重组腺病毒p53基因诱导舌癌细胞株SCC-15凋亡的研究

发布时间：2021-02-01 06:24

　　目的检测重组腺病毒介导的p53基因（Ad-p53）对舌癌细胞株SCC-15的转染率及增殖抑制作用,分析Ad-p53诱导SCC-15凋亡的作用机制。方法通过构建带有示踪基因-红色荧光蛋白基因（DsRed）的Adp53,荧光显微镜、激光共聚焦显微镜下观察Ad-p53对舌癌细胞株SCC-15的转染情况及增殖抑制作用,应用流式细胞仪检测药物转染率及诱导凋亡率;Western blotting、RT-PCR、Q-PCR检测p53及其上下游基因MDM2、P21基因以及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白和mRNA的表达变化,探讨Ad-p53诱导SCC-15凋亡的作用机制。结果随着Ad-p53-DsRed感染复数（MOI）的增加,转染率、细胞凋亡率逐渐增加。Western blot和RT-PCR/QPCR检测到Ad-p53-DsRed作用后P53、P21、促凋亡基因Bax的mRNA和蛋白表达增加,而抗凋亡基因Bcl-2的mRNA和蛋白表达降低。结论 Ad-p53能有效转染并诱导舌癌细胞株SCC-15细胞凋亡。 

【文章来源】：北京口腔医学. 2020,28(05)

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

重组腺病毒载体图谱A:Ad-Ds Red;B:Adp53-Ds Red

不同MOI药物对SCC-15的转染率及诱导凋亡率流式散点图和线性比较图

图3 不同MOI药物对SCC-15的转染率及诱导凋亡率流式散点图和线性比较图Mdm2是p53的负调控因子，通过转录抑制和行使E3功能降解P53,同时mdm2又是p53的转录靶基因，含有一个p53基因结合位点，可在野生型p53基因的诱导下转录增强，导致细胞中Mdm2蛋白水平升高。p53-Mdm2的负反馈调节环既可调节P53蛋白活性又可调节Mdm2基因的表达[22]。本研究中实验组细胞内p53m RNA以及蛋白表达随着加入的Ad-p53滴度的增加逐渐增强，而Mdm2 m RNA和蛋白的表达水平分别与p53m RNA以及蛋白表达水平呈现相同的增加趋势。表明进入细胞内的野生型P53基因激活了Mdm2基因的转录，从而增高其表达水平。

【参考文献】：
期刊论文
[1]rAd-p53联合化学药物治疗晚期口腔癌的临床研究[J]. 李一,李龙江,王莉娟,黄元丁,韩波.  北京口腔医学. 2009(02)
[2]野生型p53基因对口腔鳞状细胞癌细胞系生长的影响[J]. 翟德红,马泽云,王衣祥,孙秀艳.  临床口腔医学杂志. 2004(11)
[3]p53在口腔癌癌变过程中的研究[J]. 王霞,孙善珍.  临床口腔医学杂志. 2004(09)



本文编号：3012331