贝莱斯芽孢杆菌羧酸酯酶的基因克
发布时间：2021-02-03 12:06
羧酸酯酶普遍存在于不同生物中,是生物催化研究的重要酶类。它能够有效的催化羧酸酯的水解,在临床、制药、环境修复等方面发挥着重要的作用。论文研究了贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis SYBC H47羧酸酯酶的基因筛选、克隆、表达、酶学性质及其对四种常见邻苯二甲酸酯类（PAEs）塑化剂的降解。主要研究结果如下:（1）通过已知的B.velezensis SYBC H47全基因组的功能注释,筛选到66个酯酶基因;进一步分类后,得到4个羧酸酯酶基因,分别为:baces01、baces02、baces03、baces04。（2）对baces01-bace04的核酸序列和氨基酸序列进行分析得知,四个目的基因的开放阅读框分别为603、1449、741和870 bp,分子量大小分别被预测为22.4、52.8、28.3和31.9 kDa。BaCEs01、BaCEs02、BaCEs03、BaCEs04氨基酸序列中都含有酯酶家族保守基序Gly-Xxx-Ser-Xxx-Gly和丝氨酸催化三联体Ser-Asp-His。通过构建氨基酸序列进化树得知BaCEs01-BaCEs04分别属于酯酶第VI、V...
【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
羧酸酯酶的催化机制Fig.1-1Thecatalyticmechanismofcarboxylesterase
江南大学硕士学位论文6水解是PAEs降解途径中最关键的一步。一般情况下，羧酸酯酶可单独作用于PAEs中的一个酯键，生成邻苯二甲酸单酯(Monoalkylphthalate,MNP)，或者同时作用于两个酯键，产物为邻苯二甲酸(Phthalicacid,PTH)，该中间体毒性更低，且极易被自然界中的微生物所利用，生成H2O和CO2，从而加快降解进程[70]。图1-2PAE的结构通式Fig.1-2GeneralstructuralformulaofPAE目前，对于PAEs水解酶的了解比较有限，且大多数研究仅定性分析。已报道的大多数的PAEs降解酶对于侧链为中等长度的塑化剂，如DNPP和DBP的降解效率较高,而对于侧链长度较短的塑化剂(DMP、DEP)降解效率较低。除此之外，目前已知的PAEs水解酶主要分布于酯酶IV,V,VII和VIII家族和一些未知的家族(表1-2)，其中大部分属于酯酶第IV家族。除了这四个家族的酯酶外，还未发现其他家族的酯酶在塑化剂降解中的应用研究[67]。表1-2PAEs水解酶Table1-2PAEshydrolase酶登录号家族来源菌株参考文献TriacylglycerollipaseAEW03609IVSulfobacillusacidophilusDSM10332[71]EsteraseQ6KZ86IVPicrophilustorridus[72]EsteraseAJO67804IVSphingobiumsp.SM42[73]DialkylPEhydrolaseAFK31309IVAcinetobactersp.M673[74]DialkylPEhydrolaseAGY55959IVUnculturedbacterium[59]DialkylPEhydrolaseAGY55960IVUnculturedbacterium[59]MEHPhydrolaseBAE78500VGordoniasp.P8219[75]MEHPhydrolaseAMJ52171VGordoniasp.YC-RL2[76]MEHPhydrolaseBAU22081VRhodococcussp.EG-5[70]CarboxylesteraseAIZ00845VIIBacillussp.K91[77]EsteraseMH513611VIIGordoniapolyisoprenivorans5F[78]
论文研究路线
【参考文献】：
期刊论文
[1]新型生防微生物因子贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）的研究与应用[J]. 陶永梅,潘洪吉,黄健,席昕,李鹏,卢志军. 中国植保导刊. 2019(09)
