水稻稻瘟病抗性基因Pi-ta 2 的候选基因筛选与初步分析

发布时间：2021-02-08 11:26

　　水稻是全世界最主要粮食作物之一,提供全球近60%人口的食物消费,而稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）引起的水稻稻瘟病是水稻最严重的病害之一,严重影响水稻产量。研究稻瘟病抗性基因,进行抗病育种是目前防治稻瘟病最经济有效的方法。由于稻瘟病菌的变异和多样性,抗性品种在种植几年后往往会失去对稻瘟病的抗性,因此挖掘新的抗性基因十分重要。稻瘟病新抗性基因Pi-ta²来源于水稻品种PiNo.4,初步定位于水稻第12号染色体着丝粒区域,前期已经通过Pi-ta²的物理图谱得到了候选基因,构建了候选基因的功能互补载体和CRISPR敲除载体,并获得了3个候选基因互补的阳性苗。本研究主要是筛选Pi-ta²的候选基因并对其功能进行初步分析,主要内容如下:（1）对另外2个候选基因（Pita²-Seq5、Pita²-Seq8）互补载体进行遗传转化实验,对转基因植株进行阳性鉴定,从而获得转基因阳性苗,Pita²-Seq5已获得2株转基因阳性苗,Pita²

【文章来源】：中南民族大学湖北省

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1.1 稻瘟病抗性基因的研究意义
    1.2 稻瘟病抗性基因的研究进展
2研究相关进展">    1.3 Pi-ta²研究相关进展
    1.4 植物抗病分子机制研究进展
    1.5 本研究的目的及意义
2候选基因互补载体遗传转化及抗病分析">第二章 Pi-ta²候选基因互补载体遗传转化及抗病分析
    2.1 前言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 主要试剂与配方
    2.3 实验方案
2候选基因互补载体的水稻遗传转化">        2.3.1 农杆菌介导Pi-ta²候选基因互补载体的水稻遗传转化
0、T₁ 代植株的阳性鉴定">        2.3.2 转基因T₀、T₁ 代植株的阳性鉴定
2候选基因的抗病及表达分析">        2.3.3 Pi-ta²候选基因的抗病及表达分析
    2.4 实验结果与分析
        2.4.1 农杆菌菌株PCR鉴定
2候选基因的水稻遗传转化">        2.4.2 农杆菌介导Pi-ta²候选基因的水稻遗传转化
0 代植株的阳性鉴定">        2.4.3 转基因T₀ 代植株的阳性鉴定
1、T₂ 代植株的阳性鉴定">        2.4.4 转基因T₁、T₂ 代植株的阳性鉴定
        2.4.5 离体接种抗病情况
        2.4.6 RNA逆转录与c DNA检测
        2.4.7 接种稻瘟病菌前后相关防御基因的表达量检测
    2.5 讨论
2候选基因CRISPR载体遗传转化及抗病分析">第三章 Pi-ta²候选基因CRISPR载体遗传转化及抗病分析
    3.1 前言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 主要试剂与仪器
    3.3 实验方案
2候选基因敲除载体的水稻遗传转化">        3.3.1 农杆菌介导Pi-ta²候选基因敲除载体的水稻遗传转化
0 代植株的阳性鉴定">        3.3.2 转基因T₀ 代植株的阳性鉴定
    3.4 实验结果与分析
        3.4.1 农杆菌菌株PCR鉴定
2候选基因敲除载体的水稻遗传转化">        3.4.2 农杆菌介导Pi-ta²候选基因敲除载体的水稻遗传转化
0 代植株的阳性鉴定">        3.4.3 转基因T₀ 代植株的阳性鉴定
2候选基因编辑检测">        3.4.4 转基因苗中Pi-ta²候选基因编辑检测
    3.5 讨论
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文
参与的学术会议


【参考文献】：
期刊论文
[1]Identification and characterization of rice blast resistance gene Pid4 by a combination of transcriptomic profiling and genome analysis[J]. Zhixiong Chen,Wen Zhao,Xiaobo Zhu,Chengdong Zou,Junjie Yin,Mawsheng Chern,Xiaogang Zhou,Heng Ying,Xin Jiang,Yongzhen Li,Haicheng Liao,Mengping Cheng,Weitao Li,Min He,Jing Wang,Jichun Wang,Bingtian Ma,Jirui Wang,Shigui Li,Lihuang Zhu,Xuewei Chen.  Journal of Genetics and Genomics. 2018(12)
[2]全球水稻各类主要产品及市场分析[J]. 周璐琼.  花卉. 2018(10)
[3]利用CRISPR-Cas9基因编辑技术获得水稻OsYUCCA1基因突变体[J]. 何先畅,黄国强,王道洋,常淑伟,张大兵.  基因组学与应用生物学. 2017(11)
[4]植物病原物效应子与寄主植物互作的研究进展[J]. 皮磊,刘艳潇,舒灿伟,周而勋.  分子植物育种. 2018(06)
[5]水稻抗病分子机制研究进展[J]. 李智强,王国梁,刘文德.  生物技术通报. 2016(10)
[6]Plant innate immunity in rice:a defense against pathogen infection[J]. Wende Liu,Guo-Liang Wang.  National Science Review. 2016(03)
[7]水稻稻瘟病抗性基因的定位及克隆研究进展[J]. 李恩宇,王悦,陈光辉.  作物研究. 2014(06)
[8]CRISPR/Cas9系统介导基因组编辑的研究进展[J]. 刘志国.  畜牧兽医学报. 2014(10)
[9]水稻基因组DNA提取方法的研究[J]. 马文东.  黑龙江农业科学. 2014(01)
[10]植物抗病基因（R）与病原物无毒基因（Avr）相互作用机制的研究进展[J]. 何锋,王长春,王锋青,杨玲.  中国细胞生物学学报. 2011(09)

硕士论文
[1]稻瘟病新抗性基因Pita2候选基因的功能研究[D]. 袁坤.中南民族大学 2013



本文编号：3023847