双价抗寒基因CBF3/COR15A转化大白菜的初步研究

发布时间：2021-01-28 01:24

　　为探索拟南芥的冷诱导转录因子CBF3和抗寒基因COR15A在"黔白"系列大白菜的转化体系,以"黔白"系列大白菜3个优良自交系作为研究对象,分别用大白菜4d苗龄的带柄子叶、半子叶、下胚轴作为外植体,利用农杆菌介导的方法将同时含有CBF3和COR15A双价抗寒基因的表达载体转入大白菜,就影响大白菜再生和遗传转化的因素进行研究。通过抗生素筛选得到大白菜T0代转基因抗性植株36株,经PCR检测后获得转基因阳性植株6株。经抗寒性初步鉴定,转基因大白菜植株抗寒性超过对照。 

【文章来源】：中国农业大学学报. 2016,21(06)北大核心

【文章页数】：11 页

【文章目录】：
1材料与方法
    1.1试验材料
        1.1.1材料
        1.1.2菌种及表达载体
        1.1.3主要试剂和引物
    1.2方法
        1.2.1无菌苗的获得
        1.2.2不定芽的再生
        1.2.3大白菜的遗传转化
        1.2.4大白菜转化植株的分子检测
        1.2.5转基因大白菜抗寒性的初步鉴定
2结果与分析
    2.1大白菜高频再生体系的建立
        2.1.1大白菜不同基因型和外植体对不定芽再生的影响
        2.1.2植物生长调节剂对大白菜愈伤诱导和芽分化的影响
        2.1.3 AgNO3浓度对外植体再生率的影响
        2 .1 .4苗龄对大白菜再生率的影响
        2.1.5再生芽的生根培养
    2.2大白菜遗传转化体系的建立
        2.2.1卡那霉素（Kan）选择压浓度的确定
        2.2.2抑菌抗生素Carb浓度的确定
        2 .2 .3预培养及共培养时间对转化效率的影响
    2.3大白菜再生-转化体系的建立
    2.4大白菜转化植株的PCR鉴定
    2.5转基因大白菜的抗寒性初步鉴定
3结论与讨论
    3.1结论
        3.1.1建立起了“黔白”系列大白菜子叶-子叶柄的高频再生体系
        3.1.2优化了农杆菌介导的大白菜遗传转化体系
        3.1.3获得6株大白菜转基因植株
    3.2讨论
        3.2.1大白菜基因型的影响
        3.2.2生长调节剂的选择
        3.2.3外植体的选择
        3.2.4其他影响因素
        3.2.5 Kan选择压的影响
        3.2.6转基因大白菜的分子鉴定
        3.2.7转基因大白菜抗寒性的鉴定
        3.2.8今后的研究方向与展望



本文编号：3004103