抗Aβ31-35单链抗体对阿尔茨海默病APP/PS1转基因小鼠病理特征的影响及其机制研究

发布时间：2021-02-17 18:32

　　目的:观察新型抗Aβ31-35单链抗体（scFv17）对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病（AD）模型小鼠脑内病理特征淀粉样β蛋白（Aβ）的清除效应,并从神经炎性反应和Aβ产生相关酶入手研究scFv17发挥神经保护作用的可能机制,为AD免疫学治疗提供新的策略和手段。方法:将15月龄APP/PS1双转基因AD小鼠随机分为以下三组:对照组（Saline）、抗体6E10组和抗体scFv17组。各组小鼠于双侧前额叶皮层与海马区分别行颅内注射scFv17或6E10（左右各2μL,1 mg/m L）,对照组给予等体积的0.01 M的磷酸缓冲液（PBS）。一次性给药7天后,取脑组织进行以下实验:（1）免疫组织化学实验:将小鼠灌注、固定后取脑组织,冷冻保存于-80℃冰箱。随后进行冰冻切片免疫组织化学实验。脑片厚度为25μm,山羊血清封闭,孵育一抗,4℃过夜,二抗孵育2小时,每步结束后PBS清洗3次,每次清洗5分钟,随后DAB显色,封片。显微镜下观察比较各组小鼠前额叶皮层与海马区的Aβ斑块、激活的小胶质细胞（CD45阳性细胞）数量。（2）ELISA检测:将给药后各组小鼠新鲜脑组织取出,高速离心提取前额叶... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 抗Aβ31-35单链抗体对APP/PS1双转基因小鼠脑内Aβ病理特征的影响
    1 材料与方法
        1.1 主要仪器、软件和试剂
        1.2 实验方法
    2 结果
        2.1 scFv17减少APP/PS1小鼠脑内Aβ斑块面积
        2.2 scFv17比6E10更有效地清除APP/PS1小鼠脑内Aβ寡聚体
    3 结论
第二部分 抗Aβ31-35单链抗体调节APP/PS1双转基因小鼠脑内神经炎性反应
    1 材料与方法
        1.1 主要仪器和试剂
        1.2 实验方法
    2 结果
        2.1 scFv17轻微激活小胶质细胞
        2.2 scFv17促进抗炎因子释放
    3 结论
第三部分 scFv17调节APP/PS1小鼠脑内Aβ相关酶的分泌
    1 材料与方法
        1.1 主要仪器和试剂
        1.2 实验方法
    2 结果
        2.1 scFv17显著提高了海马组织中的sAPPα表达
        2.2 6E10显著降低了海马组织中BACE1的表达
        2.3 6E10与scFv17均大幅减少了海马组织中的内皮素含量
    3 结论
    4 讨论
参考文献
综述 单链抗体与阿尔茨海默病免疫治疗
    参考文献
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1][Gly14]-Humanin Protects Against Amyloid b Peptide-Induced Impairment of Spatial Learning and Memory in Rats[J]. Li Yuan,Xiao-Jie Liu,Wei-Na Han,Qing-Shan Li,Zhao-Jun Wang,Mei-Na Wu,Wei Yang,Jin-Shun Qi.  Neuroscience Bulletin. 2016(04)
[2]靶向β-淀粉样蛋白的阿尔茨海默病免疫治疗研究进展[J]. 余云舟,徐青.  国际药学研究杂志. 2016(02)
[3]神经免疫炎症与阿尔茨海默病[J]. 左丽君,张巍.  中华临床医师杂志(电子版). 2013(14)
[4]小胶质细胞与阿尔茨海默病[J]. 蔡志友,晏勇.  生命科学. 2008(01)
[5]β-淀粉样蛋白31-35片段对海马神经元分离膜片Ca2+激活大电导钾通道的抑制[J]. 祁金顺,乔健天.  生理学报. 2001(03)



本文编号：3038371