水稻OsABCC10基因的克隆及功能分析
发布时间:2021-01-30 13:05
盐胁迫是抑制农作物产量的主要非生物胁迫之一。目前,全球约20%的耕地和近一半的灌溉土地受到盐渍化的影响,土壤盐渍化面积达9.0× 108 hm2,这对全球农业生产力和可持续性构成严重威胁。水稻是中国乃至整个世界的主要粮食作物之一,中国超过一半的人口以水稻为主食。水稻作为一种对盐胁迫中度敏感作物,盐胁迫条件下将严重影响其产量,这严重威胁到人类粮食的安全问题。因此,研究水稻耐盐机理,为培育耐盐水稻优良品种提供理论依据,以期解决日益严重的粮食问题就显得尤为重要。ABC(ATP-binding cassette proteins,ABC)转运蛋白是已知的最大蛋白超家族之一,存在于所有的生物体中。植物ABC转运蛋白不仅参与植物体内脂质、激素、金属离子、次生代谢物和外源物质的运输,并且还参与植物与病原体间的相互作用和植物体内离子通道调控等重要的生理过程的进行,是一类重要的跨膜运输蛋白家族。ABCC蛋白为ABC转运蛋白超家族中的一个亚家族,又称多药耐药相关蛋白(Multidrugresistance-associatedprotein,MRP)亚家族,主要参与各种分子从细胞质向外部介质或细胞器基质的...
【文章来源】:广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】:84 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图2?-?1?基因的组织表达模式??Fig?2-?1?Tissue?expression?of?OsABCCIO??
用浓度为丨00?mmol/LNaC丨分别处理5天幼龄水稻幼苗12小时和24小时,随后分别提??取其处理后的幼苗根部总RNA,通过逆转录得到相应的cDNA,并利用qRT-PCR的方??法进行表达分析。实验结果(图2-3)显示,以正常条件下的表达量为棊准,0心15〇:川??基因在盐胁迫条件的表达量随着NaC'l处理时间的延长而増强,在处理24小时后表达景??达到正常条件下的3倍。该结果表明川基因在水稻中的表达量随盐胁迫时间的??延长而升高。??17??
通过Golden?Gate?cloning的克降策略,以边切边连的方式将其连接到双元表达哉体??pYLCRISPR/Cas9上,转入大肠杆菌,使用特定的引物通过菌落PCR的方法进行阳性??验证。结果获得清晰单一的条带,条带大小约为800?bp?(图3-2),与预期相吻合。??31??
【参考文献】:
期刊论文
[1]水稻蛋白酶抑制剂基因OsLTPL164和OsLTPL151的组成型及诱导型表达模式[J]. 何雨娟,鞠迪,王悦,杨雪清,王小奇. 中国农业科学. 2018(12)
[2]改良剂对苏打盐碱土玉米幼苗生长和生理特性的影响[J]. 王明华,李明,高祺,甄善继,李乔,高红秀,金萍. 生态学杂志. 2016(11)
[3]吉林省粳稻种质萌发期耐碱性和耐盐性综合评价[J]. 冯钟慧,刘晓龙,姜昌杰,梁正伟. 土壤与作物. 2016(02)
[4]植物耐盐碱基因工程研究进展[J]. 郭文芳,农万廷,李刚强,刘德虎. 生物技术通报. 2015(07)
[5]不同供氮水平下盐胁迫对水稻光合特性和某些生理特性的影响[J]. 刘晓龙,徐晨,徐克章,崔菁菁,张治安,凌凤楼,安久海,武志海. 华南农业大学学报. 2015(02)
[6]不同浓度盐碱胁迫对水稻生长发育及产量的影响[J]. 朱明霞,高显颖,邵玺文,金峰,耿艳秋,王帅. 吉林农业科学. 2014(06)
[7]盐碱胁迫对农牧作物种子萌发的影响研究进展[J]. 胡宗英,张红香,孙泽威. 中国种业. 2014(05)
[8]植物ATP结合盒(ABC)转运蛋白研究进展[J]. 邵若玄,沈忆珂,周文彬,方佳,郑炳松. 浙江农林大学学报. 2013(05)
[9]植物ABC转运蛋白研究综述[J]. 赵胡,李裕红. 海峡科学. 2012(02)
[10]植物盐胁迫响应及耐盐的分子机制[J]. 金光德,南桂仙. 农技服务. 2011(10)
硕士论文
[1]改良剂对苏打盐碱土及玉米生理特性的影响[D]. 王明华.东北农业大学 2016
[2]苹果两个WRKY转录因子的克隆和表达分析[D]. 谷彦冰.中国农业科学院 2016
[3]不同浓度盐碱胁迫对水稻生长及生理生态特性影响[D]. 高显颖.吉林农业大学 2014
[4]盐碱胁迫下野生大豆幼苗光合特性与离子动态平衡研究[D]. 邵帅.东北师范大学 2012
本文编号:3008952
【文章来源】:广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】:84 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图2?-?1?基因的组织表达模式??Fig?2-?1?Tissue?expression?of?OsABCCIO??