[2]果聚糖蔗糖酶基因的克隆表达及酶学性质分析[J]. 徐君,张言周,黎循航,管政兵,蔡宇杰,廖祥儒. 食品与生物技术学报. 2019(03)
[3]邻苯二甲酸酯高效降解菌的筛选及表征[J]. 杨捷,姚炎华,尹大强,叶秀云. 同济大学学报(自然科学版). 2018(07)
[4]酯酶在化学合成中的应用[J]. 马春辉. 化工设计通讯. 2018(06)
[5]来源于Rhinocladiella mackenziei的玉米赤霉烯酮水解酶的表达纯化与酶学性质[J]. 胡翔颖,刘文婷,刘卫东,詹秀倩,郭瑞庭,李华钟,郑迎迎. 微生物学通报. 2018(12)
[6]基于羧酸酯酶降解伏马毒素研究[J]. 陈亭亭,张巧艳,王坡,林琳,杨华,杨兰花,杨胜利,袁玉伟. 饲料工业. 2018(08)
[7]细菌酯酶研究进展[J]. 韦德琴,张晓兰,宋英莉,朱辉. 微生物学杂志. 2018(01)
[8]肝脏和肠道酯酶在药物代谢及新药研发中的作用[J]. 姜金方,李秀立,陈笑艳,钟大放. 药学学报. 2018(02)
[9]酯酶在化学合成中的应用进展[J]. 帅慧慧,薛屏,夏维涛. 化学研究与应用. 2015(07)
[10]羧酸酯酶及其介导昆虫抗药性的研究进展[J]. 任娜娜,谢苗,尤燕春,尤民生. 福建农林大学学报(自然科学版). 2014(04)
博士论文
[1]朱砂叶螨抗药性相关羧酸酯酶基因鉴定及功能分析[D]. 魏朋.西南大学 2019
[2]细胞色素P450和羧酸酯酶在禾谷缢管蚜抗药性中的作用[D]. 王康.西北农林科技大学 2019
[3]桃流胶病拮抗微生物筛选及发酵产抗菌脂肽研究[D]. 黎循航.江南大学 2016
[4]脂环酸芽孢杆菌D-1全基因组测序分析及其羧酸酯酶的研究[D]. 谢振荣.云南师范大学 2014
硕士论文
[1]塑化剂邻苯二甲酸二（2-乙基己）酯（DEHP）水解酶的基因挖掘与催化性能研究[D]. 黄晗.华东理工大学 2019
[2]Picrophilus torridus嗜热酯酶EstPt 1的性质研究以及对塑化剂的降解研究[D]. 杜晓韵.东华大学 2019
[3]细菌Pantoea ananatis Sd-1中新的羧酸酯酶的鉴定及其催化性质研究[D]. 黄梅.湖南大学 2018
[4]塑化剂降解菌Acinetobacter sp.LMB-5的性能及其酯酶酶学性质的研究[D]. 方月.华东理工大学 2017
[5]Dictyoglomus Turgidum嗜热羧酸酯酶的分子克隆、表达及酶学性质研究[D]. 郑翠红.上海交通大学 2012
本文编号：3016472
【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
羧酸酯酶的催化机制Fig.1-1Thecatalyticmechanismofcarboxylesterase
江南大学硕士学位论文6水解是PAEs降解途径中最关键的一步。一般情况下，羧酸酯酶可单独作用于PAEs中的一个酯键，生成邻苯二甲酸单酯(Monoalkylphthalate,MNP)，或者同时作用于两个酯键，产物为邻苯二甲酸(Phthalicacid,PTH)，该中间体毒性更低，且极易被自然界中的微生物所利用，生成H2O和CO2，从而加快降解进程[70]。图1-2PAE的结构通式Fig.1-2GeneralstructuralformulaofPAE目前，对于PAEs水解酶的了解比较有限，且大多数研究仅定性分析。已报道的大多数的PAEs降解酶对于侧链为中等长度的塑化剂，如DNPP和DBP的降解效率较高,而对于侧链长度较短的塑化剂(DMP、DEP)降解效率较低。除此之外，目前已知的PAEs水解酶主要分布于酯酶IV,V,VII和VIII家族和一些未知的家族(表1-2)，其中大部分属于酯酶第IV家族。除了这四个家族的酯酶外，还未发现其他家族的酯酶在塑化剂降解中的应用研究[67]。