相对保守的核苷酸序列区段（见图），设计荧光定量Actin基因的简并引物，分别为F-50:TCNATCATGAARTGYGAYGTNG，R-50:ATCCACATCTGYTGGAAVGT。图2-239条Actin基因序列的比对分析图Fig.2-2Analignmentcomparisonof39kindsofspeciesplantDNAsequencehomologousodActingenens以湿地藓的cDNA为模板，结合简并引物F-50和R-50，进行湿地藓Actin基因的PCR扩增。反应体系如下：cDNA2.0μl3A-F(10μM/each)1.0μl3A-R(10μM/each)1.0μl2×TaqPCRMasterMix20.0μlddH2O16.0μlTotalVol.40.0μl
西南林业大学硕士学位论文34图3-2湿地藓LFY基因中间片段PCR扩增结果Fig.3-2PCRamplificationresultofLFYfromHyophilajavanicamiddlefragment注：1表示LFY基因中间片段PCR扩增结果；M表示DL500DNAmarker；Note:1isthePCRproductionofofLFYfromHyophilajavanicamiddlefragment;MistheDL500DNAmarker将上述获得的湿地藓LFY基因中间片段序列输入NCBI中BLAST选项中的NucleotideBLAST进行序列相似性分析（图3-3），结果显示该序列与已克隆的LFY基因片段相似性很高，其相似度在76%以上，且与Genbank报道的LFY/FLO同源基因均具有较高的同源性，证明所获片段为LFY/FLO同源片段，由此确定该片段为湿地藓LFY基因的部分编码序列。图3-3湿地藓LFY基因中间片段序列相似性分析Fig.3-3nucleotideBLASTalignmentgraphicofLFYfromHyophilajavanicamiddlefragmentinNCBI
【参考文献】：
期刊论文
[1]茶树LEAFY基因的克隆和表达分析[J]. 韩兴杰,徐玲玲,廖亮,李同建,邓辉胜,樊启水. 园艺学报. 2015(08)
[2]白桦开花调控相关基因FLC、LFY和SOC1的克隆及表达分析[J]. 王子佳,姜静,刘桂丰,刘菲菲,李慧玉. 西南林业大学学报. 2014(04)
[3]菲油果LEAFY基因的表达模式及启动子克隆[J]. 冯延芝,张琳,袁德义,龙洪旭,刘敏,张日清,陈圣林. 植物遗传资源学报. 2014(04)
[4]慈竹LEAFY基因和启动子的克隆及序列分析[J]. 白琼,孙晓娇,于丽霞,鄢波. 竹子研究汇刊. 2014(02)
[5]利用LEAFY基因探讨拟单性木兰属植物的多倍体起源及进化（英文）[J]. 王震,段焰青,李青青. Agricultural Science & Technology. 2013(05)
[6]新疆早实核桃LFY同源基因的克隆与分析[J]. 叶春秀,牛建新. 西北农业学报. 2012(11)
[7]棉花GhFTL1基因启动子的克隆及序列分析[J]. 张定国,黄先忠,东锐,郑银英,崔百明. 石河子大学学报(自然科学版). 2012(05)
[8]草莓LFY同源基因的克隆及其表达分析[J]. 刘月学,邹冬梅,李贺,张志宏,马跃,代红艳. 园艺学报. 2012(05)
[9]毛白杨PtLFY基因启动子的克隆及其瞬时表达分析[J]. 李昊,陈仲,李英,王佳,安新民. 中国生物工程杂志. 2012(04)
[10]抗癌蛋白NOR1基因工程重组蛋白表达条件的优化和纯化[J]. 向波,王理,王卫,李文娟,易梅,李小玲,曾朝阳,李桂源. 中南大学学报(医学版). 2011(07)
硕士论文
[1]草莓pgip基因的克隆及其序列分析[D]. 张杰.四川农业大学 2008
本文编号：3003878
【文章来源】：西南林业大学云南省
【文章页数】：96 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
苔藓植物生活史Fig.1Lifecycleofamoss
西南林业大学硕士学位论文30软件，进行多序列比对分析，找到相对保守的核苷酸序列区段（见图），设计荧光定量Actin基因的简并引物，分别为F-50:TCNATCATGAARTGYGAYGTNG，R-50:ATCCACATCTGYTGGAAVGT。图2-239条Actin基因序列的比对分析图Fig.2-2Analignmentcomparisonof39kindsofspeciesplantDNAsequencehomologousodActingenens以湿地藓的cDNA为模板，结合简并引物F-50和R-50，进行湿地藓Actin基因的PCR扩增。反应体系如下：cDNA2.0μl3A-F(10μM/each)1.0μl3A-R(10μM/each)1.0μl2×TaqPCRMasterMix20.0μlddH2O16.0μlTotalVol.40.0μl
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【参考文献】：
期刊论文
[1]茶树LEAFY基因的克隆和表达分析[J]. 韩兴杰,徐玲玲,廖亮,李同建,邓辉胜,樊启水. 园艺学报. 2015(08)
[2]白桦开花调控相关基因FLC、LFY和SOC1的克隆及表达分析[J]. 王子佳,姜静,刘桂丰,刘菲菲,李慧玉. 西南林业大学学报. 2014(04)
[3]菲油果LEAFY基因的表达模式及启动子克隆[J]. 冯延芝,张琳,袁德义,龙洪旭,刘敏,张日清,陈圣林. 植物遗传资源学报. 2014(04)
[4]慈竹LEAFY基因和启动子的克隆及序列分析[J]. 白琼,孙晓娇,于丽霞,鄢波. 竹子研究汇刊. 2014(02)
[5]利用LEAFY基因探讨拟单性木兰属植物的多倍体起源及进化（英文）[J]. 王震,段焰青,李青青. Agricultural Science & Technology. 2013(05)
[6]新疆早实核桃LFY同源基因的克隆与分析[J]. 叶春秀,牛建新. 西北农业学报. 2012(11)
[7]棉花GhFTL1基因启动子的克隆及序列分析[J]. 张定国,黄先忠,东锐,郑银英,崔百明. 石河子大学学报(自然科学版). 2012(05)
[8]草莓LFY同源基因的克隆及其表达分析[J]. 刘月学,邹冬梅,李贺,张志宏,马跃,代红艳. 园艺学报. 2012(05)
[9]毛白杨PtLFY基因启动子的克隆及其瞬时表达分析[J]. 李昊,陈仲,李英,王佳,安新民. 中国生物工程杂志. 2012(04)
[10]抗癌蛋白NOR1基因工程重组蛋白表达条件的优化和纯化[J]. 向波,王理,王卫,李文娟,易梅,李小玲,曾朝阳,李桂源. 中南大学学报(医学版). 2011(07)
硕士论文
[1]草莓pgip基因的克隆及其序列分析[D]. 张杰.四川农业大学 2008
本文编号：3003878
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3003878.html
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