用浓度为丨00?mmol/LNaC丨分别处理5天幼龄水稻幼苗12小时和24小时,随后分别提??取其处理后的幼苗根部总RNA,通过逆转录得到相应的cDNA,并利用qRT-PCR的方??法进行表达分析。实验结果(图2-3)显示,以正常条件下的表达量为棊准,0心15〇:川??基因在盐胁迫条件的表达量随着NaC'l处理时间的延长而増强,在处理24小时后表达景??达到正常条件下的3倍。该结果表明川基因在水稻中的表达量随盐胁迫时间的??延长而升高。??17??
通过Golden?Gate?cloning的克降策略,以边切边连的方式将其连接到双元表达哉体??pYLCRISPR/Cas9上,转入大肠杆菌,使用特定的引物通过菌落PCR的方法进行阳性??验证。结果获得清晰单一的条带,条带大小约为800?bp?(图3-2),与预期相吻合。??31??
【参考文献】:
期刊论文
[1]水稻蛋白酶抑制剂基因OsLTPL164和OsLTPL151的组成型及诱导型表达模式[J]. 何雨娟,鞠迪,王悦,杨雪清,王小奇. 中国农业科学. 2018(12)
[2]改良剂对苏打盐碱土玉米幼苗生长和生理特性的影响[J]. 王明华,李明,高祺,甄善继,李乔,高红秀,金萍. 生态学杂志. 2016(11)
[3]吉林省粳稻种质萌发期耐碱性和耐盐性综合评价[J]. 冯钟慧,刘晓龙,姜昌杰,梁正伟. 土壤与作物. 2016(02)
[4]植物耐盐碱基因工程研究进展[J]. 郭文芳,农万廷,李刚强,刘德虎. 生物技术通报. 2015(07)
[5]不同供氮水平下盐胁迫对水稻光合特性和某些生理特性的影响[J]. 刘晓龙,徐晨,徐克章,崔菁菁,张治安,凌凤楼,安久海,武志海. 华南农业大学学报. 2015(02)
[6]不同浓度盐碱胁迫对水稻生长发育及产量的影响[J]. 朱明霞,高显颖,邵玺文,金峰,耿艳秋,王帅. 吉林农业科学. 2014(06)
[7]盐碱胁迫对农牧作物种子萌发的影响研究进展[J]. 胡宗英,张红香,孙泽威. 中国种业. 2014(05)
[8]植物ATP结合盒(ABC)转运蛋白研究进展[J]. 邵若玄,沈忆珂,周文彬,方佳,郑炳松. 浙江农林大学学报. 2013(05)
[9]植物ABC转运蛋白研究综述[J]. 赵胡,李裕红. 海峡科学. 2012(02)
[10]植物盐胁迫响应及耐盐的分子机制[J]. 金光德,南桂仙. 农技服务. 2011(10)
硕士论文
[1]改良剂对苏打盐碱土及玉米生理特性的影响[D]. 王明华.东北农业大学 2016
[2]苹果两个WRKY转录因子的克隆和表达分析[D]. 谷彦冰.中国农业科学院 2016
[3]不同浓度盐碱胁迫对水稻生长及生理生态特性影响[D]. 高显颖.吉林农业大学 2014
[4]盐碱胁迫下野生大豆幼苗光合特性与离子动态平衡研究[D]. 邵帅.东北师范大学 2012
本文编号:3008952
本文链接:https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3008952.html
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