表1-2PAEs水解酶Table1-2PAEshydrolase酶登录号家族来源菌株参考文献TriacylglycerollipaseAEW03609IVSulfobacillusacidophilusDSM10332[71]EsteraseQ6KZ86IVPicrophilustorridus[72]EsteraseAJO67804IVSphingobiumsp.SM42[73]DialkylPEhydrolaseAFK31309IVAcinetobactersp.M673[74]DialkylPEhydrolaseAGY55959IVUnculturedbacterium[59]DialkylPEhydrolaseAGY55960IVUnculturedbacterium[59]MEHPhydrolaseBAE78500VGordoniasp.P8219[75]MEHPhydrolaseAMJ52171VGordoniasp.YC-RL2[76]MEHPhydrolaseBAU22081VRhodococcussp.EG-5[70]CarboxylesteraseAIZ00845VIIBacillussp.K91[77]EsteraseMH513611VIIGordoniapolyisoprenivorans5F[78]
论文研究路线
【参考文献】：
期刊论文
[1]新型生防微生物因子贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）的研究与应用[J]. 陶永梅,潘洪吉,黄健,席昕,李鹏,卢志军. 中国植保导刊. 2019(09)
[2]果聚糖蔗糖酶基因的克隆表达及酶学性质分析[J]. 徐君,张言周,黎循航,管政兵,蔡宇杰,廖祥儒. 食品与生物技术学报. 2019(03)
[3]邻苯二甲酸酯高效降解菌的筛选及表征[J]. 杨捷,姚炎华,尹大强,叶秀云. 同济大学学报(自然科学版). 2018(07)
[4]酯酶在化学合成中的应用[J]. 马春辉. 化工设计通讯. 2018(06)
[5]来源于Rhinocladiella mackenziei的玉米赤霉烯酮水解酶的表达纯化与酶学性质[J]. 胡翔颖,刘文婷,刘卫东,詹秀倩,郭瑞庭,李华钟,郑迎迎. 微生物学通报. 2018(12)
[6]基于羧酸酯酶降解伏马毒素研究[J]. 陈亭亭,张巧艳,王坡,林琳,杨华,杨兰花,杨胜利,袁玉伟. 饲料工业. 2018(08)
[7]细菌酯酶研究进展[J]. 韦德琴,张晓兰,宋英莉,朱辉. 微生物学杂志. 2018(01)
[8]肝脏和肠道酯酶在药物代谢及新药研发中的作用[J]. 姜金方,李秀立,陈笑艳,钟大放. 药学学报. 2018(02)
[9]酯酶在化学合成中的应用进展[J]. 帅慧慧,薛屏,夏维涛. 化学研究与应用. 2015(07)
[10]羧酸酯酶及其介导昆虫抗药性的研究进展[J]. 任娜娜,谢苗,尤燕春,尤民生. 福建农林大学学报(自然科学版). 2014(04)
博士论文
[1]朱砂叶螨抗药性相关羧酸酯酶基因鉴定及功能分析[D]. 魏朋.西南大学 2019
[2]细胞色素P450和羧酸酯酶在禾谷缢管蚜抗药性中的作用[D]. 王康.西北农林科技大学 2019
[3]桃流胶病拮抗微生物筛选及发酵产抗菌脂肽研究[D]. 黎循航.江南大学 2016
[4]脂环酸芽孢杆菌D-1全基因组测序分析及其羧酸酯酶的研究[D]. 谢振荣.云南师范大学 2014
硕士论文
[1]塑化剂邻苯二甲酸二（2-乙基己）酯（DEHP）水解酶的基因挖掘与催化性能研究[D]. 黄晗.华东理工大学 2019
[2]Picrophilus torridus嗜热酯酶EstPt 1的性质研究以及对塑化剂的降解研究[D]. 杜晓韵.东华大学 2019
[3]细菌Pantoea ananatis Sd-1中新的羧酸酯酶的鉴定及其催化性质研究[D]. 黄梅.湖南大学 2018
[4]塑化剂降解菌Acinetobacter sp.LMB-5的性能及其酯酶酶学性质的研究[D]. 方月.华东理工大学 2017
[5]Dictyoglomus Turgidum嗜热羧酸酯酶的分子克隆、表达及酶学性质研究[D]. 郑翠红.上海交通大学 2012
本文编号：3016472
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