siRNA沉默NOK基因抑制脑胶质瘤U251细胞增殖与侵袭

发布时间：2021-02-12 04:33

　　目的:通过小干扰RNA（siRNA）沉默NOK基因的转录表达,研究NOK基因在人脑胶质瘤细胞U251增殖、凋亡及侵袭中的调控作用。方法:合成NOK siRNA（si-578和si-996）,脂质体转染U251细胞,qRT-PCR、Western blot检测其对NOK基因转录及表达的抑制效果,MTS法及平板克隆形成实验研究其对细胞增殖的影响,Transwell试验检测细胞迁移能力,Annexin V-FITC/7-AAD双染法检测细胞凋亡,Western blot检测Cyclin D1及AKT的蛋白表达。结果:si-578和si-996可显著降低NOK基因转录和表达（P<0.05）。抑制U251细胞NOK基因表达,可显著抑制细胞增殖和侵袭（P<0.05）,凋亡细胞数量明显增加（P<0.05）,G₁期U251细胞数量显著增加（P<0.05）,S期细胞明显减少（P<0.05）,Cyclin D1表达和AKT磷酸化水平明显降低。结论:NOK在脑胶质瘤细胞的增殖、侵袭和凋亡过程中发挥重要调节作用。 

【文章来源】：中国免疫学杂志. 2020,36(14)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

转染NOK siRNA对U251细胞中NOK mRNA和蛋白表达的影响

NOK siRNA对U251细胞增殖和克隆形成的影响

24 h穿过基质胶并贴于聚碳酸脂膜底面的细胞数分别为si-NC(14.2±4.6)个/HP,si-578(4.1±2.2)个/HP和si-996(6.4±3.7)个/HP,与si-NC组相比,si-578和si-996组细胞侵袭能力显著降低,差异有统计学意义(P<0.05,图5)。表1 各组别细胞凋亡指数比较 ( x ˉ ±s,n=9) Tab.1 Apoptotic index of each group ( x ˉ ±s,n=9) Groups Annexin V-FITC/7-AAD double staining method AI(%) t P si-NC 3.45±2.04 - - si-578 17.73±5.08 3.84 <0.001 si-996 15.17±4.24 4.36 <0.001


本文编号：3030266