UTF1基因在调控人精原干细胞增殖中的作用及其机制研究

发布时间：2021-02-07 23:56

　　目的探讨UTF1基因在调控人精原干细胞增殖中的作用及其机制。方法本研究通过体外培养系统扩增人类SSCs,随后用慢病毒转染体外培养的SSCs,借助慢病毒载体上调、下调SSCs株中UTF1基因表达,通过Western blot和荧光定量PCR检测UTF1基因表达情况,CCK8细胞活性和细胞增殖检测法以及EDU细胞周期检测法检测各组SSCs活力与增殖情况。最后,应用RNA-seq测序分析来明确UTF1基因调控SSCs增殖的重要信号通路,并采用Western blot、RT-PCR技术对筛选出的差异表达基因进行验证。结果在这项研究中,我们通过免疫磁珠法分离成人睾丸组织中的CD90⁺/CD49f⁺SSC,通过体外培养,观察到SSCs迅速增殖成集落,并表达CD49f、CD90、UTF1和PLZF等未分化SSCs标记物,阳性表达率>95%,而分化型SSCs标记物CD117阳性率<1%。UTF1基因表达干扰后,发现UTF1基因过表达组的SSCs增殖活跃,UTF1基因抑制组的SSCs增殖受阻;细胞周期检测发现,UTF1基因表达下调后人SSCs出现G... 

【文章来源】：宁夏医科大学宁夏回族自治区

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Sertoli细胞培养A，B：培养24小时后的支持细胞

Transwell分层的SSCs培养

体外培养的SSC表达CD49f、CD90、UTF1和PLZF，但不表达CD117


本文编号：3023033