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性别相关基因(Sex-Related Gene)在暗纹东方鲀生殖发育过程中的调控机理研究

发布时间:2021-01-28 01:07
  暗纹东方鲀是我国南方重要的淡水养殖种类之一。暗纹东方鲀精巢营养价值很高,规模化养殖全雄暗纹东方鲀,能够显著提高我国养殖暗纹东方鲀的经济效益。本研究采用转录组学、生物信息学和分子生物学的方法,初步探究了暗纹东方鲀性别相关基因在早期发育过程中的分子调控机制。主要研究结果如下:1.暗纹东方鲀幼鱼遗传性别的鉴定采用ARMS-PCR技术快速检测暗纹东方鲀的遗传性别。根据暗纹东方鲀amhr2激酶结构域内存在一个与性别连锁的错义突变SNP位点,设计特异等位基因引物,即在下游PCR引物3’末端不同碱基位点设计不同种类的错配碱基,进行特异性引物的筛选,并通过优化PCR反应体系与反应条件,建立暗纹东方鲀幼鱼遗传性别差异鉴定的ARMS-PCR方法。此外,为了判断ARMS-PCR方法鉴定暗纹东方鲀幼鱼遗传性别的可行性,我们同时利用直接测序法和组织切片法分别鉴定样品的遗传性别和表型性别。结果表明,利用ARMS-PCR方法可以快速区分暗纹东方鲀的遗传性别,并且ARMS-PCR方法的鉴定结果与直接测序结果相同,同时也与组织切片鉴定的表型性别一致。2.暗纹东方鲀早期发育阶段性腺组织的转录组分析对孵化后601... 

【文章来源】:上海海洋大学上海市

【文章页数】:116 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

性别相关基因(Sex-Related Gene)在暗纹东方鲀生殖发育过程中的调控机理研究


暗纹东方鲀性腺的组织学形态

性别差异,等位基因,PCR扩增产物,稀释产物


暗纹东方鲀性别差异等位基因 PCR 扩on of sex difference allele sequence fragmF 表示雌鱼,M 表示雄鱼。 denotes female fish and M denotes male f图 2-3 暗纹东方鲀雌雄个体的 SNP 分型P typing of male and female individuals in特异性的鉴定及反应条件的优化PCR 扩增稀释产物(50 倍稀释)的产物来鉴定引物的特异性。5 对

分型,引物,稀释产物,片段


图 2-3 暗纹东方鲀雌雄个体的 SNP 分型 SNP typing of male and female individuals in T.物特异性的鉴定及反应条件的优化的 PCR 扩增稀释产物(50 倍稀释)为模增的产物来鉴定引物的特异性。5 对特70bp 的目的 DNA 片段(图 2-4a,b,f,8 和引物 F1/inter R9 在雌性个体中扩增,h,i)。引物 F1/inter R3 和引物 F1/i图 2-4c,e)。引物 F1/inter R4 在雌性个个体中均扩增出目的 DNA 片段(图 2-4显扩增条带,仅在雄性个体中扩增出 1。er R7,对扩增条件进行优化,如设置模量减半等,结果表明引物在模板稀释200时扩增效果最好。


本文编号:3004079

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